庚型肝炎病毒包膜糖蛋白E2基因在昆虫细胞中的表达

朱诗应潘卫戚中田

【摘要】：用ＰＣＲ扩增出ＨＧＶＥ２全基因，克隆进杆状病毒表达载体ｐＦＡＳＴＢＡＣＨＴａ中，构建成重组转座载体ｐＦＡＳＴＢＡＣＥ２，转化ＤＨ１０ＢＡＣ大肠杆菌感受态细胞，筛选阳性菌落，抽提大分子质粒ＤＮＡ，获得含ＨＧＶＥ２基因的重组杆状病毒穿梭载体，转染昆虫草地夜蛾Ｓｆ９细胞，出现细胞病变后，收集含有重组病毒颗粒的培养上清，重新感染草地夜蛾Ｓｆ９单层细胞及甜菜夜蛾幼虫，分别收集Ｓｆ９细胞和甜菜夜蛾幼虫体内的血淋巴细胞，进行１２％ＳＤＳ聚丙烯酰胺凝胶电泳，可见表达的融合蛋白带，经亲和层析进行蛋白纯化，用ＥＬＩＳＡ方法检测各类血清标本，初步研究ＨＧＶＥ２糖蛋白的抗原性

【作者单位】：第二军医大学微生物学教研室
【关键词】： 庚型肝炎病毒 包膜糖蛋白E 昆虫细胞 基因表达
【基金】：国家自然科学基金,军队杰出人才基金
【分类号】：R373.21
【正文快照】：

近年来发现的庚型肝炎病毒（ＨＧＶ）属黄病毒科成员之一，其包膜糖蛋白Ｅ２含有产生中和抗体的抗原表位，ＨＧＶ感染者出现Ｅ２抗体往往伴随着病毒血症的消失，是疾病恢复的重要标志［１］。ＨＧＶＥ２抗体的检测可以动态地反映ＨＧＶ感染者的病情发展及转归。所以获取高活

下载全文更多同类文献

PDF全文下载

CAJ全文下载

(如何获取全文？欢迎：购买知网充值卡、在线充值、在线咨询)

CAJViewer阅读器支持CAJ、PDF文件格式，AdobeReader仅支持PDF格式

	【引证文献】
	【引证文献】

中国期刊全文数据库

前2条

1	王卓华,叶凯,徐洪,马辉文,童立恒,彭习亮;庚型肝炎病毒E2区cDNA在毕赤酵母中的表达及抗原性鉴定[J];生物工程学报;2002年02期
2	龚睿,马辉文,童立恒;庚型肝炎病毒NS5cDNA片段的表达及其免疫原性的研究[J];中国病毒学;2001年02期

中国硕士学位论文全文数据库

前2条

1	吴晓兰;庚型肝炎病毒和人干扰素αA-2b cDNA噬菌体随机展示肽库的构建及鉴定[D];第二军医大学;2001年
2	陈来;灰飞虱（Laodelphax striatellus）四种组织原代培养及其cDNA RAPD分析[D];福建农林大学;2004年

	【同被引文献】
	【同被引文献】

中国期刊全文数据库

前10条

1	周育森,陈薇,赵秋敏,赵惠柳,张京生,徐静,王海涛;中国人庚型肝炎病毒全基因cDNA克隆及序列测定[J];军事医学科学院院刊;1996年04期
2	潘卫,戚中田;随机多肽噬菌体展示载体pCANTAB5X的构建[J];第二军医大学学报;1999年10期
3	潘卫,戚中田,贺祥,陈秋莉,潘欣;HCV核心蛋白噬菌体随机展示肽库的构建[J];第二军医大学学报;2000年09期
4	潘卫,戚中田,吴晓兰,贺祥,潘欣,陈秋莉,杜平;从HCV核心蛋白噬菌体随机展示肽库中筛选抗原表位[J];细胞与分子免疫学杂志;2001年01期
5	刘淑珊,王林美;樗蚕蛹精巢细胞传代培养及柞蚕NPV感染试验初步研究[J];蚕业科学;1997年02期
6	谢联辉,魏太云,林含新,吴祖建,林奇英;水稻条纹病毒的分子生物学[J];福建农业大学学报;2001年03期
7	陈广文，陈曲侯;东亚飞蝗（Locusta　migratoria　manilensis）卵巢和胚胎组织的原代培养[J];河南师范大学学报(自然科学版);1994年02期
8	黎路林，陈曲候;小菜粉蝶胚胎细胞的传代培养[J];华中师范大学学报(自然科学版);1995年03期
9	李长友,郑桂玲,王晓云,宋捷,李国勋;八字地老虎血球细胞系的建立[J];昆虫学报;2002年02期
10	吴爱忠,赵艳,曲志才,沈大棱,潘重光,苏德明;水稻条叶枯病毒(RSV)的SP蛋白在介体灰飞虱内的亚细胞定位[J];科学通报;2001年14期

	【二级引证文献】
	【二级引证文献】

中国期刊全文数据库

前2条

1	孙晓东,吴金民,刘杏娥;MAGE-3原核表达载体的构建和表达[J];生物工程学报;2003年03期
2	杨丹,叶佩莹,万津,刘永平,马辉文;谷胱甘肽S-转移酶的诱导表达及提纯[J];氨基酸和生物资源;2004年03期

中国博士学位论文全文数据库

前3条

1	韩雪清;猪瘟病毒E2基因遗传变异及体外表达研究[D];西北农林科技大学;2002年
2	沈元月;脱落酸（ABA）结合蛋白基因克隆、表达及其产物对ABA的特异结合[D];中国农业大学;2003年
3	郑福英;牛流行热病毒糖蛋白G_1抗原表位的表达及重组G_1蛋白抗原间接ELISA方法的建立[D];中国农业科学院;2007年

	【相似文献】
	【相似文献】

中国期刊全文数据库

前10条

1	柯为;昆虫细胞产生人干扰素[J];中国生物工程杂志;1984年02期
2	;简讯[J];国际生物制品学杂志;1984年03期
3	李燕;用杆状病毒载体在昆虫细胞内大量合成Ⅰ型人T细胞白血病病毒功能性P40~x蛋白[J];病毒学报;1987年04期
4	;激素和活性多肽[J];生物技术通报;1992年03期
5	彭建新,陈曲侯;两种昆虫细胞的微载体培养[J];昆虫知识;1993年02期
6	邓继先,萧成祖;昆虫杆状病毒载体的细胞培养和重组蛋白生产[J];中国生物工程杂志;1993年04期
7	邓继先;昆虫杆状病毒载体的细胞培养和重组蛋白生产[J];生物技术通讯;1994年01期
8	邓宁,陈曲侯,洪华珠;昆虫细胞大规模培养和杆状病毒的生产[J];昆虫知识;1995年04期
9	李文青，肖成祖;昆虫细胞的大规模培养[J];生物技术;1995年01期
10	申庆祥,刘海湖,陈文永,Om P.Bahl;大鼠卵巢促黄体激素/人绒毛膜促性腺激素受体cDNA的克隆和在昆虫细胞中的高效表达[J];实验生物学报;1995年03期

中国重要会议论文全文数据库

前10条

1	周德和;魏强;陈洁;徐学军;申庆祥;池志强;;人μ阿片受体在昆虫细胞中高效表达及其与内源性G蛋白偶联[A];第七届全国生物膜学术讨论会论文摘要汇编[C];1999年
2	赵春文;肖定华;王嘉玺;;利用重组杆状病毒在昆虫细胞SF-9中表达人白介素-6[A];中国细胞生物学学会第五次会议论文摘要汇编[C];1992年
3	陈曲侯;余泽华;洪华珠;;苜蓿银纹夜蛾核多角体病毒(AcMNPV)在无血清培养的昆虫细胞内的增殖[A];中国细胞生物学学会第五次会议论文摘要汇编[C];1992年
4	陈曲侯;洪华珠;余泽华;;一种新的无血清培养基[A];中国细胞生物学学会第五次会议论文摘要汇编[C];1992年
5	赵东红;戴祝英;周开亚;张林元;;人工合成家蚕抗菌肽基因类CMIV在昆虫细胞中的表达(摘要)[A];纪念六足学会创建八十周年、江苏省昆虫学会四十周年论文集粹[C];2000年
6	时敏;陆自强;杜予州;;中国昆虫细胞分类学研究现状[A];走向21世纪的中国昆虫学——中国昆虫学会2000年学术年会论文集[C];2000年
7	杨红;彭建新;洪华珠;;应用离体培养昆虫细胞研究苏云金芽孢杆菌的进展[A];走向21世纪的中国昆虫学——中国昆虫学会2000年学术年会论文集[C];2000年
8	谢小燕;郭庆;程通;李少伟;张军;夏宁邵;;不同区段HIV-1 env基因在Bac-to-Bac昆虫细胞杆状病毒表达系统中的表达及检测[A];中国生物化学与分子生物学会第八届会员代表大会暨全国学术会议论文摘要集[C];2001年
9	耿朝晖;刘莹;郜鹏;赵东明;张宝珠;俞新大;;缩短hGH基因5’-UTR可提高在昆虫细胞中的表达水平[A];中国生物化学与分子生物学会第八届会员代表大会暨全国学术会议论文摘要集[C];2001年
10	肖庆利;周亚竞;张志芳;何家禄;;DDAB:DOPE脂质体介导ONA在昆虫细胞中的高效转染[A];中国生物工程学会第三次全国会员代表大会暨学术讨论会论文摘要集[C];2001年

中国重要报纸全文数据库

前10条

1	朱智堂肖鑫;神经营养因子研究获进展[N];人民日报;2000年
2	伦敦帝国癌症研究基金会 Tim Hunt 晨晓译;细胞周期蛋白依赖蛋白激酶和细胞周期的调控[N];中国医学论坛报;2001年
3	;昆虫抗菌肽的抗癌作用机理[N];广东科技报;2002年
4	记者邹淑英;人组织激肽释放酶原研究获进展[N];科学时报;2002年
5	蒋明;重组人白细胞介素－12上临床[N];健康报;2003年
6	;江苏省人民医院老年医学科[N];新华日报;2003年
7	本报特约撰稿人卢作勇;生物技术涌向制药业[N];医药经济报;2003年
8	朱国旺;我国rhBMP-2研究取得进展[N];中国医药报;2004年
9	;20%斑蛾清微乳剂[N];瓜果蔬菜报.农业信息周刊;2005年
10	俞欣陈茂樑;SARS免疫荧光检测法建立[N];健康报;2006年

中国博士学位论文全文数据库

前10条

1	戴亚斌;鸡传染性支气管炎病毒JS/95/03和SD/97/01株S1糖蛋白在昆虫细胞中的表达及其免疫原性评价[D];南京农业大学;2001年
2	罗雯;汉坦病毒囊膜糖蛋白G1与核蛋白部分片段在昆虫细胞中的融合表达及免疫学特性研究[D];第四军医大学;2001年
3	徐侃彦;AVP(4-8)调控基因的新途径研究及大鼠CCTβ在昆虫细胞中的表达[D];中国科学院研究生院（上海生命科学研究院）;2002年
4	施婉君;2种蜜蜂和4种胡蜂溶血肽基因克隆与表达研究[D];浙江大学;2003年
5	严维巍;兔出血症病毒中国株衣壳蛋白基因的表达及其免疫原性初探[D];扬州大学;2003年
6	葛晓冬;脂多糖结合蛋白的分离、纯化及其噬菌体抗体筛选[D];第三军医大学;2003年
7	王晓东;人N端脂多糖结合蛋白（tLBP）基因的克隆表达及保护作用的研究[D];第三军医大学;2003年
8	王海艳;重组鸡γ-干扰素，鸡白细胞介素-18，-2活性及生物学作用的研究[D];内蒙古农业大学;2004年
9	朱诗应;丙型肝炎病毒结构基因的表达及其病毒样颗粒研究[D];第二军医大学;2005年
10	刘鑫;麻疹病毒通过受体SLAM对昆虫细胞的感染及其诱发细胞凋亡的机制研究[D];武汉大学;2005年

中国硕士学位论文全文数据库

前10条

1	武家才;棉铃虫单粒包埋型核型多角体病毒p40、chi基因克隆及chi基因在大肠杆菌和昆虫细胞中的表达[D];浙江大学;2001年
2	刘长梅;鸡新城疫基因工程亚单位疫苗的研究[D];山东师范大学;2001年
3	付莉;丙型肝炎病毒糖蛋白在昆虫细胞中的表达及HCV感染者血清中抗E抗体的检测[D];第四军医大学;2001年
4	张昕泂;1.家蚕细胞瞬时表达人生长激素基因组DNA 2.昆虫细胞抗微生物肽启动子的诱导活性的研究[D];第二军医大学;2002年
5	高国辉;棉铃虫单粒包埋型核型多角体病毒超氧化物歧化酶（HaSNPV sod）基因克隆与表达[D];浙江大学;2003年
6	李小青;肌动蛋白在昆虫细胞中的表达及其在杆状病毒复制和运输中作用的初步研究[D];华中师范大学;2003年
7	徐晓琳;血管生长抑制因子Angiostatin在昆虫细胞中的高效表达及其活性研究[D];中国医科大学;2003年
8	独军政;鸡白细胞介素15基因的克隆及在大肠杆菌和昆虫细胞中的表达[D];甘肃农业大学;2003年
9	顾奇伟;家蚕核型多角体病毒几丁质基因的克隆表达及表达产物对Bt杀虫剂的增效作用[D];浙江大学;2004年
10	李冬梅;旋毛虫分子分类和49ku结构基因在昆虫细胞中表达研究[D];东北农业大学;2004年

	快捷付款方式		订购知网充值卡	订购热线	帮助中心
	银行卡支付宝神州行	知网卡手机短信更多>>	免费送卡上门银行汇款购卡邮局汇款购卡	400-819-9993 010-62791813 010-62985026	常见问题在线咨询阅读器下载	广告服务知网卡新手指南