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《畜牧兽医学报》 2015年08期
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鸡朊样蛋白Doppel基因的克隆及其与PrP~C相互关系分析

张天亮  吴润  杨润霞  魏姣  万学瑞  刘霞  刘磊  张小丽  
【摘要】:克隆鸡Doppel蛋白(ChDpl)基因(PRND)并初步分析其与正常细胞型朊蛋白(PrPC)的相互关系,为禽源Dpl结构与功能、Dpl与PrPC互作关系机制的研究提供理论依据与分子基础;以多物种Dpl氨基酸序列为基础,通过比对找到Dpl氨基酸序列保守区,设计简并引物并依据鸡的密码子偏好性对引物进行优化,以逐步降低其简并性。用此特异性引物以聚合酶链式反应(PCR)扩增鸡PRND基因,并将其克隆到pMD-18-T载体,鉴定后将序列上传GenBank数据库。结合Dpl与PrPC相关研究初步分析两者的相互关系;多物种Dpl氨基酸序列比对发现,第11—150位(139个氨基酸残基)为Dpl氨基酸序列保守区,以此区域设计引物并进行PCR扩增,得到约417bp的目的条带,GenBank登录号为KP140962。综合分析PrPC与Dpl相关研究发现,尽管Dpl与PrPC具有相似的翻译后修饰和空间结构,但两者多表现为拮抗作用,即PrPC能够拮抗Dpl的神经毒作用,尤其是其N-端包含八肽重复区的第23—88位残基对于保护Purkinje细胞免受Dpl诱导的神经退化作用至关重要。禽源Dpl的成功克隆不仅填补了目前研究的空白,更在分子水平为后续研究Dpl结构与功能及其与PrPC的拮抗机制奠定了基础。

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【共引文献】
中国博士学位论文全文数据库 前4条
1 周荣艳;中国地方山羊PRNP、SPRN和37/67-kDa LRP/LR基因研究[D];河北农业大学;2012年
2 吴润;偶蹄动物朊蛋白基因结构特征及其重组蛋白抗原性的研究[D];甘肃农业大学;2004年
3 庞晓静;BRET方法研究BST-2和HIV-1 Vpu相互作用及小分子化合物抑制剂的筛选[D];北京协和医学院;2013年
4 章志宏;重组朊病毒的体外制备及动物模型研究[D];华东师范大学;2012年
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