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《生物技术通报》 2011年10期
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人乳头瘤病毒L1基因与丹毒丝菌SpaA-N优势抗原表位序列的嵌合重组质粒构建及活性鉴定

庆格乐图  杨薇薇  晏鹏飞  苏幼红  李江伟  
【摘要】:为确定丹毒丝菌表面保护性抗原A的N-末端(SpaA-N)优势抗原表位,研发新型表位DNA嵌合疫苗,利用生物信息学软件对丹毒丝菌SpaA-N的优势B细胞抗原表位进行预测,以重叠PCR将优势表位插入人乳头瘤病毒16型的主要衣壳蛋白(HPV-16 L1)HI环结构的编码序列中,构建获得重组嵌合质粒pcDNA3-HPV-L1-ΔspaA。该重组质粒经体内、外瞬时转染后,RT-PCR均扩增获得了1 500 bp左右的目的片段。免疫印迹试验显示,体外转染嵌合质粒的细胞总蛋白能够与GST-SpaA-N重组蛋白免疫血清在56 kD处产生特异性结合。ELISA分析显示嵌合质粒可在小鼠体内产生差异显著的特异性抗体(P0.01),抗体滴度为1∶1 000。此外,pcDNA3-HPV-L1-ΔspaA制备的抗血清至少可在1∶10稀释度条件下,介导外源补体对半数以上的菌体进行杀伤。该研究表明,获得的SpaA-N表位DNA嵌合疫苗具有免疫活性,为研发安全有效的丹毒丝菌新型DNA疫苗提供了一个新思路。

【参考文献】
中国期刊全文数据库 前2条
1 董华;王军军;应天翼;李霆;王恒樑;许彩民;;一种同时提取细胞总RNA和总蛋白的方法[J];生物技术通讯;2005年06期
2 曹文尧;李江伟;吕芳;侯秋莲;张富春;;丹毒丝菌spaA基因免疫保护区的克隆与功能研究[J];中国预防兽医学报;2007年07期
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前5条
1 陈开旭;李轶杰;张富春;曹文尧;李江伟;;spaA嵌合体核酸疫苗增强抗体水平的研究[J];细胞与分子免疫学杂志;2009年11期
2 陈显兵;邓明会;袁德培;袁成福;;乙型肝炎患者外周血树突状细胞Toll样受体4表达[J];中国公共卫生;2008年10期
3 郭宏林;王培昌;;北京市健康人群DNA聚合酶δ1的增龄性变化[J];中国老年学杂志;2011年03期
4 许峰;秦玉蓉;阴彦辉;张振韬;张亚妮;高波;杜立新;李碧春;;湖羊myogenin重组基因表达及其亚细胞定位的研究[J];中国农学通报;2011年07期
5 夏丽洁;苏幼红;张清华;夏雪琴;刘红春;李江伟;;新疆双峰驼抗血清中重链抗体的分离鉴定[J];中国农业科学;2010年17期
中国硕士学位论文全文数据库 前2条
1 晏鹏飞;猪丹毒丝菌SpaA蛋白的功能区分析及其抗原表位嵌合质粒的构建[D];新疆大学;2010年
2 罗丹丹;鸭瘟病毒UL47基因转录时相分析及主要抗原域的原核表达和抗体制备[D];四川农业大学;2010年
【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前1条
1 吴坤,陈红歌,刘娜,李慧敏;小麦表面微生物总DNA提取方法的比较与改进[J];中国粮油学报;2003年06期
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 刘志远 ,许淑珍;什么是人乳头瘤病毒?[J];中华检验医学杂志;2003年04期
2 王飞鹏;何贤辉;;3种流感病毒细胞毒T淋巴细胞抗原表位比较[J];中国公共卫生;2010年10期
3 吴菊芳;尿路感染病人应用大剂量丁胺卡那霉素后血清中杀菌活性及其后继效应[J];国外医药.抗生素分册;1988年03期
4 黄健,郭建巍,蔡美英;细胞毒性T细胞表位预测[J];微生物学免疫学进展;2004年03期
5 章辉;朱荫昌;;B细胞表位预测的研究进展[J];中国血吸虫病防治杂志;2006年03期
6 刘志远 ,许淑珍;人乳头瘤病毒可导致哪些疾病?[J];中华检验医学杂志;2003年03期
7 袁瑾懿;汪复;Sader HS;Fritsche TR;Jones RN;;Iclaprim对近期临床分离革兰阳性菌株的效价和杀菌活性[J];中国感染与化疗杂志;2010年04期
8 许文;石朝辉;朱珊丽;陆丽君;孟锐峰;李玲;张丽芳;;HPV6L1/CtMOMP多表位融合基因在COS-7细胞的表达及其在小鼠的免疫效果观察[J];中国生物化学与分子生物学报;2010年08期
9 周宇;人乳头瘤病毒与消化道肿瘤[J];国外医学.内科学分册;1995年10期
10 ;人乳头瘤病毒导致口咽癌[J];中国肿瘤;2001年04期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 郭龙军;陆月华;黄立平;危艳武;刘长明;;猪圆环病毒2型Cap蛋白核定位信号区抗原表位的鉴定[A];中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第八次学术研讨会论文集[C];2010年
2 李丹丹;高慎阳;刘志强;吴淑良;周铁忠;;猪戊型肝炎病毒ORF2结构蛋白单克隆抗体的制备及其B细胞抗原表位的鉴定[A];动物检疫学分会2010年学术年会论文集[C];2010年
3 孙长江;韩文瑜;;抗原表位的研究与应用进展[A];2006中国微生物学会第九次全国会员代表大会暨学术年会论文摘要集[C];2006年
4 王开功;陈军义;周碧君;文明;程振涛;刘飞;;PRRSV-GP5基因的克隆及其蛋白结构和B细胞表位预测[A];中国畜牧兽医学会2010年学术年会——第二届中国兽医临床大会论文集(下册)[C];2010年
5 许晓东;朱冠保;张丽芳;张德意;张启瑜;;人乳头瘤病毒-黑色素瘤抗原CTL表位嵌合基因克隆及其表达[A];2005年浙江省外科学术会议论文汇编[C];2005年
6 郑佳琳;江飙;张东霞;施赫赫;郭霄峰;;狂犬病病毒糖蛋白抗原表位富集区单克隆抗体的制备[A];中国畜牧兽医学会兽医公共卫生学分会第二次学术研讨会论文集[C];2010年
7 郑佳琳;江飙;张东霞;施赫赫;郭霄峰;;狂犬病病毒糖蛋白抗原表位富集区单克隆抗体的制备[A];2010全国狂犬病防控高层论坛论文集[C];2010年
8 郑佳琳;江飙;张东霞;施赫赫;郭霄峰;;狂犬病病毒糖蛋白抗原表位富集区单克隆抗体的制备[A];中国畜牧兽医学会生物制品学分会中国微生物学会兽医微生物学专业委员会2010年学术年会(第三届中国兽药大会学术论坛)论文集[C];2010年
9 汪桂范;尹文;;包皮炎与宫颈炎患者人乳头瘤病毒的检测[A];中国性学会成立十周年首届中国性科学高级论坛论文汇编[C];2004年
10 乔友林;;子宫颈癌预防研究的里程碑[A];全国肿瘤流行病学和肿瘤病因学学术会议论文集[C];2007年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 北京地坛医院感染中心副主任医师 刘彦春;人乳头瘤病毒防治新篇[N];健康报;2010年
2 北京协和医院妇产科主任医师 谭先杰;人乳头瘤病毒的自述[N];健康时报;2010年
3 北京协和医院妇产科主任医师 谭先杰;人乳头瘤病毒的自述[N];健康时报;2010年
4 黄冰;人乳头瘤病毒毒在哪里?[N];大众卫生报;2004年
5 张中桥;肺鳞癌与人乳头瘤病毒有关[N];健康报;2006年
6 张中桥;肺鳞癌与人乳头瘤病毒感染有关[N];中国医药报;2006年
7 记者 郑莉丽;实时分子检测人乳头瘤病毒在欧洲推出[N];健康报;2009年
8 潘锋;我国妇女85%的宫颈癌由人乳头瘤病毒16/18型所致[N];科学时报;2007年
9 衣晓峰;宫颈癌年轻化人乳头瘤病毒是祸首[N];大众卫生报;2004年
10 李天舒;西藏 女性人乳头瘤病毒感染率低于全国水平[N];健康报;2008年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 梁思;人乳头瘤病毒相关皮肤病发病机制研究[D];中国协和医科大学;2010年
2 郭爱疆;猪带绦虫六钩蚴TSOL18抗原表位及组织定位的研究[D];甘肃农业大学;2010年
3 于庭;新发感染性疾病的未知病毒性病原体检测及鉴定技术的建立[D];吉林大学;2010年
4 商绍彬;猪圆环病毒衣壳蛋白抗原表位的精细定位与间接ELISA检测技术[D];浙江大学;2007年
5 马雷;RNA干扰抑制人乳腺癌MCF-7细胞S100A4基因表达的实验研究[D];南方医科大学;2010年
6 李峥;高致病性禽流感H5N1病毒血凝素蛋白中和抗原表位鉴定及其跨物种传播规律的研究[D];北京协和医学院;2009年
7 王艳华;弓形虫代谢分泌抗原和表面蛋白1抗原表位研究[D];中国农业科学院;2011年
8 刘霄卉;JSRV表面蛋白抗原表位的筛选及检测试剂盒的制备[D];内蒙古农业大学;2011年
9 戴银;鸡MHCⅠ类分子结构与抗病性关系的研究[D];安徽农业大学;2010年
10 张巍;抗人TNF-α单抗Z12识别的抗原表位研究及其人源化改造[D];中国人民解放军军事医学科学院;2003年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 任睿;兰州地区人乳头瘤病毒16型E6、E7基因的克隆及表达[D];兰州大学;2010年
2 黄建棋;乳腺导管内乳头状瘤高危型人乳头瘤病毒DNA检测的临床研究[D];山东大学;2010年
3 徐丽娟;人乳头瘤病毒16 E7基因在大肠杆菌中的克隆和表达[D];吉林大学;2010年
4 郑舟;人乳头瘤病毒假病毒制备方法的优化以及高通量中和实验检测系统的建立[D];厦门大学;2008年
5 唐艳;HPV18型E7抗原B细胞表位的预测与鉴定[D];泸州医学院;2009年
6 崔博;城乡女性对人乳头瘤病毒(HPV)和HPV疫苗认知及接种意愿的现况调查[D];大连医科大学;2010年
7 孙志辉;生殖道人乳头瘤病毒感染妇女心理状况研究[D];天津医科大学;2010年
8 周支香;环介导等温扩增技术检测单纯疱疹病毒Ⅰ型和Ⅱ型及人乳头瘤病毒6型和11型的实验研究[D];南华大学;2010年
9 屈秋慧;宫颈高危人乳头瘤病毒感染危险因素的病例对照研究[D];兰州大学;2010年
10 杨国溜;人乳头瘤病毒基因分型在子宫颈病变筛查中的应用[D];重庆医科大学;2010年
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