食品级分泌表达载体的构建及报告蛋白在乳酸乳球菌中的表达--《微生物学报》2008年03期

《微生物学报》 2008年03期

食品级分泌表达载体的构建及报告蛋白在乳酸乳球菌中的表达

【摘要】：为构建乳酸乳球菌食品级分泌表达载体,通过PCR扩增质粒pMG36e的p32启动子片段及乳酸乳球菌MG1363未知分泌蛋白(Usp45)基因的核糖体结合位点、分泌信号肽和成熟肽前11个氨基酸的编码序列(SPusp45),克隆到食品级载体pSH91中,构建食品级分泌性表达载体pSQ;克隆报告基因金黄色葡萄球菌核酸酶(NucA)成熟肽的编码序列nucA到pSQ中分泌信号后,转化乳酸乳球菌MBP71,构建了乳酸乳球菌食品级分泌性表达系统Llactis/pSQ-nucA;通过TB-D法和酶谱法检测Llactis/pSQ-nucA的表达形式、表达量并与以前构建的Llactis/pSQZ-nucA系统表达能力进行比较,结果发现Llactis/pSQ-nucA能够分泌性表达NucA,分泌性表达的NucA量大约是胞内NucA的10倍;Llactis/pSQ-nucA的表达量高于lactis/pSQZ-nucA。为进一步目的蛋白的的分泌性表达及食品级疫苗的研制奠定了基础。

【作者单位】：中国疾病预防控制中心传染病预防控制所
【关键词】： 乳酸乳球菌 p启动子 食品级载体 分泌性表达 报告蛋白
【分类号】：Q78
【DOI】：CNKI:SUN:WSXB.0.2008-03-005
【正文快照】：

乳酸乳球菌(Lactococcus lactis)是一种广泛应用于食品工业的微生物,用来生产和保存乳制品,被公认为安全的食品级微生物(generally regarded as safe,GRAS)。以乳酸乳球菌作为异源蛋白的输送载体,逐渐成为食品工业、生物制药和疫苗研究的热点。一系列基于乳酸乳球菌的表达系

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