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《现代肿瘤医学》 2010年02期
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逆转录病毒介导重组CXCR4对前列腺癌细胞侵袭力的影响

刁鑫伟  王钦文  谢启超  陈正堂  叶明福  汤金梁  
【摘要】:目的:构建CXCR4基因重组逆转录病毒表达载体pLEGFP-CXCR4,并转染PC-3细胞,探讨趋化因子受体CXCR4对人前列腺癌细胞体外侵袭能力的影响。方法:分离健康人外周血单个核细胞,提取总RNA,以其为模板,RT-PCR法扩增CXCR4,获取CXCR4基因全长序列,装入带有绿色荧光蛋白(GFP)的逆转录病毒质粒pLEGFP-N1,用脂质体法转染PC-3细胞,采用实时定量PCR和Western blotting观察CXCR4表达情况,并通过体外细胞-基质粘附试验和Transwells小室检测肿瘤细胞体外侵袭能力的变化。结果:成功构建pLEGFP-CXCR4载体,转染人前列腺癌细胞72h后,CXCR4 mRNA及蛋白质水平明显上调,细胞的体外侵袭力明显增强,增殖活性增强。结论:CXCR4转染能够明显提高CXCR4基因mRNA及蛋白水平,提高人前列腺癌细胞体外侵袭能力。

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