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柿果实扩张蛋白基因cDNA克隆及原核表达

常晓晓  饶景萍  刘乐  
【摘要】:以‘富平尖柿’(DiospyroskakiL.‘FupingJianshi’)果实不同发育时期提取的总RNA为模板,利用RT-PCR结合RACE技术扩增得到5个扩张蛋白基因:成熟期CDK-Exp3(1168bp),转色期CDK-Exp4(1120bp)和CDK-Exp5(1018bp),膨大期CDK-Exp6(1129bp)和CDK-Exp7(1121bp);5个基因的开放阅读框(ORF)均为765bp,编码254个氨基酸;构建了CDK-Exp3原核表达载体pET-CDK-Exp3,并转化于E.coliBL21(DE3),SDS-PAGE检测结果显示表达了一个约43kD的蛋白。

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