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《中国组织工程研究与临床康复》 2011年20期
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改良分步消化法培养原代软骨细胞

田峰  崔学生  张帅  石玉泽  金群华  
【摘要】:背景:胰蛋白酶和细菌胶原酶结合使用消化关节软骨基质获得大量纯度高的软骨细胞的方法步骤繁琐、过程复杂,容易污染,但更好的简单易行、安全可靠的方法至今少有报道。目的:采用改良分步消化法进行软骨细胞培养,以获取大量纯净的软骨细胞。方法:将新西兰白兔6只随机分2组,酶消化法组运用酶消化法分两步获取原代软骨细胞,对照组用传统法进行原代软骨细胞培养。培养1周后观察两组培养的软骨细胞的生长状态,并进行细胞鉴定、计数,评估改良后的方法对细胞的影响。结果与结论:酶消化法组采用0.2%Ⅱ型胶原酶消化软骨细胞,与对照组相比,可将6h以上的消化时间缩短至3h。两组原代软骨细胞培养24h均多呈圆形,悬浮状态,48h后贴壁,培养1周后,两组软骨细胞可铺满培养瓶底。结果证实,采用改良分步消化法进行软骨细胞培养,在缩短了消化时间的同时其细胞生长及形态变化均无改变,可以顺利获取大量纯净的软骨细胞。

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【参考文献】
中国期刊全文数据库 前3条
1 魏西秦,曹峻岭,熊咏民;兔软骨细胞培养方法研究[J];中国地方病学杂志;1987年02期
2 周强,李起鸿,戴刚,杨柳;原代骺板软骨细胞的高效分离和体外培养观察[J];中华创伤杂志;2003年05期
3 周强,李起鸿,戴刚,石国华;三步酶消化法高效分离兔原代关节软骨细胞及体外培养观察[J];中华外科杂志;2005年08期
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 马明福,李练兵,厉广坤,蔡敏,鄢采芹,王定国;胎儿关节和兔关节软骨细胞的体外培养[J];北京生物医学工程;1999年03期
2 王杰松,张俊平,张珉,钱定华;杀莠素A对兔软骨细胞增殖和产生NO的影响[J];第二军医大学学报;2000年06期
3 曹峻岭,郑滨,张矢远,莫东旭;串珠镰刀菌素对软骨细胞作用的实验研究[J];地方病通报;1995年04期
4 解志杰,许建中;IGF-I和TGFβ_1对幼年及成年兔关节软骨细胞增殖和代谢的作用[J];第三军医大学学报;2001年06期
5 戴刚,李起鸿,周强,杨柳,唐康来;关节软骨组织工程种子细胞的优化获取[J];第三军医大学学报;2002年02期
6 许建中,解志杰,杨物鹏,兰旭;生长因子(IGF-I、TGF-β_1和BMP-2)对兔关节软骨细胞体外增殖的作用[J];第三军医大学学报;2002年05期
7 周强,李起鸿,许建中,石国华;兔原代肋软骨细胞的三步酶消化法高效分离及体外培养观察[J];第三军医大学学报;2005年16期
8 曹峻岭,郭传友,李斯纯,王长英;硒锌对培养软骨细胞生长代谢的影响[J];中国地方病防治杂志;1992年05期
9 曹峻岭,熊咏民,张矢远,莫东旭;真菌毒素DON、T—2和NIV对培养软骨细胞作用的实验研究[J];中国地方病防治杂志;1995年02期
10 熊咏民,曹峻岭,张矢远;交链孢霉甲基醚(AME)对软骨细胞代谢的影响[J];中国地方病防治杂志;1995年04期
中国重要会议论文全文数据库 前4条
1 李练兵;马明福;厉广坤;蔡敏;鄢采芹;王定国;;生物工程技术制备人工软骨的基础研究——兔关节软骨细胞培养研究[A];重庆市遗传学会第一届学术年会暨纪念孟德尔规律再发现100周年学术讨论会论文集[C];2000年
2 王志钢;马信龙;;失应力条件后恢复应力作用下关节软骨的变化特点[A];第十三届全国中西医结合骨伤科学术研讨会论文集[C];2005年
3 许可;马信龙;;失应力条件下关节软骨的变化特点[A];第十三届全国中西医结合骨伤科学术研讨会论文集[C];2005年
4 石印玉;曹月龙;冯伟;郑昱新;石瑛;王翔;;补肾、柔肝中药对软骨细胞生物功能的影响[A];2004'中华中医药科技成果专辑[C];2004年
中国博士学位论文全文数据库 前7条
1 杨运东;骨炎定对体外培养软骨细胞的影响[D];广州中医药大学;2001年
2 刘松波;藻酸钙载体制备及复合软骨细胞修复关节软骨缺损的研究[D];第四军医大学;2001年
3 张梅;马钱子对骨关节炎中软骨细胞凋亡与增殖的影响[D];北京中医药大学;2003年
4 郝鹏;大黄酸及其衍生物二乙酰大黄酸对关节软骨损伤保护作用的实验研究[D];四川大学;2007年
5 陈润良;大鼠骨髓间充质干细胞的组织工程学研究[D];四川大学;2004年
6 王洪林;脂质体介导TGF-β1基因转染脂肪干细胞分化为软骨细胞构建组织工程软骨的实验研究[D];中国医科大学;2007年
7 李念虎;补肾活血方对早中期膝骨关节炎的临床疗效观察及治疗机理研究[D];广州中医药大学;2005年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 缪志和;聚乳酸构建组织工程化软骨的实验研究[D];第二军医大学;2000年
2 陈增刚;人类整体椎间盘在藻酸盐凝胶中的培养[D];青岛大学;2001年
3 马进峰;软骨生长因子(CDGF)对培养兔软骨细胞的作用及其与IGF-I的协同效果[D];青岛大学;2001年
4 刘毅;膝关节骨性关节炎的治疗及研究进展[D];成都中医药大学;2002年
5 张力;改良纤维蛋白胶软骨细胞复合物修复关节软骨缺损的实验研究[D];中国人民解放军第一军医大学;2003年
6 李景红;同种异体软骨细胞/聚乳酸复合物即时修复软骨缺损的实验研究[D];第一军医大学;2004年
7 李忠;组织工程软骨异体移植修复兔关节软骨缺损的初步实验研究[D];第三军医大学;2004年
8 林炎水;组织工程技术制备人膝半月板组织的初步研究[D];第三军医大学;2004年
9 张敏;膝关节软骨损伤的MR诊断及其实验研究[D];河北医科大学;2004年
10 黄松;自体软骨细胞复合自体骨基质明胶修复关节软骨缺损的实验研究[D];昆明医学院;2007年
【同被引文献】
中国期刊全文数据库 前1条
1 吴炜;毛天球;封兴华;陈富林;岳进;;胶原-透明质酸支架的制备及其与软骨细胞复合培养的实验研究[J];中国修复重建外科杂志;2007年04期
【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前5条
1 孙鹏,王拥军,施杞;椎间盘软骨终板细胞的形态及表型特征研究[J];脊柱外科杂志;2003年06期
2 魏西秦,曹峻岭,熊咏民;兔软骨细胞培养方法研究[J];中国地方病学杂志;1987年02期
3 戴刚,李起鸿,周强;相关生物因子对体外培养关节软骨细胞促增殖作用的比较研究[J];中华创伤杂志;2002年04期
4 何清义,李起鸿,许建中,杨柳;人关节软骨细胞的永生化及其表型的诱导[J];中华创伤杂志;2002年12期
5 刘勇,胡有谷,吕振华;腰椎间盘细胞的培养及形态学观察[J];中华医学杂志;1999年02期
【相似文献】
中国博士学位论文全文数据库 前7条
1 肖长虹;免疫缺陷鼠—人RA移植物嵌合体模型的研制及应用[D];第一军医大学;2007年
2 闫新峰;聚蛋白多糖酶和MMP在OA和RA关节中的表达及其意义[D];山东大学;2008年
3 李鉴轶;人体膝关节相关数字解剖学研究及在体稳定性测试系统的建立[D];第一军医大学;2007年
4 王华;剪切力对体外培养人软骨细胞代谢的影响[D];武汉大学;2011年
5 杨礼庆;胰岛素样生长因子-1基因转染对兔骨髓间充质干细胞向软骨细胞分化的影响[D];中国医科大学;2006年
6 宋新强;含编码鸡Ⅱ型胶原基因的新型DNA Tolerizing疫苗的研制及其在治疗大鼠类风湿关节炎中的疗效观察[D];中国人民解放军军事医学科学院;2007年
7 李真;构建组织工程软骨中机械刺激的作用研究[D];浙江大学;2010年
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