收藏本站
《徐州医学院学报》 2010年02期
收藏 | 投稿 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

野生型MLK3真核表达载体的构建及其表达

金磊  岳军  杜彩萍  侯筱宇  
【摘要】:目的构建野生型MLK3真核表达质粒并转染至COS-7细胞中表达。方法以大鼠海马总RNA为模板,通过RT-PCR分段扩增MLK3的序列,采用酶切、链接的方法先将目的基因克隆至pGEM-T,筛选正确的质粒后,再亚克隆至pcDNA3.1(+)。以脂质体转染法将构建好的重组质粒转染至COS-7细胞,通过免疫印迹鉴定重组质粒的表达。结果限制性内切酶酶切和测序结果表明,扩增出的野生型MLK3的序列正确。免疫印迹显示,转染的重组质粒在相对分子质量92×103处有相应条带出现。结论成功构建了MLK3的真核表达质粒,重组质粒在COS-7细胞中高效表达。

【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 温进坤;;大肠杆菌制造人体生长素[J];河北医科大学学报;1980年02期
2 Yuet Wai Kan;Judy C Chang;Raymood Poon;任兆瑞;;人类α-、β-、γ-珠蛋白mRNA的5'端和3'端非翻译区的核苷酸顺序[J];医学分子生物学杂志;1980年03期
3 罗慕强;姚曾序;;人鼻咽癌上皮样细胞CNE株的耐高温生长特性[J];分子细胞生物学报;1981年03期
4 Louise Clarke ,静国忠;从基因库筛选特定克隆的放射性抗体法[J];中国生物工程杂志;1982年01期
5 Franklin Costantini ,Elizabeth Lacy ,赵晜;小鼠生殖系统中兔β-珠蛋白基因的引入[J];中国生物工程杂志;1982年02期
6 R. W. Davis ,赵邦悌;可用于酶分析和杂交分析的DNA的快速分析法[J];中国生物工程杂志;1982年02期
7 朱睿中;外来基因整合入哺乳动物种系:遗传工程进入新阶段[J];中国生物工程杂志;1982年02期
8 梁志国;用啤酒酵母线粒体DNA构建的新型酵母载体[J];中国生物工程杂志;1982年02期
9 何丰 ,柯为;分子遗传学术语解释[J];中国生物工程杂志;1982年02期
10 J. Padayatty ,张燕生;鸡珠旦白cDNA在细菌质体中的克隆[J];中国生物工程杂志;1982年03期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 阳剑波;宾亮华;李忠花;张小慧;李江;钱骏;张必成;周鸣;谢奕;李桂源;;9p21-22区域鼻咽癌候选抑瘤基因的克隆及其功能的初步研究[A];2000全国肿瘤学术大会论文集[C];2000年
2 李龙江;龚浩;温玉明;王昌美;李声伟;陈俊杰;王若菡;;615小鼠H-2K~k基因cDNA的克隆、序列测定和分析[A];第一届全国口腔颌面部肿瘤学术会议论文汇编[C];2001年
3 胡秋蕾;陈虹虹;刘劲松;黄维义;林瑞庆;宋慧群;朱兴全;;ITS rDNA序列分析用于鉴定异尖线虫的研究[A];中国畜牧兽医学会家畜寄生虫学分会第五次代表大会暨第八次学术研讨会论文集[C];2004年
4 徐■庭;刘劲松;陈虹虹;林瑞(厂大);吴绍强;宋慧群;朱兴全;;简单异尖线虫■S rDNA的PCR扩增克隆及序列分析[A];中国畜牧兽医学会家畜寄生虫学分会第五次代表大会暨第八次学术研讨会论文集[C];2004年
5 马丽丽;盛伟华;谢宇锋;缪竞诚;王金志;庄文卓;李丽娥;杨吉成;;人Epsilon干扰素(hIFN-ε)的基因克隆和表达[A];首届长三角科技论坛——长三角生物医药发展论坛论文集[C];2004年
6 马丽丽;王建红;盛伟华;谢宇锋;杨吉成;;人lamda3干扰素(hIFN-λ3)基因克隆及表达[A];首届长三角科技论坛——长三角生物医药发展论坛论文集[C];2004年
7 蔡建平;谢明权;覃宗华;艾哈迈德;彭新宇;魏文康;吴惠贤;;毒害艾美耳球虫广东株微线蛋白-2基因的克隆及序列分析[A];中国畜牧兽医学会家畜寄生虫学分会第五次代表大会暨第八次学术研讨会论文集[C];2004年
8 鲍卫超;刘群;;堆型艾美耳球虫(Eimer ia acervulina)北京株α-微管蛋白基因的克隆和表达[A];中国畜牧兽医学会家畜寄生虫学分会第五次代表大会暨第八次学术研讨会论文集[C];2004年
9 余劲术;刘群;;犬新孢子虫(Neospora caninum)NcSRS2基因的克隆与融合蛋白的表达[A];中国畜牧兽医学会家畜寄生虫学分会第五次代表大会暨第八次学术研讨会论文集[C];2004年
10 周建民;汪明;;鸡艾美耳球虫3-1E基因的克隆与表达[A];中国畜牧兽医学会家畜寄生虫学分会第五次代表大会暨第八次学术研讨会论文集[C];2004年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 本报记者 王印毅;“盗版”的予与盾[N];重庆商报;2000年
2 永青/文;拒绝克隆[N];中国企业报;2000年
3 贺绍俊;地域文化拒绝信息化时代的文化克隆[N];中国税务报;2000年
4 本报记者 陈晓红;任鸣不愿克隆“人艺风格”[N];中国艺术报;2000年
5 记者 姚备;复星重整克隆公司股权[N];中国证券报;2000年
6 许步书;赫胥黎的预言[N];福建日报;2000年
7 胡菊娣 王东成 郁建香 陈民宪 徐晓翔 高纪纲 徐惠芳 孙国瑞;怎样看待“克隆作文”?[N];解放日报;2000年
8 袁红兵;好酒也需巧广告[N];厂长经理日报;2000年
9 李虎军;媒体如何报道科学新闻[N];科学时报;2000年
10 杨庆春;“精神的归宿”岂靠“克隆”?[N];科学时报;2000年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 张焱如;马生长激素(GH)基因序列、分子进化及其多态性的研究[D];内蒙古农业大学;2005年
2 李敏;牛免疫球蛋白重链基因中JH,Eμ片段敲除的研究和JH,Cμ基因的分析[D];中国农业大学;2005年
3 邹克琴;苹果钙依赖蛋白激酶MdCPK1:分子克隆、表达、定位及被脱落酸的激活[D];中国农业大学;2005年
4 刘玲珑;稻米浸水后γ-氨基丁酸(GABA)的积累及其分子机制研究[D];南京农业大学;2005年
5 薄新文;捻转血矛线虫BZ抗性等位基因多重PCR检测及新基因Hc38的克隆、表达与特性分析[D];南京农业大学;2005年
6 赵昶灵;几个梅花品种花色的时空变化、花色苷的分子结构和F3'H克隆的研究[D];南京农业大学;2005年
7 宁铂涛;鼠抗人CD14新克隆ZCH-7-2F9单链抗体的研究[D];浙江大学;2005年
8 李丹;RANTES与SARS-CoV、HIV-1感染的初步研究[D];浙江大学;2005年
9 谭广;白细胞介素-23基因修饰树突细胞诱导的免疫应答联合β-榄香烯治疗小鼠胰腺癌的实验研究[D];大连医科大学;2005年
10 马兰青;高山红景天红景天甙生物合成相关基因的克隆及功能分析[D];吉林大学;2005年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 徐志本;鸡MHCⅡα/β链基因的克隆和原核表达及其抗体制备[D];安徽农业大学;2005年
2 张钫;中国鲎抗菌肽polyphemusinⅡ基因的改造、克隆及原核表达[D];新疆农业大学;2005年
3 张明霞;自大仓鼠分离的汉坦病毒S片段核苷酸序列特征分析[D];河北医科大学;2005年
4 杨天耀;草鱼β_2m基因的分子克隆与MHC class Ⅰ多态性分析及其重组蛋白的鉴定[D];中国农业大学;2005年
5 徐小蓉;丝瓜籽蛋白Luffin-a的基因克隆和表达[D];浙江大学;2005年
6 叶辉;粘质沙雷氏菌几丁质酶chiB基因的分离与表达分析[D];安徽农业大学;2005年
7 范文超;微生物酶法制备D-对羟基苯甘氨酸的研究[D];河南大学;2005年
8 张黎;牛链球菌L-乳酸脱氢酶基因的克隆及在大肠杆菌中的表达[D];广西大学;2005年
9 唐莉丽;高效苯酚降解细菌GXP04的苯酚羟化酶基因簇的克隆[D];广西大学;2005年
10 范卫红;西瓜花叶病宿州分离物的鉴定[D];安徽农业大学;2005年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62791813
  • 010-62985026