镉对蛋白磷酸酶2A-B55δ高表达L02细胞周期和核因子-κB活化影响

胡耀明陈慧峰罗洁李晓杰陈宇曦林丽娜麦剑荣陈雯林忠宁林育纯

【摘要】：目的探讨镉对蛋白磷酸酶2A(PP2A)的B55δ亚基高表达和不同多态性单体型调控高表达的肝细胞周期的影响及其与核因子-kappaB(NF-κB)活化的关系。方法选择永生化人正常肝L02细胞,采用B55δ编码基因PPP2R2D序列构建高表达的L02-2R2Dc细胞、与不同启动子区单体型调控高表达的L02-2R2D-PC1和L02-2R2D-PC3细胞株,以导入空载体的L02-pBabe为对照细胞。各细胞给予5～80μmol/L的氯化镉(CdCl2)处理建立细胞模型。噻唑蓝法检测各细胞生长的抑制作用;流式细胞术检测细胞周期;蛋白免疫印迹(Western blotting)检测细胞核内NF-κBp65蛋白的活化情况;荧光定量聚合酶链反应(QRT-PCR)检测环氧合酶-2(COX-2)基因mRNA水平的改变。结果与对照组比较,CdCl2组各细胞的增殖抑制率随镉水平增高呈剂量依赖性增高(Pearson’s r均P0.05);与CdCl2组比较,冈田酸+CdCl2组各细胞的增殖抑制率明显增加(P0.05);与对照组比较,CdCl2组细胞G1期比例下降、S期比例增加(P0.05);胞核p65蛋白水平增高,COX-2 mRNA水平上调;这种效应在不同细胞株之间比较,差异有统计学意义(P0.05)。结论镉可引起PP2A-B55δ高表达的人肝L02细胞增殖功能抑制并导致细胞周期S期阻滞,这种效应与NF-κB信号通路的活化有关。

【作者单位】：广东省营养膳食与健康重点实验室中山大学公共卫生学院;
【关键词】： 蛋白磷酸酶A 氯化镉 细胞周期 核因子-κB L细胞
【基金】：国家自然科学基金资助项目(81172705,81072334) 教育部博士点基金项目(20090171110052) 广东省自然科学基金重点项目(S2011020002769)
【分类号】：R363
【正文快照】：

镉及其化合物(Cd2+)是常见的职业重金属毒物,可引起包括肝脏在内的多个靶器官毒性。整体动物实验证实镉可引起大鼠肝氧化损伤[1];离体实验也证实镉可引起大鼠原代肝细胞凋亡[2]。蛋白磷酸酶2A(Protein phosphatase 2A,PP2A)是广泛表达的丝-苏氨酸蛋白磷酸酶家族成员,通过对关

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