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《遗传学报》 2000年03期
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苏云金芽孢杆菌(Bt)晶体毒蛋白基因在烟草叶绿体中的表达

张中林  任延国  沈燕新  山松  范国昌  吴祥甫  钱凯先  沈桂芳  
【摘要】:将全长3.5kb的Bt基因3'端缺失,得到长为2.1kb、1.8kb的基因。分别将这3个长度 (1.8kb2.1kb、3.5kb)的基因置于水稻叶绿体psbA基因的启动于和终止子调控之下,并与选择 标记基因aadA(编码氨基糖苷-3'-腺苷酸转移酶,具壮观霉素抗性)表达盒相连5以烟草叶绿 体基因trnH-psbA-trnK为同源片段,构建成叶绿体转化载体pBT3、pBT8和pBT22。用基因枪 把Bt基因导入烟草叶绿体中,以壮观霉素筛选,获得转化再生植株。经Southern、Western检测 分析证明Bt基因已整合进入烟草叶绿体基因组中并得到表达。且子代呈现壮观霉素抗性,即 外源基因得到稳定的遗传。利用转基因植株叶片对棉铃虫进行杀虫实验,有些转化植株表现 出较强的抗虫性。总体上来说,转Bt全长基因的烟草植株,其杀虫效果最好,其余两种差异不 大。首次报道将Bt基因成功转入高等植物叶绿体并获得表达。

【引证文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 侯丙凯,张中林,周奕华,章银梅,沈桂芳,陈正华;油菜叶绿体定点转化载体的构建及其杀虫性[J];高技术通讯;2000年07期
2 刘建强,孙仲序;植物基因转化方法的研究概况[J];河北果树;2002年05期
3 郭线茹,蒋金炜,罗梅浩,马继盛;转基因抗虫烟草研究进展[J];昆虫知识;2005年04期
4 董玲;李海龙;刘辉;韩亚杰;陈创夫;;提高植物疫苗外源蛋白表达量的研究进展[J];内蒙古农业科技;2006年02期
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8 刘建强,孙仲序,赵春芝;转基因植物鉴定方法的研究概况[J];山东林业科技;2002年05期
9 苏宁,吴燕民,孙丙耀,沈桂芳;植物基因工程新途径:叶绿体转化[J];生物技术通报;2001年04期
10 皮灿辉,易自力,王志成;提高转基因植物外源基因表达效率的途径[J];中国生物工程杂志;2003年01期
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 唐灿明;转Bt基因和Bt+CpTI基因抗虫棉的遗传评价及利用研究[D];南京农业大学;2003年
2 潘卫东;杜氏盐藻(Dunaliella salina)叶绿体转化研究[D];郑州大学;2003年
3 黄科;利用CYP86MF反义基因转化创建青花菜与芥蓝雄性不育植株的研究[D];浙江大学;2004年
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5 李永春;利用Cry1Ac和CpTI双价基因及组织特异启动子增强转基因水稻对螟虫的抗性[D];浙江大学;2002年
6 邹永梅;北美—球悬铃木转基因受体系统的建立及遗传转化研究[D];南京林业大学;2005年
7 董江丽;利用转基因苜蓿生产轮状病毒可食用疫苗研究[D];中国农业大学;2005年
8 周晓红;弓形虫MAG和tSAG1在转基因番茄中的表达研究[D];第一军医大学;2004年
9 余涛;植物逆境相关基因的克隆、表达及功能分析[D];武汉大学;2004年
10 卢其能;马铃薯花色苷及其生物合成的主要关键酶基因的克隆与表达分析[D];南京农业大学;2006年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 刘芳;抗虫棉花铃期Bt基因不同器官抗虫性表达差异及其调控[D];西北农林科技大学;2003年
2 郭玉芳;棉花聚合不同转Bt基因材料的表达特征及转基因正常、突变株间的分子差异研究[D];南京农业大学;2003年
3 李钱鱼;玉簪属(Hosta)植物的品种资源及其花叶嵌合体特性研究[D];浙江大学;2004年
4 崔欣;大豆子叶节受体系统的建立及农杆菌转化的研究[D];东北农业大学;2002年
5 王昌正;乙肝表面抗原基因导入莴苣植株的研究[D];首都师范大学;2003年
6 李桂英;转GNA+SBTi双价基因抗虫水稻的遗传分析及抗虫性研究[D];西北师范大学;2002年
7 蒋迪;甜蛋白基因Brazzein在大肠杆菌中的表达及对生菜和烟草的遗传转化[D];浙江大学;2002年
8 郝炜;中国葡萄属野生种抗白粉病基因原核表达与抗体制备[D];西北农林科技大学;2005年
9 申慧峰;利用转基因植物研制新型口蹄疫基因工程亚单位疫苗[D];宁夏大学;2005年
10 刘科;利用转基因烟草生产乙肝疫苗的研究[D];西北大学;2004年
【参考文献】
中国期刊全文数据库 前1条
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【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
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2 梁小友,米景九,潘乃隧,陈章良;烟草双抗(抗病抗虫)基因工程[J];农业生物技术学报;1994年01期
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9 侯丙凯,张中林,周奕华,章银梅,沈桂芳,陈正华;油菜叶绿体定点转化载体的构建及其杀虫性[J];高技术通讯;2000年07期
10 张汉尧,刘小珍,杨宇明;植物抗虫基因工程研究进展[J];河南农业科学;2005年03期
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 易自力;外源基因转化南荻和籼稻的研究[D];湖南农业大学;2000年
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3 夏兰芹;Bt杀虫基因在转基因抗虫棉中的表达与遗传稳定性的研究[D];中国农业科学院;2000年
4 李银心;抗盐、耐海水蔬菜的生物技术培育与海水无土栽培应用[D];中国科学院植物研究所;2001年
5 薛永常;杨树木质素合成酶PAL基因的克隆、鉴定及其表达载体的构建[D];中国林业科学研究院;2001年
6 吴家和;棉花体细胞胚胎发生的调控及其抗病虫基因的遗传转化[D];华中农业大学;2004年
7 高聪芬;转基因棉对棉铃虫的抗虫性、高表达及生长发育的影响[D];南京农业大学;2004年
8 吴颖;茶树主要品质性状关键基因的反义基因遗传转化及表达研究[D];浙江大学;2005年
9 邹永梅;北美—球悬铃木转基因受体系统的建立及遗传转化研究[D];南京林业大学;2005年
10 刘志芳;大豆组织培养高频率再生技术的研究[D];中国农业科学院;1999年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 高泽发;人工合成雪花莲凝集素(GNA)基因在转基因小麦中的表达与抗蚜虫效果研究[D];首都师范大学;2006年
2 崔岩;大豆利用花粉管通道技术导入抗病虫目的基因的研究[D];东北农业大学;2000年
3 张玉;延缓叶片衰老基因PPF1导入水稻的初步研究[D];四川农业大学;2003年
4 伍晓丽;玉米自交系农杆菌转化体系的建立及转抗虫基因玉米植株的获得[D];四川农业大学;2003年
5 刘芳;抗虫棉花铃期Bt基因不同器官抗虫性表达差异及其调控[D];西北农林科技大学;2003年
6 丁敏;抗双翅目Bt杀虫基因GFMcry11B的人工合成、原核表达及植物转基因的研究[D];华中农业大学;2003年
7 陈志厚;全人工合成SCH基因、植物表达载体的构建和转基因籼稻的获得[D];福建农林大学;2003年
8 温晓明;溶血栓作用的纳豆激酶基因导入莴苣植株的研究[D];广西大学;2003年
9 王颖;转基因三倍体毛白杨外源基因及其表达的检测[D];河北农业大学;2004年
10 于海清;农杆菌介导获得可去除选择标记的转CpTI抗虫基因玉米植株[D];四川农业大学;2004年
【同被引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 许东晖,李宝健,刘煜,黄志纾,古练权;对根癌农杆菌vir区基因具诱导作用的水稻信号分子的分离和确定[J];中国科学C辑;1996年06期
2 袁力勇,李绍清,李阳生,冯双华,戴长柏,李达模;水稻悬浮细胞系的建立[J];云南大学学报(自然科学版);2003年04期
3 黄上志,黄祥富,林晓东,张以顺,刘军,傅家瑞;热激对水稻幼苗耐冷性及热激蛋白合成的诱导[J];植物生理与分子生物学学报;2004年02期
4 张侠,尹海波,熊冬金,张慧,赵彦修;植物热激蛋白70[J];植物生理学通讯;2004年04期
5 王火旭,王关林,王晓岩,方宏筠,贾士荣,唐益雄,魏毓棠;大白菜AB-81高频再生系统的建立及gusA基因瞬时表达的研究[J];园艺学报;2001年01期
6 许隆祺,方悦怡,许景田,常江,冯正,周长海,张雪强,曹淳力,庞颜坤,蒋则孝;我国食物源性寄生虫病的流行形势与对策[J];中国寄生虫病防治杂志;1999年02期
7 唐丁,郭龙彪,钱前;水稻转基因技术与转基因水稻[J];中国稻米;2005年05期
8 涂方旭,况雪源,李艳兰;对广西甘蔗冻害区划的探讨[J];广西蔗糖;2002年04期
9 李瑞美,杨昆正,林一心,谢木水;几个自育甘蔗品种抗寒性测定[J];甘蔗;1998年04期
10 杨剑波,吴李君,吴家道,吴跃进,余增亮,许智宏;应用低能离子束介导法获得水稻转基因植株[J];科学通报;1994年16期
中国博士学位论文全文数据库 前8条
1 姚伟;SCMV-CP基因克隆及遗传转化甘蔗研究[D];福建农林大学;2004年
2 夏兰芹;Bt杀虫基因在转基因抗虫棉中的表达与遗传稳定性的研究[D];中国农业科学院;2000年
3 张明洲;农杆菌介导高梁转化体系的建立与Bt(Bacillus thuringiensis)抗虫基因的导入[D];浙江大学;2002年
4 唐灿明;转Bt基因和Bt+CpTI基因抗虫棉的遗传评价及利用研究[D];南京农业大学;2003年
5 林拥军;农杆菌介导的水稻转基因研究[D];华中农业大学;2001年
6 王西平;中国葡萄属野生种抗白粉病基因克隆与序列分析[D];西北农林科技大学;2004年
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8 马昭才;一粒系小麦种质资源分子生物学研究[D];四川农业大学;2006年
中国硕士学位论文全文数据库 前5条
1 袁小玲;转Bt+CpTI双价基因抗虫棉对棉铃虫抗性的遗传稳定性及时空表达特性研究[D];南京农业大学;2001年
2 刘海燕;Rol基因向棉花基因组的导入及其对棉花生育特性的影响[D];华中农业大学;2003年
3 盛艳萍;大葱再生体系建立及内源激素变化的研究[D];山东农业大学;2004年
4 陈飒;大豆叶绿体转化载体pJY系列的构建及其转化研究[D];浙江大学;2006年
5 国霁;甜菜叶绿体高效表达载体的构建[D];哈尔滨工业大学;2006年
【二级引证文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 曲勍;李校堃;于雅琴;;利用油体表达系统生产外源重组蛋白[J];中国生物工程杂志;2007年08期
2 朱苏文;韩国民;江腾;;玉米淀粉分支酶基因启动子的克隆及生物信息学分析[J];安徽农业科学;2007年14期
3 张艳贞,王罡,季静;农杆菌介导的玉米遗传转化研究进展、问题与分析[J];东北农业大学学报;2003年01期
4 王志英,范海娟,薛珍,詹亚光;转基因白桦抗性等级划分及其对幼虫中肠的影响[J];东北林业大学学报;2005年03期
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6 尹青女,吕慧颖,朱保葛,张敬;农杆菌介导法将热激转录因子8基因转入大豆[J];分子植物育种;2004年06期
7 周奕华,石东乔,侯丙凯,肖宇红,张中林,张丽华,沈桂芳,胡赞民,陈正华;两段杨树叶绿体DNA片段的克隆及叶绿体定点转化载体的构建[J];高技术通讯;2001年09期
8 王旺田,张金文,刘玲玲,陈正华;rbcS启动子的克隆及活性鉴定[J];甘肃农业大学学报;2004年03期
9 周晓红,陈晓光;植物口服疫苗研究及其在寄生虫病防治中的应用前景展望[J];国外医学.寄生虫病分册;2004年06期
10 吴关庭,胡张华,郎春秀,陈笑芸,王伏林,金卫,陈锦清,夏英武;农杆菌介导高羊茅遗传转化体系的建立[J];核农学报;2005年05期
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 李福荣;万寿菊雄性不育的遗传与应用研究[D];北京林业大学;2005年
2 李永春;利用Cry1Ac和CpTI双价基因及组织特异启动子增强转基因水稻对螟虫的抗性[D];浙江大学;2002年
3 张海文;PDF1.2启动子中茉莉素应答的顺式作用元件及其相关转录因子的研究[D];湖南农业大学;2002年
4 林娟;麻疯树(Jatropha curcas)毒蛋白(curcin)的分离纯化、基因克隆及作用机理研究[D];四川大学;2002年
5 张景昱;利用转基因植物生产生物可降解塑料(PHB)的研究[D];中国科学院研究生院(植物研究所);2002年
6 刘宝辉;玉米蔗糖磷酸合成酶(SPS)基因的克隆及对甜菜遗传转化的研究[D];东北农业大学;2003年
7 刘太国;BYDV-GPV株系正向串联体结构复制酶基因介导的转基因小麦研究[D];中国农业科学院;2003年
8 张贵星;光诱导表达载体的构建及其在盐藻除草剂抗性转化中的应用[D];郑州大学;2003年
9 潘卫东;杜氏盐藻(Dunaliella salina)叶绿体转化研究[D];郑州大学;2003年
10 吕玉民;杜氏盐藻(Dunaliella salina)两种碳酸酐酶基因的克隆和启动子功能研究[D];郑州大学;2003年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 游颜杰;植物生长点转化法的初步建立[D];河北师范大学;2005年
2 杜春芳;花粉介导法在油菜转基因育种中的应用研究[D];山西农业大学;2004年
3 潘宁;奇异果甜蛋白thaumatin基因二价载体在玉米中的共表达及其在酵母中的表达[D];首都师范大学;2005年
4 孙碧坡;抗盐草地早熟禾高效转基因体系的研究[D];中国农业大学;2005年
5 李丽;转基因植物生产生物可降解塑料PHB的研究——napinB启动子的分离和功能鉴定及转基因油菜获得[D];首都师范大学;2001年
6 李晓;棉花基因转化的研究及其在纤维品质改良中的应用[D];浙江大学;2002年
7 胡国成;适合于水稻的激发标签载体的优化和水稻激发标签突变体库的构建[D];浙江大学;2002年
8 于群;水稻条纹病毒CP、SP基因转化水稻及RNA4全长序列分析[D];福建农林大学;2002年
9 张艳贞;利用转基因技术将Bt杀虫蛋白基因导入优良玉米自交系的研究[D];中国人民解放军军需大学;2002年
10 孔建强;甜味蛋白thaumatin cDNA基因转化烟草的方法研究[D];首都师范大学;2003年
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1 史开兵,李勇;作物基因工程进展和展望[J];湖南农业科学;2005年03期
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3 苏宁,冯丽,杨波,孟昆,李轶女,沈桂芳;水稻巯基蛋白酶抑制剂基因在烟草叶绿体中的表达[J];作物学报;2002年03期
4 张茜;张金凤;付文锋;张鸿景;袁文军;;安全转基因技术研究进展[J];遗传;2011年05期
5 孔宁;王旭静;唐巧玲;王志兴;贾士荣;;生物学措施限控基因漂流的研究进展[J];中国农业科技导报;2008年03期
6 范国昌,山松,钱凯先,沈桂芳;转基因植物生产动物疫苗的研究及应用[J];遗传;1998年01期
7 尚常花;杨康;袁振宏;王忠铭;朱顺妮;;藻类转基因研究进展[J];安徽农业科学;2011年13期
8 ;[J];;年期
9 ;[J];;年期
10 ;[J];;年期
中国重要会议论文全文数据库 前1条
1 余建平;吕月萍;刘佳莉;刘建国;郭长虹;;GFP叶绿体转化烟草茎叶降解对土壤微生物及土壤酶活性的影响[A];2010植物免疫机制研究及其调控研讨会论文集[C];2010年
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1 赫冬梅;猪瘟和口蹄疫病毒抗原基因在植物内的重组与表达[D];浙江大学;2005年
中国硕士学位论文全文数据库 前1条
1 钟雪;口服SARS候选亚基疫苗S-RBD在烟草叶绿体中的表达研究[D];吉林师范大学;2012年
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