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沉默CCND1基因表达抑制ERK/MAPK信号通路激活提升宫颈癌化疗敏感性

郑懿  李希聪  赵太坤  姜敏  
【摘要】:目的研究CCND1介导ERK/MAPK信号通路介导宫颈癌化疗敏感性的机制。方法收集60例宫颈癌及癌旁组织标本,qRT-PCR检测组织中CCND1、ERK和MAPK表达量,免疫组化确认并定位CCND1在组织中的表达。筛选宫颈癌细胞株,将细胞分组为Blank组、pc DNA-CCND1组、pc DNA-CCND1 NC组、siRNA-CCND1组、siRNA-CCND1NC组、SCH772984组、Honokiol组和siRNA-CCND1+Honokiol组。qRT-PCR和Western blot检测CCND1、ERK和MAPK基因和蛋白表达。CCK8检测肿瘤细胞顺铂敏感性,流式细胞仪检测细胞凋亡变化。结果与癌旁组织相比,宫颈癌中CCND1、ERK和MAPK呈高表达(P均0.05)。Blank组、pc DNA-CCND1 NC组和siRNA-CCND1 NC组各指标无统计学差异(P均 0.05)。相比pc DNA-CCND1 NC组,pc DNA-CCND1组CCND1、ERK和MAPK基因和蛋白表达显著增加;相比siRNA-CCND1 NC组,siRNA-CCND1组表达均显著降低(P均0.05);而相比Blank组,siRNA-CCND1+Honokiol组CCND1表达降低(P均0.05),ERK和MAPK表达无显著变化(P均 0.05)。相比Blank组,pc DNA-CCND1组和Honokiol组细胞顺铂敏感性和细胞凋亡率下降(P均0.05); siRNA-CCND1组和SCH772984组细胞顺铂敏感性和细胞凋亡率上升(P均0.05);而siRNA-CCND1+Honokiol组与Blank组相比差异不显著(P均 0.05)。结论 CCND1基因沉默表达可能通过抑制ERK/MAPK信号通路的激活,促进宫颈癌细胞凋亡,并提高化疗敏感性。

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