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《中国病毒学》 2003年05期
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中国株HIV-1核心蛋白真核表达载体的构建与表达

王福祥  孙永涛  王临旭  王久平  王平忠  
【摘要】:运用限制性内切酶Xba Ⅰ、Sal Ⅰ对pKSGAG进行双酶切,获得HIV-1 gag基因,并与真核表达载体pCI-neo连接,构建含有中国流行株HIV-1核心蛋白真核表达载体pCI-neoGAG。经Xba Ⅰ/Sal Ⅰ双酶切及测序鉴定证实,成功地构建了HIV-1核心蛋白真核表达载体pCI-neoGAG。通过脂质体将pCI-neoGAG转染入p815细胞,G418筛选4周后,使用间接免疫荧光方法检测表达产物。结果表明所构建的HIV-1核心蛋白真核表达载体能在p815细胞中高效表达,为下一步进行HIV-1 DNA疫苗研究奠定了基础。

【引证文献】
中国期刊全文数据库 前1条
1 姚亚萍,梁浩,杨介者,魏民,郭志宏,潘晓红,邢辉,邵一鸣;浙江省HIV-I流行毒株GAG基因序列测定和亚型分析[J];中国卫生检验杂志;2004年06期
【参考文献】
中国期刊全文数据库 前1条
1 金宁一;HIV基因结构及其疫苗研究[J];中国病毒学;1997年04期
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前7条
1 秦云龙,金宁一,罗坤,李凡,王宏伟,王莉馨,张永生,殷震;中国流行株HIV-1gag和hIL-2/hIL-6核酸疫苗构建与实验免疫研究[J];免疫学杂志;2001年01期
2 张应玖,金宁一,郭焱,江文正,李子健,沈家骢;HIV-2DNA疫苗免疫小鼠的免疫反应观察[J];免疫学杂志;2002年05期
3 秦云龙,金宁一,罗坤,王莉馨,王宏伟,张永生,邵一鸣,殷震;中国流行株HIV-1Gag与IFN-α2b重组质粒的构建与实验免疫研究[J];中国生物制品学杂志;2001年01期
4 金宁一,王莉馨,罗坤,秦云龙,王宏伟,张应玖,李萍;利用中国流行株HIV-1 Gag重组痘苗病毒与核酸疫苗免疫的新程序[J];中国生物制品学杂志;2001年02期
5 王福祥,孙永涛,孙永年,徐哲,王临旭,白雪帆,黄长形;中国株HIV-1外膜蛋白基因疫苗诱导免疫小鼠免疫应答的实验研究[J];细胞与分子免疫学杂志;2004年03期
6 谢秋玲,陈小佳,戴云,汪炬,洪岸,林剑;中国仓鼠卵巢细胞表达系统在疫苗研制中的应用[J];中国公共卫生;2004年07期
7 吴灵娇,吴南屏,高海女,严正,郑伟;医务人员与医学生艾滋病知识调查[J];浙江预防医学;2004年01期
中国博士学位论文全文数据库 前1条
1 丁忠庆;绵羊梅迪—维斯纳病毒核酸疫苗的制备及免疫学研究[D];东北农业大学;2006年
中国硕士学位论文全文数据库 前4条
1 罗倩怡;食用菌中HIV-1反转录酶和蛋白酶抑制剂的分离与纯化[D];中国农业大学;2003年
2 卫阳;HIV-1 Gag蛋白的重组、表达与应用[D];西北大学;2004年
3 涂国刚;新型逆转录酶抑制剂Nevirapine的研制[D];江西医学院;2004年
4 李晓霞;兔源致病性大肠杆菌OMP_s差异性分析及主要OMP免疫保护性的初步研究[D];山东农业大学;2006年
【同被引文献】
中国期刊全文数据库 前3条
1 邢辉,潘品良,苏玲,范秀娟,冯毅,强来英,邵一鸣;1996~1998年中国流行的E亚型艾滋病病毒1型毒株的分子流行病学研究[J];中国艾滋病性病;2002年04期
2 赵全壁,潘品良,温宁,邢辉,陈钊,魏民,邵一鸣;中国艾滋病病毒1型流行毒株V_3环序列变异性的研究[J];中国艾滋病性病;2002年04期
3 姚亚萍,梁浩,魏民,关琪,杨介者,郭志宏,潘晓红,邢辉,赵全壁,邵一鸣;浙江省HIV-1流行毒株的基因序列测定和亚型分析[J];中国艾滋病性病;2004年01期
【二级引证文献】
中国期刊全文数据库 前1条
1 叶景荣;邢辉;刘海林;黑发欣;赵月娟;刘胜牙;孙伟东;张启云;张琴;卢红艳;贺雄;邵一鸣;;北京市2006年HIV-1流行毒株的gag和env基因序列测定及亚型分析[J];中华流行病学杂志;2007年06期
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 温寿如,黄国超,叶秀英,李恭书;从一名外国留学生检测出人免疫缺陷病毒(HIV-1)抗体[J];病毒学报;1987年04期
2 邵一鸣,陈筝,王斌,曾毅,赵尚德,张作儒;套式聚合酶链反应在HIV-1检测中的应用[J];病毒学报;1993年03期
3 李满,陈辉,王嘉玺,凌世淦,马贤凯;Ⅰ型人免疫缺陷病毒(HIV-1)逆转录酶在大肠杆菌中的表达及其初步纯化[J];中国生物化学与分子生物学报;1993年05期
4 魏红梅;用标准化套式PCR检测全血溶解产物中的HIV-1DNA[J];国外医学.预防.诊断.治疗用生物制品分册;1994年01期
5 何良修;由HIV-1包膜疫苗诱导的对HIV-1gp120和HLA-Ⅰ类分子重链的交叉反应性应答[J];国外医学.预防.诊断.治疗用生物制品分册;1994年06期
6 张师前;垂直传播HIV-1的无症状高危妇女[J];国外医学.妇产科学分册;1994年06期
7 郑淑鹏;HIV-1在泰国的性传播概率[J];国外医学.流行病学.传染病学分册;1994年05期
8 张黎明;PCR测定艾滋病脑病患者脑组织中的HIV-1 DNA序列[J];国外医学.流行病学.传染病学分册;1994年05期
9 谢可鸣;与HIV-1的vif蛋白有共同基元的两种曼氏血吸虫蛋白的分子特征[J];国外医学.寄生虫病分册;1995年03期
10 王剑虹;疫苗诱导的抗天然及重组HIV-1包膜糖蛋白抗体[J];国外医学.预防.诊断.治疗用生物制品分册;1995年02期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 关琪;李鲁平;魏民;邢辉;洪坤学;邵一鸣;;我国HIV-1B′亚型毒株GAG基因变异特征研究[A];2004第二届世界华人临床生化和检验医学大会暨第六届全国检验医学学术会议论文汇编[C];2004年
2 胡勤学;;(HIV-1粘膜感染中的侵入、传播和抑制)(英文)[A];2004年中国科学院新生病毒性疾病控制学术讨论会摘要集[C];2004年
3 谭禾畔;朱江;Wayne A.Hendrickson;;基于结构的HIV-1入侵抑制剂计算机辅助设计[A];科技、工程与经济社会协调发展——中国科协第五届青年学术年会论文集[C];2004年
4 张瑞;张鹏宇;;夏枯草多糖对HIV-1感染者PBMC的免疫调节作用[A];21世纪男科学——中华医学会第五次全国男科学学术会议论文集[C];2004年
5 张静;刘学真;苏生利;黄涛;傅继华;于修平;邢辉;;山东省HIV-1流行株多个基因区的亚型分析[A];第6次全国微生物学与免疫学大会论文摘要汇编[C];2004年
6 黄呈辉;欧阳玲;黄建国;黎淦平;陈汝光;;应用核酸扩增检测(NAT)技术对血液进行HBV、HCV和HIV-1筛查[A];第6次全国微生物学与免疫学大会论文摘要汇编[C];2004年
7 李丹;吴南屏;赵刚;P.Altermeyer;Hoxtermann Stefan;Norbert Brockmeyer;;HIV-1患者经HAART治疗后CD4+T细胞去向初探[A];2004年浙江省传染病、肝病学术会议论文汇编[C];2004年
8 李丹;吴南屏;赵刚;P.Altermeyer;Hoxtermann Stefan;Norbert Brockmeyer;;HIV-1患者经HAART治疗后CD4+T细胞去向初探[A];浙江省免疫学会第五次学术研讨会论文汇编[C];2004年
9 王敏;徐志栋;;以HIV-1 TAR RNA为靶的海藻糖新衍生物的设计、合成及生物效应的研究[A];第一届全国化学工程与生物化工年会论文摘要集(下)[C];2004年
10 赵红;李津如;江龙;;多胺类化合物抑制HIV-1 TAR RNA与Tat的结合[A];中国化学会第十届胶体与界面化学会议论文摘要集[C];2004年
中国重要报纸全文数据库 前4条
1 一凡;科学论争与认知局限[N];中国妇女报;2004年
2 记者 李颖 通讯员 段文利;我国学者在艾滋病患者房水中首次找到HIV病毒载量[N];科技日报;2005年
3 刘汉权;穿心莲有望成为抗艾滋病新药原料[N];中国中医药报;2005年
4 ;白背叶楤木皂苷具有较强的抗肿瘤活性[N];中国中医药报;2005年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 刘北一;结合HIV-1 gp41 NHR的环境肽及模拟gp41融合核心结构表位的筛选与鉴定[D];第一军医大学;2004年
2 李清秀;表达HIV-1的重组痘苗病毒的构建及免疫策略对含有蒙脱石的DNA疫苗免疫作用的影响[D];吉林大学;2004年
3 刘智慧;寡肽(OGP、HIV-1 tat~[47-57])的合成、聚合及功能研究以及NRSF/REST在转录调控方面的研究[D];中国科学院研究生院(上海生命科学研究院);2004年
4 何严萍;非核苷类HIV逆转录酶抑制剂6-萘甲基取代HEPT及DABO类似物的分子设计、合成及生物活性研究[D];复旦大学;2004年
5 蒋卫民;HIV-1 p24和gp41融合基因载体的构建以及融合蛋白在原核细胞中的表达[D];复旦大学;2004年
6 吴霞;趋化因子和趋化因子受体在母—胎界面的表达及其生物学作用[D];复旦大学;2004年
7 齐庆远;[D];复旦大学;2004年
8 王倩;中国HIV/AIDS患者及疾病长期不进展者中和抗体水平及其保守表位氨基酸变异研究[D];中国医科大学;2005年
9 尹春煜;中国HIV-1主要结构基因的序列变异性以及耐药相关性突变分析[D];复旦大学;2005年
10 李朝阳;RNA干扰下调cyclin T1蛋白的表达及其对靶细胞和HIV-1的影响[D];武汉大学;2005年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 褚福亮;应用HIV-1特异性表位多肽HLA-Ⅰ类分子四聚体分析HIV-1感染者体内特异性CTLs的研究[D];中国人民解放军军事医学科学院;2004年
2 刘扬;HIV-1病毒载体疫苗的构建及其表达蛋白的抗原性和免疫原性的研究[D];吉林大学;2004年
3 王贻杰;HIV-1DNA疫苗发酵及纯化工艺研究[D];福建师范大学;2004年
4 杨静;四种杀微生物剂候选物体外抗HIV-1及其它性传播疾病病原体活性的初步评价[D];昆明理工大学;2004年
5 陈峥;HIV-1囊膜糖蛋白gp41核心结构域基因的表达及其单克隆抗体的制备[D];第四军医大学;2004年
6 黄海龙;中国HIV-1主要流行重组株B'/C Tat基因第一外显子序列特征和功能分析[D];福建师范大学;2004年
7 卫阳;HIV-1 Gag蛋白的重组、表达与应用[D];西北大学;2004年
8 曾怡;HIV-1 Tat协同HHV-6对HHV-8裂解周期复制的影响[D];南京医科大学;2004年
9 周小云;表达HIV-1多价合成基因的痘苗病毒载体构建及疫苗株筛选[D];湖南农业大学;2003年
10 邓小玲;我国四川彝族、新疆维吾尔族人群HIV辅助受体CCR5、CCR2和CX3CR1基因多态性的研究[D];汕头大学;2004年
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