应用抑制消减杂交技术筛选大肠癌新相关基因

叶方鹏李荣洲肖冰张万岱

【摘要】：目的利用抑制消减杂交技术(SuppressionSubtractiveHybridization,SSH)构建人大肠癌差异表达cDNA文库,分离并克隆出大肠癌发病的相关新基因。方法运用抑制消减杂交技术分离大肠癌组织及癌旁正常黏膜差异表达基因的cDNA片断,将其与T载体连接构建文库,从库中随机挑取200个白色菌落,使用PCR方法鉴定阳性克隆并对其中50个克隆进行测序,将测序结果登录GenBank进行同源性对比分析,并对部分有意义的差异表达片断进行VirtualNorthernBlot分析。结果成功构建人源性大肠癌消减cDNA文库,通过筛选获得20个差异表达的基因,其中有2个片断未检测到同源性序列,根据杂交结果考虑可能是在大肠肿瘤中差异表达的新基因。结论运用SSH技术成功构建了人大肠癌的差异表达的cDNA消减杂交文库,并筛选出2个在大肠肿瘤中差异表达的新基因。

【作者单位】：
【关键词】： 大肠癌 抑制消减杂交 cDNA文库
【基金】：广东省科技发展攻关项目(2002C31202)
【分类号】：R735.34
【正文快照】：

大肠癌是我国常见的消化道恶性肿瘤,其死亡率也呈增长趋势。研究显示,大肠癌的发生是一个多步骤、多因素、涉及到多种基因及产物的相互作用的过程。但至今尚未发现与大肠癌发生发展有关的特异性基因。本课题利用抑制消减杂交(suppressionsubtractive hybridization)构建大肠

下载全文更多同类文献

PDF全文下载

CAJ全文下载

(如何获取全文？欢迎：购买知网充值卡、在线充值、在线咨询)

CAJViewer阅读器支持CAJ、PDF文件格式，AdobeReader仅支持PDF格式

	【引证文献】
	【引证文献】

中国期刊全文数据库

前1条

1	刘世呈;李靖;黄小兵;杨彤翰;梁平;郑璐;赵弘智;;BC047440-siRNA对肝癌HepG2细胞增殖抑制及其分子机制的初步探讨[J];第三军医大学学报;2007年23期

	【参考文献】
	【参考文献】

中国期刊全文数据库

前1条

1	郑树,蔡善荣;中国大肠癌的病因学及人群防治研究[J];中华肿瘤杂志;2004年01期

	【共引文献】
	【共引文献】

中国期刊全文数据库

前10条

1	马恒太,余佩武,葛海燕,刘宝华,刘晋祎,刘胜学,周艳虹,黄萍,Toshiro Takezaki,Kazuo Tajima,曹佳;体力活动对结直肠癌发病影响的重庆地区大样本病例-对照研究[J];第三军医大学学报;2005年22期
2	杨菁;王东;;恶性肿瘤相关物质群在大肠癌辅助诊断中的临床价值[J];南方医科大学学报;2007年10期
3	彭莉;朱传金;刘玉红;李春岚;;血清CEA、CA199、CA242联检在大肠癌诊断及随访中的临床应用[J];放射免疫学杂志;2006年03期
4	林淑端;家族性大肠癌的健康教育[J];国际医药卫生导报;2005年11期
5	付肖岩;林平;黄恒青;柯晓;胡光宏;王文荣;高由亮;;大肠癌高危人群的中西医结合临床研究[J];福建中医药;2011年05期
6	宋永攀;田小林;朱小宝;;结直肠癌与JC病毒的相关研究展望[J];结直肠肛门外科;2012年02期
7	毕超;肖创情;黄修海;张一帆;刘祥;;血清CEA、CA199、CA724联合黏膜端粒酶检测对大肠癌诊断及预后评价的价值[J];医学临床研究;2008年08期
8	于秀芝;;直肠癌早期误诊原因的探讨[J];医药论坛杂志;2007年09期
9	赵军;陈倩;赵杰;王君丽;;大肠癌并发贫血的相关因素探讨[J];中外医疗;2011年01期
10	熊首先;朱尤庆;何军;;MDM2和p53在大肠癌组织中的表达及其意义[J];长江大学学报(自科版)医学卷;2007年01期

中国重要会议论文全文数据库

前4条

1	张定东;王燕;罗俊峰;贾超;白云飞;葛芹玉;陆祖宏;;结直肠癌免疫组化表达与临床病理的关系[A];中国生物医学工程进展——2007中国生物医学工程联合学术年会论文集（下册）[C];2007年
2	刘静;朱琦;;健脾中药联合化疗治疗改善大肠癌病人免疫功能的系统评价[A];首届国际中西医肿瘤研究论坛论文专辑（2008）[C];2008年
3	周雍明;侯炜;任锡祥;;103例结直肠癌患者临床特点及预后相关因素分析[A];第三届国际中医、中西医结合肿瘤学术交流大会暨第十二届全国中西医结合肿瘤学术大会论文汇编[C];2010年
4	刘静;;中医药治疗大肠癌近11年国内医学期刊文献源分析[A];中华中医药学会中医药传承创新与发展研讨会专辑[C];2007年

中国博士学位论文全文数据库

前10条

1	董庆华;大肠癌相关基因ST13功能研究[D];浙江大学;2004年
2	殷平;iNOS在结肠癌的表达及其与侵袭转移因素的关系[D];吉林大学;2004年
3	周紫垣;环境—膳食因素和遗传易感性与结直肠癌发病的研究[D];第三军医大学;2005年
4	杨继要;肺腺癌肿瘤相关抗原的筛选鉴定及克隆表达[D];郑州大学;2006年
5	许岸高;广东省大肠癌流行病学研究[D];第一军医大学;2006年
6	徐文鸿;蛋白质指纹图谱和生物信息学在大肠癌中的临床应用研究[D];浙江大学;2007年
7	段琼红;武汉市大肠癌流行病学研究[D];华中科技大学;2005年
8	严茂军;结直肠癌中黑色素瘤抗原基因表达及启动子去甲基化状态的研究[D];广西医科大学;2008年
9	李美宁;大肠癌中15-羟基前列腺素脱氢酶表达失活及其在增殖侵袭中的作用研究[D];山西医科大学;2008年
10	盛新华;结直肠癌复发转移临床特征及血清蛋白质指纹谱在原发瘤围术期的应用[D];第二军医大学;2009年

中国硕士学位论文全文数据库

前10条

1	初光邸;GH，IGF-Ⅰ；CEA，CA19-9在结直肠癌发生及预后的研究[D];华中科技大学;2009年
2	郝俊梅;胶东地区三十年恶性肿瘤病理统计分析[D];青岛大学;2005年
3	王娜;凋亡素基因导入与表达对人类结肠癌细胞影响的实验研究[D];暨南大学;2005年
4	付涛;腹腔温热灌注化疗的安全性实验研究[D];第三军医大学;2004年
5	叶方鹏;应用抑制消减杂交技术筛选大肠癌相关基因[D];第一军医大学;2005年
6	陈伟平;结直肠癌组织中Smad4蛋白和TGF-β及其Ⅱ型受体表达的临床意义[D];浙江大学;2006年
7	刘恋;双氢青蒿素抑制结直肠癌细胞生长的临床前期实验[D];广州中医药大学;2008年
8	赵俊仕;结肠癌危险因素的病例对照研究[D];中南大学;2008年
9	李赵江波;Kail和p53在大肠癌组织中的表达及其相关性研究[D];南昌大学;2008年
10	徐艺可;中国人群胆囊疾患和结直肠癌关系的Meta分析[D];新疆医科大学;2009年

	【同被引文献】
	【同被引文献】

中国期刊全文数据库

前4条

1	严明;陈万涛;;NF-κB信号转导通路和肿瘤发生、转移关系的研究进展[J];北京口腔医学;2007年01期
2	周建波,李靖,赵弘智,郑璐,梁平,杨彤翰,黄小兵;肝癌相关新基因BC047440反义真核表达载体构建及鉴定[J];第三军医大学学报;2005年15期
3	何天霖;吴志勇;罗蒙;邱江锋;;应用抑制消减杂交和cDNA表达谱芯片筛选肝星形细胞持续活化的相关基因[J];外科理论与实践;2006年03期
4	郑璐;李靖;杨彤翰;赵弘智;梁平;黄小兵;;BC047440基因在肝细胞癌中的表达及其意义[J];中国普通外科杂志;2006年08期

	【二级引证文献】
	【二级引证文献】

中国期刊全文数据库

前8条

1	黄小兵;梁平;李靖;郑璐;刘世呈;韩克强;赵弘智;;BC047440基因通过NF-κB调节HepG2细胞增殖的初步研究[J];第三军医大学学报;2008年22期
2	钟扬;李靖;黄小兵;郑璐;杨彤翰;赵弘智;梁平;;慢病毒载体介导的人肝癌HepG2细胞BC047440基因沉默[J];第三军医大学学报;2010年08期
3	郑璐;梁平;李靖;黄小兵;杨彤翰;左国华;王梁;;重组BC047440蛋白的表达及其对人肝癌细胞系HepG2增殖的影响[J];第三军医大学学报;2010年19期
4	;Expression of BC047440 protein in hepatocellular carcinoma and its relationship to prognosis[J];癌症;2010年11期
5	王峥;郑璐;黄小兵;杨彤翰;李靖;梁平;;慢病毒介导BC047440基因沉默逆转HepG2/ADM细胞化疗耐药性机制的探讨[J];第三军医大学学报;2012年08期
6	胡蓉;康丽;陈自然;;siRNA抗肝癌国内研究进展[J];内江师范学院学报;2010年02期
7	黄小兵;李靖;梁平;郑璐;韩克强;刘世呈;赵弘智;;沉默BC047440基因对HepG2细胞侵袭能力的影响[J];中国普通外科杂志;2009年01期
8	周明利;张树友;;survivin基因在肿瘤中的作用研究进展[J];中国普外基础与临床杂志;2011年07期

中国硕士学位论文全文数据库

前1条

1	钟扬;慢病毒载体介导人肝癌HepG2细胞BC047440基因沉默的研究[D];第三军医大学;2010年

	【二级参考文献】
	【二级参考文献】

中国期刊全文数据库

前2条

1	蔡善荣;我国大肠癌高危因素的研究[J];实用肿瘤杂志;2003年01期
2	李连弟,鲁凤珠,张思维,牧人,孙秀娣,皇甫小梅,孙杰,周有尚,欧阳宁慧,饶克勤,陈育德,孙爱明,薛志福,夏毅;中国恶性肿瘤死亡率20年变化趋势和近期预测分析[J];中华肿瘤杂志;1997年01期

	【相似文献】
	【相似文献】

中国期刊全文数据库

前10条

1	刘艳群;杜先智;;应用抑制消减杂交技术构建结核分枝杆菌差异表达基因消减cDNA文库[J];中国免疫学杂志;2010年01期
2	谭诗云，于皆平，沈志祥，罗和生;大肠癌组织LPM观察和癌周及区域淋巴结免疫反应与预后的关系[J];中国肿瘤临床;1995年02期
3	刘君;大肠癌组织中67KD_aLNR表达增强的意义[J];中国肿瘤临床;1997年12期
4	高建军;王为忠;龚晃;王东霞;张玮玮;;增殖细胞核抗原在大肠癌中的表达及临床意义[J];沈阳部队医药;2001年04期
5	刘光军,张丹,张力,王继红,姜彦多,高红,刘丹,金成兰;CDC25B在大肠肿瘤中的表达及意义[J];世界华人消化杂志;2004年05期
6	南清振,张振书,杨希山,肖冰,高蕾,叶方鹏,武金保;应用基因芯片技术筛查大肠癌相关基因[J];世界华人消化杂志;2004年11期
7	刘剑仑,葛莲英,黎丹戎,张贵年;端粒、端粒酶及端粒酶催化亚基在大肠癌中的作用[J];中国癌症杂志;2005年04期
8	唐卫中,高枫,李卫,唐宗江;中国人散发性大肠癌APC基因突变的研究[J];中华实验外科杂志;2005年11期
9	于兰;张建兵;;C-erbB-2蛋白,P53蛋白在大肠癌中的表达及意义[J];南通大学学报(医学版);2005年06期
10	谢裕安;葛莲英;刘剑仑;匡志鹏;李艳;罗小玲;;端粒酶在大肠癌组织中表达的临床意义[J];现代肿瘤医学;2006年02期

中国重要会议论文全文数据库

前10条

1	肖冰;王媛媛;张亚历;;大肠癌干细胞作用相关基因及信号通路的筛选鉴定[A];第二十三届全国中西医结合消化系统疾病学术会议暨消化疾病诊治进展学习班论文汇编[C];2011年
2	尤琦;王锡山;;大肠癌组织中生长抑制因子4(ING4)蛋白的表达及意义[A];第九届全国肿瘤转移学术大会暨2011年黑龙江省医学会肿瘤学年会摘要集[C];2011年
3	袁航;屠世良;;大肠癌原代细胞培养方法的探索[A];中国肛肠病研究心得集[C];2011年
4	袁航;屠世良;;大肠癌原代细胞培养方法的探索[A];中国肛肠病研究心得集[C];2011年
5	王贵玉;王锡山;;S100A11蛋白与大肠癌发生发展的关系[A];第九届全国肿瘤转移学术大会暨2011年黑龙江省医学会肿瘤学年会摘要集[C];2011年
6	钱伟峰;;大肠癌组织中STAT3的表达及其对肿瘤血管生成的影响[A];苏州市自然科学优秀学术论文汇编(2008-2009)[C];2010年
7	赵逵;刘艳芳;王琰;;CD133、Lgr5在大肠癌中的表达及意义[A];贵州省中西医结合学会2011年消化系病学术交流会暨消化系病新进展学习班资料汇编[C];2011年
8	薛迪新;任约翰;陈积贤;吴伟力;张仁虎;林道浙;余铭;林肖;梁美珍;徐平;;PDCD4mRNA和miR-21在大肠癌中的表达及其临床意义[A];2011年浙江省肛肠外科学术大会暨结直肠肛门疾病诊治新进展学习班论文汇编[C];2011年
9	申兴斌;金小平;王瑞婷;李瑞香;于再东;;VEGF及其受体Flk-1在大肠癌中表达的意义[A];中国(第七届)肿瘤微创治疗学术大会暨世界影像导引下肿瘤微创治疗学会成立筹备大会论文汇编[C];2011年
10	宋于刚;杨慧;赵彤;;RNA干扰靶向抑制PI3K p85α表达对5-FU诱导大肠癌细胞凋亡的影响[A];第二十二届全国中西医结合消化系统疾病学术会议暨消化疾病诊治进展学习班论文汇编[C];2010年

中国重要报纸全文数据库

前10条

1	李新民;nm23－H1基因表达与大肠癌侵袭转移相关[N];中国医药报;2002年
2	记者衣晓峰靳万庆通讯员李晓丽;大肠癌多药耐药判断标准有新“尺度”[N];中国中医药报;2003年
3	;让鹿宝造福人类[N];经济消息报;2000年
4	;我国基因组研究向“海洋”延伸[N];中国海洋报;2000年
5	曹文英刘观浦;山农大选育出三个糯性小麦新品系[N];山东科技报;2005年
6	衣晓峰;如何判断大肠癌化疗疗效[N];中国医药报;2003年
7	;阿司匹林新用途[N];中国高新技术产业导报;2002年
8	记者薛冬通讯员张猛、何春权;我科学家将开发海洋生物基因资源[N];光明日报;2000年
9	衣晓峰李晓丽;肠癌多药耐药判断有新说[N];健康报;2003年
10	王雪飞;树突状细胞“面目”更清晰[N];健康报;2004年

中国博士学位论文全文数据库

前10条

1	唐勇;猪伪狂犬病鉴别诊断研究与猪繁殖与呼吸综合征病毒基因组序列的测定[D];华中农业大学;2004年
2	王颖;人参叶和根cDNA文库构建及表达序列标签分析[D];东北师范大学;2007年
3	柳淑芳;小尾寒羊多胎性状相关基因的鉴定和遗传研究[D];山东农业大学;2004年
4	陈晓红;慢性肝病患者组织cDNA文库的构建及用SEREX方法筛选HCC抗原[D];浙江大学;2005年
5	王海鸿;B型烟粉虱热休克蛋白基因的克隆和表达及其与胁迫耐受性关系的研究[D];中国农业科学院;2005年
6	白文涛;汉坦病毒受体的筛选及鉴定[D];第四军医大学;2005年
7	陈娟;可卡因安非他明调节转录肽相互作用蛋白的筛选[D];第二军医大学;2005年
8	余建秋;大熊猫基因资源库构建及粪便高质量DNA提取方法的建立[D];浙江大学;2006年
9	于丽;金黄地鼠神经管cDNA文库的构建及高温致畸相关基因的筛选[D];山东大学;2005年
10	曾智勇;猪呼肠孤病毒SC-A株的分离鉴定及全基因组cDNA文库的构建和分子遗传特征分析[D];四川农业大学;2006年

中国硕士学位论文全文数据库

前10条

1	尹福忠;脂联素在大肠癌中的表达及意义[D];山西医科大学;2007年
2	刘丹;Survivin和bcl-2在大肠癌中的表达及意义[D];吉林大学;2011年
3	刘艳萍;PDCD5基因在大肠癌中的表达及其对药敏的影响[D];中国医科大学;2010年
4	孙国兴;COX-2和APC在大肠癌中的表达及临床意义[D];河北医科大学;2010年
5	菅金波;hTERT、Livin蛋白在人大肠癌组织中的表达及临床意义[D];广西医科大学;2011年
6	姜晗;P16、CyclinD1和CDK4在大肠癌组织中表达及意义[D];吉林大学;2011年
7	申龙树;大肠癌组织HLA及相关分子的异常表达及其意义[D];东南大学;2004年
8	卓文莹;大肠癌组织中酷氨酸激酶受体RON的表达及意义[D];浙江大学;2006年
9	熊超亮;p14ARF基因甲基化与p53、mdm2基因异常表达在大肠癌中的作用及相关性分析[D];南昌大学;2010年
10	郑林辉;大肠癌中微淋巴管的定量分析[D];江西医学院;2005年

	快捷付款方式		订购知网充值卡	订购热线	帮助中心
	银行卡支付宝神州行	知网卡手机短信更多>>	免费送卡上门银行汇款购卡邮局汇款购卡	400-819-9993 010-62791813 010-62985026	常见问题在线咨询阅读器下载	广告服务知网卡新手指南