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《实验动物科学》 2017年03期
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流感嗜血杆菌、溶血嗜血杆菌和多杀巴斯德杆菌病多重荧光定量PCR检测方法的建立与初步应用

邢进  冯育芳  岳秉飞  贺争鸣  孙晓梅  代解杰  
【摘要】:目的建立同时检测实验动物中的流感嗜血杆菌、溶血嗜血杆菌和多杀巴斯德杆菌的多重实时荧光定量PCR(qPCR)检测方法。方法分别根据三种病原菌的Hpd基因和KMT1基因设计特异性引物和Taqman探针,经特异性、敏感性和重复性验证,建立多重qPCR检测方法,并对822份实验动物呼吸道样本进行检测应用。结果所建立的多重qPCR方法与其他29种病原菌间无交叉反应,对三种病原菌的检测限可达到10个拷贝/μL。树鼩样品中溶血嗜血杆菌和多杀巴斯德杆菌的阳性率分别为10%(6/60)和21.7%(13/60),其他实验动物中均未检出上述三种病原菌。结论本研究所建立的多重qPCR检测方法,可快速检测实验动物中的上述三种呼吸道病原菌。
【作者单位】中国食品药品检定研究院实验动物资源研究所;中国医学科学院/北京协和医学院医学生物学研究所树鼩种质资源中心;
【关键词】流感嗜血杆菌 溶血嗜血杆菌 多杀巴斯德杆菌 多重荧光定量PCR 实验动物
【基金】:国家科技支撑计划项目(No.2014BAI01B01)
【分类号】:Q78;Q95-33
【正文快照】:
流感嗜血杆菌(Haemophilus influenzae)、溶血嗜血杆菌(Haemophilus haemolyticus)和多杀巴斯德杆菌(Pasteurella multocida)都是属于巴斯德菌科(Pasteurellaceae)革兰氏阴性短杆菌。流感嗜血杆菌和多杀巴斯德杆菌通常致病力较强,是重要的人兽共患病原[1],溶血嗜血杆菌则被认

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