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《沈阳药科大学学报》 2017年02期
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诱导型启动子在谷氨酸棒杆菌ATCC13032中调控强度的分析

陈晓雪  陈飚  孙兵兵  蒋宇  杨晟  张怡轩  
【摘要】:目的研究诱导型启动子Ptrc、Ptac、Para BAD、Prha、Ptet在谷氨酸棒杆菌(Corynebacterium glutamicum)ATCC13032生长迟缓期、对数期、稳定期和衰亡期四个时期的相对转录强度。方法在待测启动子后连接报告基因β-半乳糖酶基因Lac Z克隆入质粒p MBBL,并转入谷氨酸棒杆菌ATCC13032。取菌体生长迟缓期、对数期、稳定期、衰亡期四个时期诱导和不诱导的细胞,经超声波粉碎后,检测半乳糖酶的酶活。结果通过菌株生长曲线,确定3、11、24和48 h为菌种生长迟缓期、对数期、稳定期和衰亡期的取样时间点。启动子在不同生长时期转录强度不同,以Ptrc为例,转录强度由强至弱依次为诱导培养24 h48 h11 h3 h;添加诱导剂条件下,培养11 h启动子表达相对强度由强至弱依次是PtrcPtetPara BADPtacPrha。结论各种诱导型启动子的表达强度在有无诱导剂的条件下显著不同。
【作者单位】沈阳药科大学生命科学与生物制药学院;中国科学院上海生命科学研究院植物生理生态研究所;
【关键词】谷氨酸棒杆菌 诱导型启动子 β-半乳糖酶 报告基因
【基金】:国家自然科学基金资助项目(31370125) 2015年度辽宁省高等学校优秀科技人才支持计划项目(LR2015065)
【分类号】:Q93;Q78
【正文快照】:
科学研究院植物生理生态研究所,上海200032)谷氨酸棒杆菌是革兰氏阳性兼性厌氧菌,其作为表达系统一方面用作生产调味品、化妆品、维生素[1]、寡核苷酸[2]等添加剂;另一方面用于生产有机酸[3]、高级醇[4]、二胺类[5]和聚合物[6]等重要的化合物。由于谷氨酸棒杆菌用途广泛,对其

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