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《细胞与分子免疫学杂志》 1992年04期
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PCR技术在单克隆抗体cDNA的筛选及标记同位素探针上的应用

黄震宇  朱伟民  洪锦心  
【摘要】:以往对cDNA克隆鉴定过程中,经斑点杂交筛选出的克隆数较多,在进一步的鉴定中不可避免地要进行质粒扩增、抽提、纯化酶解、片段分离等许多步骤。本文对这一步的鉴定采用了PCR技术,这样便可省去酶解及片段分离等繁琐步骤。且由于扩增片段纯净,故可直接用于Southern blot鉴定及DNA序列分析。 本文另一新的探索是利用PCR法标记探针,尤其是小片段DNA探针,其不同于常用的缺口平移和随机引物延伸标记。由于它在扩增过程中只有位于两个引物间的片段才能标上同位素,所以标记后的探针量大、比放射性强,加之PCR合成仪的出现,使此法更加高效、简便安全。

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【引证文献】
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1 郭虹汾,刘健,潘志美,王斌,田培坤,李斯德;人─鼠抗人小细胞肺癌嵌合重链基因在小鼠骨髓瘤细胞中的表达[J];中国免疫学杂志;1994年03期
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1 程卫青;大鼠抗汉滩病毒单抗可变区基因的克隆、测序和人—大鼠嵌合抗体的表达及ScFv基因构建的研究[D];第四军医大学;1994年
【共引文献】
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1 李斯德,洪锦心,张毅,王平,谈立松,蒋茂松,莫忠根,姚明;抗人小细胞肺癌单克隆抗体导向治疗的实验研究[J];细胞与分子免疫学杂志;1991年01期
【同被引文献】
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1 陈桦,马宝骊;Ig重、轻链联合基因文库制备基因工程抗体[J];现代免疫学;1991年04期
2 郭婵,潘志美,刘健,洪锦心;建立Ig基因富集的DNA库进行2F7单克隆抗体基因克隆[J];细胞与分子免疫学杂志;1990年02期
3 郭虹汾,刘健,潘志美,王斌,田培坤,李斯德;人─鼠抗人小细胞肺癌嵌合重链基因在小鼠骨髓瘤细胞中的表达[J];中国免疫学杂志;1994年03期
4 张文祥,程华旭,刘健;应用原位突变技术构建免疫球蛋白K链可变区基因克隆及表达载体[J];肿瘤;1995年01期
5 王建安,郑建强,陈勇,白炎;电脉冲介导基因在小鼠杂交瘤细胞的高效转移[J];细胞与分子免疫学杂志;1991年04期
【二级引证文献】
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1 程卫青;大鼠抗汉滩病毒单抗可变区基因的克隆、测序和人—大鼠嵌合抗体的表达及ScFv基因构建的研究[D];第四军医大学;1994年
【相似文献】
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1 陈珞京,谷丽雅;cDNA的合成与克隆[J];中国生物工程杂志;1984年01期
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3 余力,张廼衡,吴凌,冯树异,张颖妹,刘惠珍,闵福源,张昌颖;脊髓灰质炎病毒中Ⅰ9株基因组克隆及其部分结构分析[J];中国生物化学与分子生物学报;1989年01期
4 杨明久;分子杂交与酶联免疫组织原位杂交[J];中国医科大学学报;1989年01期
5 刘钟瑸;杨贵贞;;核酸探针标记和杂交技术[J];国际遗传学杂志;1989年06期
6 吴中亮;T—T二聚体DNA探针的mRNA原位定位[J];日本医学介绍;1990年08期
7 罗进贤;李文清;张添元;;黑曲霉mRNA的分离及其cDNA的合成和克隆[J];中山大学学报(自然科学版);1990年03期
8 黄震宇,朱伟民,洪锦心;应用聚合酶链反应进行单克隆抗体2F7的cDNA克隆的扩增及标记同位素探针[J];细胞与分子免疫学杂志;1991年03期
9 叶群瑞,陈伯权,吴美英,黄华樑,孙黎;小鼠抗狂犬病毒单克隆抗体轻链重链可变区基因的cDNA克隆[J];病毒学报;1991年01期
10 杨卫民,沈孝宙,曹咏清,张致一;兔早期胚泡特异肽的cDNA克隆[J];中国科学B辑;1991年03期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 许健;张桦;王希东;喻梅辉;;小花棘豆(Oxytripis glaba D.C)毒素基因的cDNA克隆及序列测定[A];中国生物化学与分子生物学会第八届会员代表大会暨全国学术会议论文摘要集[C];2001年
2 王骥;赵辅昆;陈清西;许根俊;;福寿螺(Ampullaria Crossean)外切-β-1,4-葡聚糖酶/外切-β-1,4-木聚糖酶的cDNA克隆及表达[A];中国生物化学与分子生物学会第八届会员代表大会暨全国学术会议论文摘要集[C];2001年
3 毛国红;丁存保;孙大业;;白芷细胞外21kD CaMBP cDNA克隆和表达的研究[A];中国生物化学与分子生物学会第八届会员代表大会暨全国学术会议论文摘要集[C];2001年
4 李翠凤;詹红利;刘华;李国亮;凌启阆;;拟南芥菜钙调素结合蛋白cDNA克隆的分离和鉴定[A];中国生物化学与分子生物学会第八届会员代表大会暨全国学术会议论文摘要集[C];2001年
5 卜友泉;罗绪刚;李素芬;鲁成;李英文;邝霞;刘彬;李建凡;余顺祥;;鸡含锰超氧化物歧化酶cDNA克隆及序列分析[A];第四届中国畜牧兽医青年科技工作者学术研讨会论文集[C];2001年
6 胡细连;钟小燕;吴祥甫;周元聪;庄茂辛;舒雨雁;;江浙蝮蛇毒金属蛋白酶的cDNA克隆及表达[A];中国毒理学会生物毒素毒理专业委员会第4次、中国生物化学与分子生物学会毒素专业组第5次学术研讨会论文摘要[C];2001年
7 叶建国;陈瑾;左小潘;吉永华;;两个新型东亚钳蝎类α型毒素的cDNA克隆和鉴定[A];中国毒理学会生物毒素毒理专业委员会第4次、中国生物化学与分子生物学会毒素专业组第5次学术研讨会论文摘要[C];2001年
8 杨素霞;范保星;孙敬芬;周平坤;吴德昌;;人DNA修复基因cDNA克隆及微矩阵分析[A];中国毒理学会第三届全国学术会议论文(摘要)集[C];2001年
9 徐文岳;黄复生;张敬如;段建华;;大劣按蚊血细胞核糖体蛋白部分S7cDNA克隆[A];昆虫与环境——中国昆虫学会2001年学术年会论文集[C];2001年
10 缪元颖;庄艳;杨顺楷;刘成君;;红酵母苯丙氨酸解氨酶基因cDNA的克隆[A];首届中国青年学者微生物遗传学学术研讨会论文摘要集[C];2002年
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1 记者 曹继军 通讯员 赵如江;我科学家首次发现附睾中一种抗菌肽基因[N];光明日报;2001年
2 佚名;诠释环境与人的“亲密”关系[N];医药经济报;2001年
3 东娜;安捷伦推出第三套基因筛选微阵列试剂盒[N];科技日报;2002年
4 河北远征药业 秦建华;猪细小病毒病诊断与预防[N];中国畜牧兽医报;2006年
5 刘春艳;霍奇金淋巴瘤患者及亲属中EB病毒载量与抗病毒衣壳抗原IgG滴度正相关[N];中国医学论坛报;2006年
6 本报记者 贾婧实习生 范毓蓉;旋转分子马达与量子点技术结合有望出新成果[N];科技日报;2007年
7 秦秋;中药研究与咖啡研究异曲同工[N];中国中医药报;2008年
8 秦秋;中药研究可借鉴咖啡研究思路[N];中国医药报;2008年
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1 王宝利;1、核因子—κB受体激活物配基(RANKL)反义RNA影响破骨细胞样细胞生成的研究 2、小鼠RANKL活性区cDNA克隆及在大肠杆菌和毕赤酵母中的表达 3、人护骨素(OPG)成熟肽基因酵母表达载体的构建[D];天津医科大学;2002年
2 唐亚雄;利用裂殖酵母体系,拟南芥盐胁迫应答相关基因的克隆、鉴定及转基因分析[D];四川大学;2002年
3 刘涛;利用侵染性cDNA研究甜菜坏死黄脉病毒RNA5与病毒致病性的关系[D];中国农业大学;2003年
4 张今今;中国葡萄属野生种抗白粉病基因cDNA克隆及序列分析[D];西北农林科技大学;2003年
5 蒋永芳;鼠CD40配体cDNA克隆及鼠CD40配体基因治疗鼠肝细胞癌的初步研究[D];中南大学;2003年
6 潘延云;花粉PLC活性检测、cDNA克隆及功能分析[D];河北师范大学;2003年
7 毛国红;白芷细胞外钙调素结合蛋白(ECBP21)cDNA克隆及鉴定[D];河北师范大学;2003年
8 罗阳;人类BSP蛋白相关新基因的cDNA克隆、定位和表达[D];中国医科大学;2002年
9 杨华蓉;人抗菌多肽的分离纯化、鉴定、cDNA克隆、基因重组及其结构与功能研究[D];四川大学;2003年
10 王建华;猪CD3ε、CD4和CD8α分子的cDNA克隆、序列分析与原核表达[D];中国农业大学;2004年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 卜友泉;鸡含锰超氧化物歧化酶cDNA克隆与全序列分析[D];西南农业大学;2001年
2 张永丽;用cDNA徽阵列技术筛选并鉴定与水稻白叶枯病抗性相关的差异表达基因的cDNA克隆[D];广西大学;2001年
3 林居强;猪特异性脂肪细胞膜蛋白基因的cDNA克隆和测序研究[D];华中农业大学;2001年
4 郭天剑;MDR肿瘤细胞KBV200的PKC-α亚型cDNA克隆及激活的实验研究[D];第一军医大学;2002年
5 展德文;层粘连蛋白α_5 LG1-3、LG2、LG3的cDNA克隆、表达及LG1-3蛋白多克隆抗体的制备[D];中国人民解放军军需大学;2002年
6 张永霞;鸡IL-1βcDNA克隆、序列分析及原位杂交检测[D];内蒙古农业大学;2002年
7 张忠琴;百合花粉酪蛋白激酶2α亚基cDNA克隆及其序列分析[D];河北师范大学;2002年
8 魏巍;棉铃虫几丁质酶cDNA克隆及表达研究[D];中国农业科学院;2002年
9 王芳;花生(Arachis hypogaea L.)未成熟种子cDNA文库的构建与花生Arachin基因cDNA克隆的初步筛选[D];山东师范大学;2003年
10 郑文光;芜菁花叶病毒CDN1株系植物表达载体构建和芜菁花叶病毒CHN5株系cDNA克隆[D];湖南农业大学;2003年
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