收藏本站
《生物技术》 2006年06期
收藏 | 投稿 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

少量制备大肠杆菌感受态细胞条件探索

李代宗  赵晓瑜  倪志华  张玉明  
【摘要】:目的:为了获得重复性好、转化率高的少量制备感受态细胞的方法,利用不同生长时期的大肠杆菌感受态细胞,进行转化比较。方法:根据普通实验室的实验条件,常规方法提取质粒,氯化钙法转化不同生长时期的大肠杆菌感受态细胞,比较转化率。结果:大肠杆菌感受态细胞的转化率与OD值显著相关,在OD600nm为0.39和0.55时转化率最高,在OD600nm为0.28~0.55之间均可得到理想的转化效果。结论:少量制备感受态细胞方法操作中无需添加任何保护试剂和细胞复苏培养,操作简便、重复性好,实验成本低廉。

【引证文献】
中国期刊全文数据库 前4条
1 杨坤;巩振辉;李大伟;;大肠杆菌高效感受态细胞的制备及快捷转化体系的建立[J];北方园艺;2010年14期
2 李伟星;张力;王扬;张君胜;杨晓志;张铎;;不同条件对大肠杆菌K12转化质粒pKD46效率研究[J];湖北农业科学;2010年08期
3 冯建成;崔贞华;罗素兰;;大肠杆菌JM109菌株高效电转化条件的研究[J];湖北大学学报(自然科学版);2008年01期
4 冯建成;牛成;邢旭;王超;;大肠杆菌HB101感受态细胞制备条件的优化[J];热带生物学报;2010年03期
中国硕士学位论文全文数据库 前1条
1 陈珊珊;应用RNAi技术对球孢白僵菌羧基转运蛋白基因BbJEN1的初步研究[D];安徽农业大学;2009年
【参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 倪志华,赵晓瑜,刘建荣,王三元,毕智丽,周欣;碱裂解提取质粒DNA的改进方法[J];河北大学学报(自然科学版);2005年02期
2 李路怡,易建华,李敏;大肠杆菌最佳感受态细胞制备的探讨[J];生命科学研究;1998年03期
3 李明才;何韶衡;;一种高效、快速的大肠杆菌感受态细胞制备及质粒转化方法[J];汕头大学医学院学报;2005年04期
4 罗婵,汤刚彬,谢体三,石德顺;感受态细胞制备与保存方法的比较研究[J];生物技术;2005年01期
5 令利军,朱艳,王红梅,张艳萍,杨随庄,王敏,张正英;保存时间及温度对大肠杆菌感受态转化效率的影响[J];生物技术通讯;2004年01期
6 万波,郑莉,程书秋;大肠杆菌感受态细胞培养与冻存条件的研究[J];微生物学通报;1997年04期
7 胡拥军,徐链,王珮;高效感受态菌制备方法比较探索[J];细胞生物学杂志;1994年02期
8 张岚岚,徐春燕,徐昌杰;大肠杆菌感受态细胞转化能力的影响因素[J];细胞生物学杂志;2004年04期
9 李振宇,徐开林,潘秀英,鹿群先,陈香梅,何徐彭;氯化铷法制备感受态细胞[J];徐州医学院学报;2004年04期
10 熊江霞,陈厚早,朱华庆,王雪,张素梅,储兵,卜丽佳,周青,桂淑玉,汪渊;感受态细胞的制备[J];安徽医科大学学报;2003年03期
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 吴丛梅,黄天华,吴德生,谢庆东,徐小虎;pEgr-P16重组质粒的构建及其在EC9706细胞中的辐射诱导表达[J];癌变.畸变.突变;2003年04期
2 阮烨,王晓云,谢庆东,黄天华;外源DNA转染精子的实验研究[J];癌变.畸变.突变;2004年03期
3 欧阳松应,徐寿水,沈文律,周传香,李春艳,欧阳红生;人PTEN基因表达载体的构建及其在U_(251)细胞中的表达[J];癌变.畸变.突变;2004年04期
4 陈传德,吴中亮,陈家堃;乙酸镍诱导的人支气管上皮细胞系转化细胞基因组不稳定性分析[J];癌变.畸变.突变;2005年01期
5 熊小芳,黄天华,谢庆东,王晓梅,陈桂兰;精子携带的HBV DNA在小鼠早期胚胎中的复制与表达[J];癌变.畸变.突变;2005年03期
6 陈兰英,赵桢,王晓涛,屈二军,陈建南;HSP70基因在人胃癌、食道癌及宫颈癌中高表达和癌变关系的研究[J];癌变.畸变.突变;2005年04期
7 程烽;盛燕;施静艺;陈漪;徐潮;刘智;梁军;潘春明;朱忠勇;宋怀东;;重叠延伸PCR法构建UGRP1基因启动子的点突变表达载体[J];癌变.畸变.突变;2007年01期
8 温居一;张积仁;李鹏;张军;王斌;;NADH对二乙基亚硝胺所致L02人肝细胞株p53基因突变和c-erbB2基因表达的影响[J];癌变.畸变.突变;2009年05期
9 金艺凤;李铁臣;王莹;刘东华;孙珍贵;;ERCC1和XPD单核苷酸多态性与非小细胞肺癌铂类化疗敏感性的关系[J];癌变·畸变·突变;2010年05期
10 王继英;武英;郭建凤;呼红梅;张印;;莱芜黑猪保种群促卵泡素β亚基和雌激素受体基因、基因型变化情况[J];山东农业科学;2007年01期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 闫云君;蔡勇;杨江科;;基于易错POR技术的短小芽胞杆菌(Bacillus pumilus)脂肪酶YZO2的定向进化[A];节能环保 和谐发展——2007中国科协年会论文集(一)[C];2007年
2 郭昱嵩;王中铎;刘楚吾;陈志明;刘筠;;勒氏笛鲷(Lutjanus russellii)线粒体DNA全序列的测定与分析[A];中国海洋学会2007年学术年会论文集(下册)[C];2007年
3 郭奕斌;陈路明;孟亚仙;王晶晶;杜传书;潘敬新;;一个广东四川家庭的IDS基因新突变[A];第六届全国优生科学大会论文汇编[C];2006年
4 于占东;赵双宜;何启伟;王翠花;牟晋华;刘春香;;抗芜菁花叶病毒转基因大白菜的研究[A];中国园艺学会第十届会员代表大会暨学术讨论会论文集[C];2005年
5 樊继德;孔庆国;张梅;于喜艳;;子房注射法获得转基因甜瓜植株[A];中国园艺学会第七届青年学术讨论会论文集[C];2006年
6 龚束芳;杨涛;车代弟;;偃麦草根茎非质体蛋白质修饰冰晶能力的观察[A];2007年中国园艺学会观赏园艺专业委员会年会论文集[C];2007年
7 王英;滕齐辉;曹慧;胡锋;崔中利;;淹水和旱作水稻土中细菌群落多样性的空间分布[A];第四次全国土壤生物和生物化学学术研讨会论文集[C];2007年
8 李俊华;吴少庭;翁亚彪;甘燕;刘洪波;刘茂铃;张仁利;高世同;黄达娜;耿艺介;;弓形虫表面抗原SAG2基因体外扩增、克隆及在Mycobacterium smegmatis mc2155中的表达[A];全国寄生虫学与热带医学学术研讨会论文集[C];2006年
9 李俊华;吴少庭;翁亚彪;甘燕;刘洪波;刘茂铃;张仁利;高世同;黄达娜;耿艺介;;弓形虫致密颗粒蛋白GRA4基因体外扩增、克隆及在Mycobacterium smegmatis mc2155中的表达[A];全国寄生虫学与热带医学学术研讨会论文集[C];2006年
10 唐小江;马争;黄建勋;黄汉林;李来玉;牛侨;;正己烷引起红细胞膜血影蛋白交联的研究[A];中国环境诱变剂学会抗诱变剂和抗癌剂专业委员会第三次全国学术会议、中国毒理学会生化与分子毒理专业委员会第五届学术交流会、贵州省环境诱变剂学会成立大会暨首届学术交流会论文集[C];2004年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 徐荣燕;嗜热真菌糖苷酶的基因克隆、表达与分子改造[D];山东农业大学;2010年
2 殷慧群;猪诱导性多潜能干细胞的建立[D];安徽农业大学;2010年
3 杨瑞梅;单链抗体介导狂犬病毒shRNA靶向制剂的研究[D];甘肃农业大学;2010年
4 宋翠平;H5N1禽流感和鹅Ⅰ型副粘病毒分离株的生物学特性及感染性的研究[D];中国海洋大学;2010年
5 郭新军;拟黑多刺蚁肌细胞增强因子2与肌钙蛋白Ⅰ亚基基因的克隆及其在发育中的表达研究[D];陕西师范大学;2010年
6 生书晶;何首乌芪合酶基因(FmSTS)的克隆、鉴定及转化拟南芥研究[D];华南理工大学;2010年
7 梁勇;白念珠菌高铁还原酶基因表达调控及Aft2p转录因子的功能研究[D];南开大学;2010年
8 梁东;苹果山梨醇代谢相关基因的分子特性研究[D];西北农林科技大学;2010年
9 朱彦涛;甘蓝型油菜Polima CMS和陕2A CMS的形态和生化特征及其胞质遗传物质的比较研究[D];西北农林科技大学;2010年
10 郭里;若干图论问题的DNA计算机算法研究[D];湖南大学;2009年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 高红梅;ETEC对断奶腹泻仔猪胃肠道紧密连接蛋白ZO-1的影响[D];华中农业大学;2010年
2 汪艳杰;水稻polycomb基因家族甲基化状态初步检测[D];华中农业大学;2010年
3 王伟;恶臭假单胞菌表面展示细菌漆酶及对染料的脱色性能[D];华中农业大学;2010年
4 黄辉;哈维弧菌表面抗原的克隆和真核表达[D];华中农业大学;2010年
5 段龙川;产毒素多杀性巴氏杆菌重组沙门氏菌基因工程疫苗的研究[D];华中农业大学;2010年
6 龚瑞;粘附素ClfA和Cna对金黄色葡萄球菌乳腺炎的免疫保护研究[D];华中农业大学;2010年
7 钱静;携带Apoptin双调控溶瘤腺病毒治疗肝癌的研究[D];浙江理工大学;2010年
8 辛宁;PDX-1真核表达载体构建及其在大鼠骨髓间充质干细胞中的表达[D];郑州大学;2010年
9 陆玉成;AMF基因在食管鳞癌细胞株中的表达及功能初步分析[D];郑州大学;2010年
10 吕文兵;杜氏盐藻异养转化藻株的鉴定及初步功能分析[D];郑州大学;2010年
【同被引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 代红星;张庆桥;樊宝良;;一种简捷有效的大肠杆菌感受态细胞制备方法[J];安徽农业科学;2008年29期
2 吴海燕;谢应桂;何雄斌;滕淑静;;快速准确制备大肠杆菌高效感受态细胞中有关OD_(600)值的探讨[J];湘南学院学报;2006年03期
3 王敬国;张卫国;夏林;邹德堂;;黑曲霉原生质体转化效率影响因子研究[J];东北农业大学学报;2007年04期
4 潘云华;周东霞;陈元鼎;;一种制备高效感受态细胞的方法[J];大理学院学报;2007年02期
5 温建新;李志辉;宋明慧;周顺;任慧英;刘文华;邹玲;李迎军;王金宝;;影响大肠埃希菌感受态细胞因素的探讨[J];动物医学进展;2007年05期
6 王军;张以芳;张晔;;RNAi技术的应用[J];中国畜牧兽医;2007年02期
7 廖志红;赖祥进;曹林枝;黄文君;;pUHD10-3-p53质粒的扩增及分离纯化[J];广西医科大学学报;2006年04期
8 王友如;;CaCl_2浓度对感受态细胞转化效率的影响[J];湖北师范学院学报(自然科学版);2006年03期
9 冯建成;崔贞华;罗素兰;;大肠杆菌JM109菌株高效电转化条件的研究[J];湖北大学学报(自然科学版);2008年01期
10 王杰;林俊芳;云慧芬;张凯;郭丽琼;;草菇原生质体制备、再生及转化研究[J];华南农业大学学报;2007年03期
中国博士学位论文全文数据库 前1条
1 乔枫;OsGA20ox2基因沉默降低水稻株高的研究[D];南京农业大学;2007年
【二级引证文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 康曼;;球孢白僵菌分子生物学研究进展[J];广东农业科学;2011年24期
2 李晶;;提高重组质粒转化E. coli DH5α方法的研究[J];安徽农学通报(上半月刊);2012年09期
3 冯建成;牛成;邢旭;王超;;大肠杆菌HB101感受态细胞制备条件的优化[J];热带生物学报;2010年03期
4 冯建成;长孙东亭;陈琴;罗素兰;胡远艳;;海南产桶形芋螺毒管cDNA文库构建[J];中国海洋药物;2009年03期
5 王海峰;许文涛;苏春元;黄昆仑;罗云波;谷新晰;邱芳萍;;人源弹性蛋白酶基因原核载体构建及表达[J];沈阳农业大学学报;2010年05期
6 林艳;李照熙;王芳;王天云;;一种简单的哺乳动物细胞附着体质粒CaCl_2转化方法[J];生物技术通讯;2012年04期
7 罗锋;余腾;范丽梅;;感受态细胞制备和质粒转化冰浴时间对大肠埃希菌转化效率的影响[J];江汉大学学报(自然科学版);2011年03期
8 吴行伟;刘泽源;李前;蒲韵竹;任汝通;许秀丽;刘霏霏;张琴;吴媛;曲恒燕;;质粒pBV220-PTD-tCNTF转化BL21菌株感受态细胞的高效制备方法[J];中国药理学通报;2012年04期
9 魏东;王敏;庄文超;史吉平;郝健;;克雷伯氏肺炎杆菌电击转化条件的优化[J];中国酿造;2012年04期
10 梅运军;陈向东;谢志雄;沈萍;李文化;;Ca~(2+)对诱导大肠杆菌摄取外源DNA的影响[J];武汉大学学报(理学版);2012年04期
【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前9条
1 李云峰,邵国,苏燕,李丽莉;一种简捷的质粒DNA提取及纯化方法[J];包头医学院学报;2000年02期
2 王园园;蔡仕英;姚志建;;几种制备感受态细胞及质粒转化方法的比较[J];军事医学科学院院刊;1991年02期
3 柯涛,张勇法,潘园园,马向东;温度对大肠杆菌感受态细胞的影响[J];河南农业大学学报;2003年01期
4 肖庚富,齐义鹏,李莉,易巍;一种快速简便的CaCl_2质粒转化方法[J];生物化学与生物物理进展;2000年01期
5 李路怡,易建华,李敏;大肠杆菌最佳感受态细胞制备的探讨[J];生命科学研究;1998年03期
6 贺竹梅,刘秋云;一种提取质粒DNA的改良方法[J];生物技术;1996年01期
7 王立良,王淼,陈连凤,宋国兴;冷冻复苏法高效转化大肠杆菌[J];生物技术通讯;2002年03期
8 万波,李安明,赵海,刘克鑫;一株厌氧嗜盐菌的鉴定[J];微生物学通报;1997年03期
9 胡拥军,徐链,王珮;高效感受态菌制备方法比较探索[J];细胞生物学杂志;1994年02期
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 谢翎;陈红梅;尹翀;项小燕;黄勃;;大肠杆菌DH5α菌株感受态制备及转化率变化研究[J];生物学杂志;2011年04期
2 史军;;Hello,大肠杆菌[J];科学世界;2011年08期
3 张银初;张中月;丁峰;;论大肠杆菌的防治[J];科技信息;2011年22期
4 ;你知道吗?[J];科学与文化;2011年09期
5 闫加磊;孙妍;石亮;陈慧英;;壳聚糖/纳米TiO_2复合材料及其应用[J];首都师范大学学报(自然科学版);2011年04期
6 ;赛默飞世尔科技助力欧洲新型大肠杆菌菌株研究[J];中国生物工程杂志;2011年07期
7 李晓玲;李克秀;赵洪锟;赵茂林;董英山;;可转化人工染色体(TAC)文库载体DNA的制备[J];生物技术通报;2011年09期
8 N.V.;;细菌,还是辐射?[J];新晋商;2011年08期
9 杨微;;大肠杆菌耐药性的研究进展[J];畜牧与饲料科学;2011年06期
10 ;渤海大学自主知识产权[J];渤海大学学报(自然科学版);2011年02期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 谢志雄;陈向东;李文化;庞代文;沈萍;;大肠杆菌HB101感受态细胞的显微观察与分析[A];首届中国青年学者微生物遗传学学术研讨会论文摘要集[C];2002年
2 夏耀琴;王敬生;;功能梯度材料的制备方法与研究进展[A];第三届中国功能材料及其应用学术会议论文集[C];1998年
3 金沈锐;彼得;沈映君;瞿燕;;不同制备方法对西黄丸体外抑瘤作用影响的比较研究[A];中华中医药学会中药实验药理分会第七届学术会议论文摘要汇编[C];2007年
4 童忠良;丁浩;;50t/a纳米TiO_2工业化生产的研究[A];纳米材料和技术应用进展——全国第三届纳米材料和技术应用会议论文集(上卷)[C];2003年
5 付松;刘吉平;王银杰;崔明功;;硼氢化锂的制备方法[A];中国化学会第二十五届学术年会论文摘要集(下册)[C];2006年
6 于俊林;齐鲁;;磁性纤维的研究[A];第六届功能性纺织品及纳米技术应用研讨会论文集[C];2006年
7 史春风;林民;朱斌;龙军;;快速准绿色合成钛硅分子筛[A];第五届全国环境催化与环境材料学术会议论文集[C];2007年
8 史春风;林民;朱斌;龙军;;超声辅助合成钛硅分子筛[A];第十一届全国青年催化学术会议论文集(上)[C];2007年
9 黄万旭;范军;;脱细胞真皮基质(ADM)的制备方法[A];2008年中国解剖学会第十一届教学改革研讨会论文集[C];2008年
10 高莹;张荣斌;;氧化铈制备方法对Au/CeO_2催化剂催化氧化CO反应活性的影响[A];第十八届全国稀土催化学术会议论文集[C];2011年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 记者 班玮;德研究人员:人或是大肠杆菌原始宿主[N];新华每日电讯;2011年
2 记者 张淑会;我省加强对大肠杆菌监测[N];河北日报;2011年
3 记者 李婵;人与大肠杆菌:两个世纪的孽缘[N];北京科技报;2011年
4 记者 舒适;感染大肠杆菌 法国老妇身亡[N];新华每日电讯;2011年
5 保定冀中药业有限公司 牛婵娟李印君;近期山东地区大肠杆菌药敏试验及临床诊治[N];中国畜牧兽医报;2008年
6 山东鲁抗舍里乐药业有限公司 牛志强 郑敏;禽类大肠杆菌病的综合控制[N];中国畜牧兽医报;2010年
7 山东鲁抗舍里乐药业有限公司 牛志强 郑敏;禽类大肠杆菌病的诊断[N];中国畜牧兽医报;2010年
8 见习记者 戴宜衡;“旺旺仙贝”查出大肠杆菌[N];滨海时报;2010年
9 通讯员 梁淡丽 记者 刘传书;新型超级大肠杆菌引发德国疫情[N];科技日报;2011年
10 记者 王攀;致命大肠杆菌溯源获线索[N];新华每日电讯;2011年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 李丹;尿道致病性大肠杆菌进化机制的研究及检测方法的确立[D];南开大学;2010年
2 姜中其;仔猪断奶腹泻性大肠杆菌的多重耐药性、毒力因子分布及特异性蛋黄抗体药效的研究[D];浙江大学;2009年
3 王倩;聚羟基脂肪酸酯在大肠杆菌中的合成、降解以及分子改造[D];山东大学;2009年
4 康振;大肠杆菌系统改造及琥珀酸和5-氨基乙酰丙酸合成途径的构建[D];山东大学;2011年
5 孙凤军;大肠杆菌生物膜的形成及其耐药质粒传递和调控的研究[D];第三军医大学;2009年
6 李晓敏;大肠杆菌氧胁迫适应性蛋白质组学、O-抗原研究和嗜热菌NG80-2醛脱氢酶分子生物学研究[D];南开大学;2010年
7 彭亮;聚磷酸盐激酶1在脑膜炎大肠杆菌K1株致病中的相关功能研究[D];南方医科大学;2011年
8 杨金丽;应用饲料油脂防控牛感染大肠杆菌0157:H7的研究[D];内蒙古农业大学;2010年
9 王娉;中国大肠杆菌O157:H7暴发相关菌株的遗传学和毒力分析[D];中国疾病预防控制中心;2010年
10 惠长野;大肠杆菌K1致病株外膜蛋白T毒力相关功能研究[D];南方医科大学;2010年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 栾东亮;血管内皮生长因子受体1在大肠杆菌中的表达与纯化[D];福建农林大学;2009年
2 卢晨;重组人干扰素α-2b在大肠杆菌中分泌表达[D];安徽大学;2011年
3 王参军;5'端突变人干扰素-α2b基因在大肠杆菌BL21中的高效表达[D];安徽医科大学;2010年
4 王晓强;血小板反应素1活性cDNA片段的克隆与表达[D];四川大学;2005年
5 周璇;重组人IZ-CD40L在大肠杆菌中的高效表达和生物学活性的鉴定[D];苏州大学;2005年
6 张建军;大肠杆菌F18菌毛操纵子fed基因的克隆、表达及其生物活性的初步研究[D];扬州大学;2005年
7 涂健;抗生素和内毒素诱发鸡肠源性大肠杆菌易位的实验研究[D];安徽农业大学;2005年
8 王雷;致断奶仔猪腹泻、水肿病大肠杆菌F18菌毛a、b、c因子单克隆抗体的研制及初步应用[D];扬州大学;2005年
9 许攀峰;头孢他啶对家兔产CTX-M-14型ESBLs细菌性腹膜炎的治疗作用[D];浙江大学;2005年
10 汪洋;携带IBV基因重组质粒的大肠杆菌发酵及提取工艺研究[D];四川农业大学;2005年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62791813
  • 010-62985026