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《生物技术通讯》 2005年01期
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锈菌夏孢子DNA的微量快速提取方法

余仲东  高爱琴  曹支敏  
【摘要】:采用4种方法对毛白杨锈病单个夏孢子堆DNA提取和ITS-PCR扩增表明,钢珠法、玻片法均是锈菌基因组DNA微量快速提取的合适方法,以钢珠法最优,整个过程仅需30min,并且可以获得与CTAB法、氯化苄法相同的PCR扩增结果。钢珠法是在提取液中加入2~3颗钢珠,靠钢珠在涡旋中的相互碰撞将夏孢子破壁,以同时加入NaOH(终浓度3.3%)和Chelex-100(终浓度1.6%)效果最好,ITS-PCR扩增能稳定得到700bp片段。玻片法也能得到相同的结果。分析比较了4种方法的优缺点。

【引证文献】
中国期刊全文数据库 前2条
1 余仲东,梅华全,曹支敏,高爱琴;杨树锈病的PCR检测[J];西北林学院学报;2005年03期
2 余仲东;刘小勇;曹支敏;;松杨栅锈菌的ITS序列和微卫星分析[J];中国农业科学;2006年06期
中国博士学位论文全文数据库 前1条
1 余仲东;松杨栅锈菌种内群体分化及SCAR标记[D];西北农林科技大学;2006年
中国硕士学位论文全文数据库 前2条
1 陈建珍;落叶松—杨栅锈菌DNA多态性和同工酶分析[D];西北农林科技大学;2006年
2 刘春梅;落叶松—杨栅锈菌生理小种鉴定[D];西北农林科技大学;2007年
【参考文献】
中国期刊全文数据库 前1条
1 余仲东,张星耀,曹支敏;真菌核糖体基因间隔区研究概况[J];西北林学院学报;2000年02期
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前8条
1 熊庆,刘作易;几种分子生物学方法在真菌中的应用[J];贵州农业科学;2002年03期
2 卢明锋,黄玉碧,张红雨,王红宁,张月杰;一株苝醌类光敏剂产生菌rRNA基因ITS区的测序分析[J];四川农业大学学报;2004年02期
3 凌建亚,彭俊峰,张晗星,张长铠;核糖体DNA ITS区应用于虫草属无性型鉴定的初步研究[J];山东大学学报(理学版);2003年03期
4 王娜,马雅军,陈晓斌,代光辉,王喆之;番茄灰霉病菌的分子特征研究[J];上海交通大学学报(农业科学版);2005年02期
5 臧金平,连宾,袁生;简便易行的食用菌菌丝体基因组DNA提取法[J];食品科学;2005年03期
6 佟丽华,连宾;一株食用外生菌根菌乳牛肝菌的分子鉴定[J];食品科学;2005年08期
7 张宝俊;李志岗;王建明;郭明霞;徐玉梅;;镰刀菌基因组DNA的抽提及特异片段的扩增分析[J];山西农业大学学报(自然科学版);2006年02期
8 余仲东;刘小勇;曹支敏;;松杨栅锈菌的ITS序列和微卫星分析[J];中国农业科学;2006年06期
中国博士学位论文全文数据库 前3条
1 林晓民;大型真菌的生态多样性及分子鉴定[D];西北农林科技大学;2004年
2 朱建兰;虫生菌四脊裸胞壳(Emericella quadriclineata)Dh菌株生理特性、致病性和分子生物学研究[D];甘肃农业大学;2005年
3 余仲东;松杨栅锈菌种内群体分化及SCAR标记[D];西北农林科技大学;2006年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 李洁莉;猴头菌药效成分研究和猴头菌属的分子生物学鉴定[D];南京师范大学;2002年
2 齐向辉;松乳菇及其分离菌株的RAPD-PCR分析研究[D];中南林学院;2003年
3 潘欣;四川省松树散斑壳菌的种类及其rRNA基因ITS区的PCR、克隆和序列分析[D];四川农业大学;2004年
4 张文利;大豆疫霉的分子检测及其钙调素基因的功能分析[D];南京农业大学;2005年
5 王娜;三种蔬菜病害病原体的分子特征分析和分子检测研究[D];陕西师范大学;2005年
6 臧金平;树舌菌株的分离、鉴定及培养研究[D];南京师范大学;2005年
7 王良华;大豆疫霉的检测及其卵孢子致死温度测定[D];南京农业大学;2005年
8 吕素芳;交链孢菌基因p42A的原核表达、纯化及生物信息学分析[D];安徽农业大学;2006年
9 薛美芹;石斛内生真菌的形态和分子鉴定及其细胞毒活性研究[D];贵州大学;2006年
10 潘牧;一株丝状真菌对含钾矿物的风化作用研究[D];贵州大学;2006年
【同被引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 许仁林,国伟,汪训明,师素云,杨树青,毛裕民;杂交水稻及其“三系”线粒体DNA的AP-PCR指纹图谱[J];植物学报;1994年01期
2 陈受宜,张耕耘,单卫星,李振岐,吴立人;小麦条锈菌一个中度重复DNA序列家族的鉴定[J];中国科学C辑;1997年03期
3 魏松红,王罡,张领兵,张艳贞,杨家书;东北春麦区小麦白粉病菌生理小种鉴定及其RAPD分析[J];吉林农业大学学报;2001年02期
4 文昭,王大一,李晋涛,杨光伟,裴炎;22个甘薯品种(系)遗传背景的RAPD图谱分析[J];农业生物技术学报;1997年01期
5 向道权,曹海河,曹永国,杨俊品,黄烈健,王守才,戴景瑞;玉米SSR遗传图谱的构建及产量性状基因定位[J];遗传学报;2001年08期
6 郑文明,陈受宜,康振生,王阳,李振岐,吴立人;PSR(Puccinia Striiformis Repeat)序列的基因组特异性和指纹遗传稳定性研究[J];植物病理学报;2000年03期
7 陈剑山;郑服丛;;ITS序列分析在真菌分类鉴定中的应用[J];安徽农业科学;2007年13期
8 易庆平;罗正荣;张青林;;植物总基因组DNA提取纯化方法综述[J];安徽农业科学;2007年25期
9 许黎黎,邵雪玲;鲫鱼不同组织过氧化氢酶同工酶活性的比较[J];氨基酸和生物资源;2003年04期
10 汪永庆,徐来祥,张知彬;RAPD技术的标准化问题[J];动物学杂志;2000年04期
中国重要会议论文全文数据库 前2条
1 罗林明;沈丽;廖华明;;四川小麦条锈病菌源地综合治理对策与措施研究[A];农业生物灾害预防与控制研究[C];2005年
2 胥荻;王海光;马占鸿;石守定;;我国小麦条锈病菌越夏区和越冬区气候区划——应用CLIMEX和气候相似距方法[A];中国植物病理学会2006年学术年会论文集[C];2006年
中国博士学位论文全文数据库 前3条
1 曹丽华;中国小麦条锈菌生理小种分子标记的研究[D];西北农林科技大学;2003年
2 赵嘉平;树木溃疡病菌—葡萄座腔菌属及相关真菌系统分类研究[D];中国林业科学研究院;2007年
3 李勇;小麦品种C591中一个主效抗条锈病基因的定位与分子标记研究[D];中国农业科学院;2006年
中国硕士学位论文全文数据库 前9条
1 张瑞颖;香菇菌株多相鉴定鉴别技术研究[D];中国农业大学;2004年
2 雷天刚;甘蓝型黄籽油菜SSR和同工酶标记的遗传多样性及指纹图谱[D];西南农业大学;2005年
3 徐伟;不同基因型红麻及其近缘种亲缘关系的RAPD分析[D];安徽农业大学;2005年
4 裴静宇;小麦条锈菌异核现象研究及SSR分子标记建立[D];吉林农业大学;2006年
5 陈建珍;落叶松—杨栅锈菌DNA多态性和同工酶分析[D];西北农林科技大学;2006年
6 石凤莲;辽东地区油松散斑壳属生态学及生物学特性的研究[D];沈阳农业大学;2007年
7 魏明;落叶松—杨栅锈菌生理小种的SCAR标记[D];西北农林科技大学;2007年
8 刘艳军;棉花黄萎病菌系基于AFLP的遗传分化研究[D];河北农业大学;2003年
9 贾瑞祥;中国小麦条锈菌主要流行小种DNA多态性分析[D];中国农业大学;2005年
【二级引证文献】
中国期刊全文数据库 前1条
1 余仲东;刘小勇;曹支敏;;松杨栅锈菌的ITS序列和微卫星分析[J];中国农业科学;2006年06期
中国博士学位论文全文数据库 前1条
1 余仲东;松杨栅锈菌种内群体分化及SCAR标记[D];西北农林科技大学;2006年
中国硕士学位论文全文数据库 前3条
1 敖妍;扶芳藤育种中~(60)Coγ射线辐射效应与杂交技术的初步研究[D];内蒙古农业大学;2006年
2 肖荣凤;瓜类尖孢镰刀菌生理分化特性研究[D];福建农林大学;2007年
3 刘春梅;落叶松—杨栅锈菌生理小种鉴定[D];西北农林科技大学;2007年
【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前3条
1 李英波,罗信昌,李滨,郭良栋,文华安;香菇菌株的限制性片段长度多型性[J];菌物系统;1995年03期
2 贾建航,李传友,金德敏,李莉云,王斌,翁曼丽;香菇空间诱变突变体的分子生物学鉴定研究[J];菌物系统;1999年01期
3 阎培生,罗信昌,周启;木耳属真菌rDNA特异性扩增片段的RFLP研究[J];菌物系统;1999年02期
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 吴如平,石碧沙;用玻片法培养观察菌类[J];生物学通报;1995年02期
2 刘江秋;李忠义;何亦祥;;酶标SPA玻片法快速检测流行性出血热血清抗体的研究[J];微生物学杂志;1983年03期
3 张同成;殷秋华;严荣芬;;空肠/结肠弯曲菌血清学分型的研究[J];苏州大学学报(医学版);1986年Z1期
4 蒋竞武;吉松涛;王丽霞;;甲型肝炎病毒在FRhk-4细胞培养繁殖中的特性[J];中国生物制品学杂志;1989年01期
5 闫倬云;生乳中凝固酶阳性葡萄球菌的氯化锂高盐肉汤分离[J];卫生研究;1977年05期
6 张同成,殷秋华,严荣芬;空肠/结肠弯曲菌血清学分型的研究[J];江苏医药;1986年04期
7 刘朱梅,张立志,曹月升,王建升,冯志山;86株金黄色葡萄球菌生物学特性探讨[J];现代中西医结合杂志;1998年05期
8 陈彦卓;冯志坚;汪敏刚;陈秀娟;;上海地区1962—1965三年内空中花粉的初步观察[J];华东师范大学学报(自然科学版);1979年01期
9 杨吉明;第21次临床检验师国家考试[J];微生物学免疫学进展;1983年02期
10 孔昭敏,张志英,杨永红;协同凝集试验对细菌性痢疾病原快速检验的研究[J];微生物学通报;1984年05期
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