收藏本站
《遗传学报》 1998年06期
收藏 | 投稿 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

玉米单染色体的分离和体外扩增

胡赞民  党本元  周奕华  崔丽华  王兰岚  张铁汉  李良材  陈正华  
【摘要】:建立了玉米单染色体的分离及体外扩增的方法。取95%乙醇固定后经果胶酶和纤维酶酶解的根尖制备染色体标本,用自制的微细玻璃针在倒置显微镜下挑取目的染色体。染色体DNA经Sau3A酶切后与人工合成的Sau3A连接接头连接,经两次PCR扩增获得足以用于构建单染色体DNA文库的扩增产物。片段大小为0.3~5kb,多数为0.5~3.5kb.与前人研究方法相比,所需底物量少(只需1条染色体),扩增片段大,为植物中小型染色体分离、体外扩增进而进行单染色体DNA文库构建奠定了基础。