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《皖南医学院学报》 2016年06期
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人PD-L1基因启动子克隆及其荧光素酶报告基因载体的构建

丰江舟  杨梦梦  朱彬彬  曹文清  郑立春  周兴路  王潞  吴志浩  
【摘要】:目的:对人源PD-L1基因启动子进行PCR扩增,构建PD-L1荧光素酶报告基因。方法:用PCR扩增方法获得PD-L1基因启动子;PD-L1启动子和载体行KpnⅠ、XhoⅠ酶切、连接和转化,然后行菌落PCR以及测序等。构建成功后转染至A549细胞中并检测PD-L1启动子活性。结果:经PCR方法扩增出PD-L1基因启动子片段,;菌落PCR鉴定各重组体构建正确并经生工测序成功;瞬时转染A549细胞后经报告基因检测得知所克隆的不同片段序列具有启动子活性。结论:成功克隆PD-L1基因启动子,构建出不同片段基因启动子荧光素酶报告基因,为进一步研究其分子机制提供详实基础。

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1 徐宽枫,施勤,王泳,周璇,於葛华,陈永井,李文香,张学光;PD-L1信号对T细胞体外激发的调节作用[J];中华微生物学和免疫学杂志;2004年04期
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