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《中国实验血液学杂志》 2005年04期
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携带绿色荧光蛋白基因的逆转录病毒载体的构建及其介导的T细胞基因转移研究

陈香梅  徐开林  潘秀英  李振宇  鹿群先  李德鹏  
【摘要】:为了构建含绿色荧光蛋白(greenfluorescentprotein,GFP)基因的逆转录病毒载体和研究逆转录病毒对T细胞的感染能力,利用亚克隆技术将磷酸甘油酸激酶启动子(phosphoglyceratekinasepromoter,PGK)基因和GFP全长cDNA插入逆转录病毒载体pLXSN,采用磷酸钙沉淀法将重组载体转染PA317包装细胞,G418筛选出抗性克隆,收集滴度最高的病毒上清感染NIH3T3和T细胞,在倒置荧光显微镜下观察GFP表达情况。结果表明;重组逆转录病毒载体转染PA317包装细胞后,可在荧光显微镜下观察到GFP的表达。G418筛选后,含GFP的逆转录病毒可感染原代培养的T细胞。结论:逆转录病毒载体能够快速、稳定地将外源基因转移至T细胞,可作为介导T细胞基因转移的重要工具。

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【引证文献】
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3 张薇;赵志英;张坤;;慢病毒载体及应用研究进展[J];包头医学院学报;2011年05期
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4 孙丹丹;表达HIV-1外膜蛋白细胞模型的构建及鉴定[D];延边大学;2012年
【同被引文献】
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3 汪小平,赵雄飞,易绍萱,陈渝,太光平;人白介素10逆转录病毒表达载体的构建[J];重庆医学;2005年06期
4 李楠;肖桃元;粟永萍;宗兆文;徐辉;王军平;冉新泽;刘志君;;人β防御素2腺病毒表达载体的构建及其在大鼠真皮多能干细胞中的表达[J];创伤外科杂志;2006年01期
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2 骆学农;猪带绦虫六钩蚴45W-4B和TSO18重组基因工程疫苗的研究[D];中国农业科学院;2005年
3 袁改玲;猪带绦虫六钩蚴TSOL18重组基因工程疫苗的研制[D];中国农业科学院;2005年
4 徐世永;慢病毒载体法高效转基因鸡制备技术研究[D];南京农业大学;2007年
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2 陈艳艳;Id1与Id3蛋白在宫颈上皮内瘤病变及癌组织中的表达及意义[D];福建医科大学;2006年
3 洪天姿;Id1基因与乳腺癌MCF-7细胞增殖及VEGF表达关系的研究[D];福建医科大学;2007年
4 李文炼;Id-1在人结肠癌中的表达及与VEGF关系的实验研究[D];福建医科大学;2007年
【二级引证文献】
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1 张昱;王燕;杨帆;蔡亚非;王根林;;携人源TPA基因的慢病毒表达质粒的构建与鉴定[J];安徽师范大学学报(自然科学版);2010年03期
2 庞凤;;用于肿瘤基因治疗的慢病毒载体研究进展[J];青岛大学医学院学报;2009年05期
3 马贵亮;毛伟征;杨堃;安岗;岱震波;;人TNF-α重组慢病毒载体构建及其脐血间质干细胞表达[J];青岛大学医学院学报;2010年03期
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5 张薇;赵志英;张坤;;慢病毒载体及应用研究进展[J];包头医学院学报;2011年05期
6 高飞;徐开林;潘秀英;鹿群先;杜冰;;不同启动子指导的HSV1-sr39TK/GCV系统对小鼠淋巴细胞的敏感性研究[J];医学分子生物学杂志;2008年02期
7 张蕊;龚道清;;慢病毒载体的研究进展及应用[J];中国畜牧兽医;2010年06期
8 赵健灵;安铁洙;张志人;王子竹;朴善花;王春生;;绵羊Sox2基因逆转录病毒载体的构建与检测[J];中国畜牧兽医;2012年05期
9 黄立惠;张文卿;于红;张艳丽;王明翠;;诺氏梭菌作为基因载体的靶向性与安全性[J];青岛大学医学院学报;2012年04期
10 陈玲娜;蒋磊;谷杭芝;郑飞云;;PTEN基因重组慢病毒的构建[J];实用医学杂志;2010年23期
中国博士学位论文全文数据库 前9条
1 张丽;hTERT基因修饰的椎间盘髓核细胞永生化研究及干细胞样髓核细胞的分离鉴定[D];山西医科大学;2011年
2 王玉梅;人PTEN基因RNAi和RESC慢病毒载体的构建及其功能的相关性研究[D];郑州大学;2011年
3 何泓;Notch1对子宫内膜异位症内膜干细胞增殖分化的调控[D];华中科技大学;2012年
4 钱建平;携带绿色荧光蛋白基因的慢病毒载体转染几种皮肤结构重要细胞的实验研究[D];中国协和医科大学;2008年
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6 王剑锋;pEgr-1-AIF_(△1-480)基因—放射治疗乳腺癌的体外抑瘤效应研究[D];吉林大学;2010年
7 杨志广;短双歧杆菌携带Endostatin和IFNγ的特性及其抗小鼠肺癌的作用[D];吉林大学;2010年
8 魏春山;叶下珠及其复方对HBx介导肝癌VEGFR3表达的影响[D];广州中医药大学;2012年
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中国硕士学位论文全文数据库 前7条
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3 易超;人VEGF165对肝硬化大鼠半肝切除术后余肝再生能力的影响[D];新疆医科大学;2012年
4 孙丹丹;表达HIV-1外膜蛋白细胞模型的构建及鉴定[D];延边大学;2012年
5 高源;慢病毒感染mWOW法培养去透明带桑椹胚实验研究[D];辽宁医学院;2012年
6 徐明;串珠素shRNA慢病毒转染对成纤维细胞增殖能力的影响[D];青岛大学;2012年
7 李朋;PR1-HLA-A*0201单链三聚体慢病毒载体的构建及初步研究[D];扬州大学;2011年
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2 邓俊晖;余新;邵江华;;hTERT基因启动子调控表达绿色荧光蛋白基因的逆转录病毒载体的构建及在人宫颈癌Hela细胞中的表达[J];江西医学院学报;2008年06期
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6 叶元康,徐燕萍,林特夫,黄谷良;Et(AET)花结、酯酶染色双标法测定T细胞的研究(简报)[J];蚌埠医学院学报;1984年01期
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8 潘国强,谭岩,王江滨,郑永晨,王育珊;老年肿瘤病人短寿命抑制细胞功能及T细胞亚群的研究[J];中国老年学杂志;1993年03期
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10 李萍,谭继英,于红娟,孙烈;应用单克隆抗体技术检测心血管病人B细胞、T细胞及其亚群实验研究[J];兰州医学院学报;1995年03期
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2 陈香梅;徐开林;潘秀英;李振宇;鹿群先;李德鹏;;携带绿色荧光蛋白基因的逆转录病毒载体的构建及其介导的T细胞基因转移研究[A];第10届全国实验血液学会议论文摘要汇编[C];2005年
3 李俊刚;陈耀凯;王宇明;;可回复性永生化逆转录病毒载体phTERTGPlox的构建与表达[A];中华医学会第十二次全国病毒性肝炎及肝病学术会议论文汇编[C];2005年
4 靳丽妍;朱光发;;靶向小鼠核因子κB P65逆转录病毒的构建与鉴定[A];中华医学会第七届全国哮喘学术会议暨中国哮喘联盟第三次大会论文汇编[C];2010年
5 徐开林;陈香梅;潘秀英;李振宇;鹿群先;李德鹏;;携带HSV-TK基因的逆转录病毒载体的构建及其对T细胞的杀伤作用[A];第10届全国实验血液学会议论文摘要汇编[C];2005年
6 朱峰;杜冰;徐开林;潘秀英;;PGK驱动逆转录病毒载体介导HSV-TK/GCV防治GVHD的研究[A];第12届全国实验血液学会议论文摘要[C];2009年
7 靳丽妍;朱光发;吴春婷;闫树凤;;靶向小鼠核因子κ B P65的小干扰RNA逆转录病毒载体的构建与鉴定[A];中华医学会呼吸病学年会——2011(第十二次全国呼吸病学学术会议)论文汇编[C];2011年
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10 张青云;王利民;王雅明;徐建军;;多聚腺苷酸信号缺陷逆转录病毒致癌机制的研究[A];2000全国肿瘤学术大会论文集[C];2000年
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5 彭萍;抗癌“隐士”——T细胞[N];大众卫生报;2004年
6 麦迪信;“武装”T细胞杀死黑色素瘤[N];医药经济报;2002年
7 香港麦迪信医学出版有限公司提供;围捕免疫系统“叛徒”[N];医药经济报;2002年
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9 刘永铭;T淋巴细胞加重动脉粥样硬化[N];中国中医药报;2003年
10 本报记者 章涵;不能滥用胸腺肽[N];保健时报;2003年
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2 刘建玲;猪瘟病毒E2基因在PK-15细胞中的表达及本体动物的免疫研究[D];西北农林科技大学;2006年
3 钱东华;自杀基因、血卟啉联合治疗肺癌的实验研究[D];吉林大学;2007年
4 史巧娟;绿色荧光蛋白基因gfp在华癸中生根瘤菌与紫云英共生固氮体系研究中的应用[D];华中农业大学;2000年
5 祁赞梅;系统性红斑狼疮模型中T细胞数量异常的易感基因定位[D];中国医科大学;2004年
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7 彭双发;人CD4~+CD25~+ T细胞与CD4~+ CD25~+ T细胞差异蛋白质组学研究[D];第三军医大学;2003年
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1 邓俊晖;人端粒酶逆转录酶基因启动子调控绿色荧光蛋白基因的逆转录病毒载体的构建[D];江西医学院;2005年
2 赵青赞;前脑啡肽原基因在NIH3T3细胞的表达[D];郑州大学;2005年
3 林有志;关节腔内注射逆转录病毒载体介导的重组人IL-1Ra和TGF-β1基因治疗兔膝骨关节炎的实验研究[D];山西医科大学;2010年
4 牟艳芳;逆转录病毒载体pLXPXSN-TCRα12-2-IRES-Vβ7.1的构建及其杀伤肝癌细胞作用的研究[D];广东药学院;2009年
5 吴艳;PIG11基因逆转录病毒载体的构建及其高表达对HepG2细胞凋亡的影响[D];南华大学;2007年
6 刘君;逆转录病毒载体介导的IL-1Ra和TGF-β1联合体外转染兔软骨细胞表达的研究[D];山西医科大学;2008年
7 王娜;凋亡素基因导入与表达对人类结肠癌细胞影响的实验研究[D];暨南大学;2005年
8 刘进;人红细胞血型糖蛋白A单克隆抗体的制备[D];扬州大学;2006年
9 张明刚;肿瘤组织来源的exosomes体内外抑制T细胞免疫反应的研究[D];浙江大学;2004年
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