庚型肝炎病毒NS5cDNA片段的表达及其免疫原性的研究

龚睿马辉文童立恒

【摘要】：一段长度为 880bp的庚型肝炎病毒cDNA在大肠杆菌BL2 1(DE3)菌株中得到表达。此cDNA被插入到表达质粒 pGEX 5X 1中 ,位于编码日本血吸虫谷胱甘肽硫转移酶 (GST)的DNA序列下游 ,并与GST处于同一阅读框。用乳糖在 37℃下诱导表达出以包涵体形式存在的GST NS5 3融合蛋白 ,并用脲溶法提取了该蛋白 ;在 2 0℃诱导时 ,表达出的蛋白大部分可溶 ,用谷胱甘肽Sepharose 4B亲和层析柱对可溶性的融合蛋白进行了纯化。免疫印迹实验证明 ,此融合蛋白能被庚型肝炎病人的血清和自制的抗GST血清特异性地识别。用PCgene软件对NS5 3氨基酸序列的亲水性和抗原决定簇进行了分析。本研究为庚型肝炎ELISA诊断试剂研制打下了基础。

【作者单位】：武汉大学生命科学学院!湖北武汉430072 武汉大学生命科学学院!湖北武汉430072 武汉市生物技术研究开发中心!湖北武汉430033
【关键词】： 庚肝病毒非结构蛋白 基因表达 免疫原性
【基金】：武汉市科委资助!项目 (976 0 0 40 44)
【分类号】：R373
【正文快照】：

庚型肝炎病毒 (ＨＧＶ )是近年来发现的主要经血液、体液传播的单正链ＲＮＡ病毒 ,受感染人群遍布世界各地。它与ＨＣＶ同属黄病毒科。其基因组约 9.4ｋｂ ,由单一的阅读框编码约 2 90 0个氨基酸的多聚前体蛋白质[1] 。Ｌｅａｒｙ等人将根据ｃＤＮＡ序列推导出的ＨＧＶ变种Ｇ

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