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《心肺血管病杂志》 2010年01期
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体外诱导人骨髓间充质干细胞转化为心肌样细胞的基因表达

姜辉  王辉山  汪曾炜  朱洪玉  宋恒昌  张南滨  
【摘要】:目的:观察5-氮胞苷(5-aza)在体外诱导人骨髓间充质干细胞转化为心肌样细胞的心钠素(ANP)、脑钠素(BNP)、α-骨骼肌动蛋白(α-skeletal actin)、肌球蛋白轻链-2v(MLC-2v)、锌指结构转录因子(GATA-4)和心脏特异同源转录因子(Nkx2.5)基因表达。方法:取非血液疾病的5例胸科手术患者术中已切除掉的肋骨,抽取骨髓。利用淋巴细胞分离液行密度梯度离心法和差异贴壁法进行分离、提纯骨髓间充质干细胞,并进行培养扩增。用流式细胞仪对第2代的骨髓间充质干细胞细胞表面抗原进行测定。应用10μmol/L5-aza对第2代的骨髓间充质干细胞诱导24h,于诱导后1,2,3及4周,用反转录-聚合酶链反应检测ANP、BNP、α-skeletal actin、MLC-2v、GATA-4和Nkx2.5基因表达。结果:3份第2代骨髓间充质干细胞样本重复测定,表达CD29,CD44,不表达CD34,CD45。以5-aza诱导培养24 h后,骨髓间充质干细胞形态和排列方式发生明显变化,诱导1周后,细胞体积增大,多呈长梭行,平行排列;诱导2周后,细胞变为短柱状,突起位于2端,相邻细胞的突起紧密接触;诱导3周后,短柱状细胞的突起相互连接,部分细胞可见类肌管样结构;诱导4周后,细胞体积变小,可见由几个细胞连接形成的多核肌管样结构。诱导组细胞ANP、BNP、α-skeletal actin、MLC-2v、GATA-4和Nkx2.5的聚合酶链反应产物凝胶电泳呈阳性,对照组为阴性,诱导组基因表达量均随着时间延长逐渐增加。结论:5-aza可诱导骨髓间充质干细胞向心肌样细胞转化,其处于祖心肌细胞和分化的心肌细胞之间,并可能具有心肌细胞的功能。

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【引证文献】
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【共引文献】
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【同被引文献】
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6 华进联,马勇江,杨玉艾,杨学义,窦忠英;干细胞与心肌细胞替代治疗[J];生命科学;2004年04期
7 陈家欢;魏育蕾;彭莎;王华岩;;猪羊水干细胞特异向跳动心肌细胞诱导分化[J];生物工程学报;2011年08期
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10 黄益民;张颖;辛毅;胡著涛;罗毅;;小鼠活体内hMSCs干细胞生物发光示踪监测[J];心肺血管病杂志;2010年04期
【二级引证文献】
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1 陈家欢;猪羊水干细胞特异向心肌细胞分化及其中Wnt通路相关因子的表达变化[D];西北农林科技大学;2011年
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9 郭玲玲;李明;邢爽;罗庆良;;间充质干细胞治疗重症急性放射病研究的新进展[J];中国实验血液学杂志;2011年03期
10 禹亚彬;储建;章世海;卞建民;;间充质干细胞体外分化为胰岛β细胞的影响因素的研究进展[J];医学综述;2011年17期
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7 杨少光;池颖;戎丽娟;邢文;卢士红;赵钦军;马凤霞;韩忠朝;;不同来源间充质干细胞诱导分化成血管内皮细胞的比较[A];第13届全国实验血液学会议论文摘要[C];2011年
8 李杰平;孔佩艳;李佳丽;朱丽丹;孔祥敬;曾东风;刘红;王庆余;彭贤贵;陈幸华;张曦;;纯化的自体CD34+细胞联合间充质干细胞治疗难治性克隆恩病一例并文献复习[A];第13届全国实验血液学会议论文摘要[C];2011年
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