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《中国病理生理杂志》 2009年10期
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大鼠MSCs体外诱导分化为神经元样细胞过程中发生细胞凋亡的机制研究

何涛  王丽  刘哓燕  冯宁  李娟  
【摘要】:目的:探讨体外诱导大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)向神经元样细胞分化过程中凋亡发生的机制。方法:分离纯化大鼠骨髓间充质干细胞,随机分为3组:对照组为单纯β-巯基乙醇诱导分化组;NEK1/2抑制剂1,4-二氨基-2,3-氰基-1,4-双[2-氨基苯基硫代]丁二烯(U0126)组为自预诱导开始在加入β-巯基乙醇的同时加入10μmol/LU0126;蛋白激酶PKC激动剂氟波酯(PMA)组为自预诱导开始在加入β-巯基乙醇的同时分别加入30nmol/L、120nmol/L与300nmol/LPMA。诱导5h后终止反应,MTT法检测细胞活性,免疫细胞化学检测神经元特异性巢蛋白nestin及凋亡相关蛋白caspase、Bcl-2、Bax的表达情况,TUNEL法检测细胞凋亡指数。结果:诱导后5h与对照组相比,U0126组神经元样细胞的活性、nestin的表达、Bcl-2蛋白阳性表达率均出现增强或升高(P0.05),细胞凋亡指数降低(P0.05);300nmol/LPMA组则显著抑制神经元样细胞的活性和nestin的表达(P0.05),增强Bax并降低Bcl-2的表达(P0.05),细胞凋亡指数明显升高(P0.05)。结论:大鼠MSCs诱导分化为神经元样细胞过程中发生凋亡机制涉及MAPK及PKC信号途径。

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