杜氏盐藻GAPDH cDNA的克隆鉴定及其启动子功能表达载体的构建

贾岩龙牛杰贾俊英邱乐乐薛乐勋

【摘要】：根据藻类甘油醛3-磷酸脱氢酶(Glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase,GAPDH)氨基酸高度保守序列设计简并引物,采用5′,3′-RACE和巢式PCR的方法,得到了杜氏盐藻(Dunaliella salina)GAPDH cDNA全长序列。序列同源性比较和进化树等生物信息学分析结果表明,根据获得的盐藻GAPDH的核酸序列推导的氨基酸序列与其他已知物种的GAPDH有较高的同源性。定向克隆于原核表达载体的盐藻GAPDHcDNA在大肠杆菌中以融合蛋白的形式得到了高效表达,并成功构建了由盐藻GAPDH基因启动子驱动的cat(氯霉素乙酰转移酶)基因表达载体pUCGCat,为进一步研究杜氏盐藻GAPDH基因和启动子功能奠定了试验基础。

【作者单位】：新乡医学院药学院药理学教研室;郑州大学医学院细胞生物学研究室;新乡医学院基础医学院形态学实验室;新乡医学院三附院眼科;
【关键词】： 杜氏盐藻 甘油醛-磷酸脱氢酶 cDNA 启动子
【分类号】：Q943.2
【正文快照】：

杜氏盐藻(Dunaliella salina)是一种单细胞无细胞壁、耐盐、具双边毛能游动的、光合自养真核绿藻[1]。盐藻简单的细胞结构、极其耐盐的性质、易培养和遗传操作简便的特点,有望使盐藻成为继细菌、植物、动物之后的新型藻类生物反应器。转基因杜氏盐藻可用于口服疫苗、药用蛋白

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