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《生物技术》 2001年04期
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Bacillus licheniformis 6816碱性蛋白酶基因在E.coli中的克隆和表达

唐雪明  邵蔚蓝  沈微  王正祥  方惠英  诸葛健  
【摘要】:用PCR方法从地衣芽孢杆菌 6 816中扩增了碱性蛋白酶基因 (apr) ,扩增的 1 14kb的DNA片段插入到大肠杆菌载体pET - 2 0b中 ,构建成重组分泌型表达载体pAPR1。pAPR1中碱性蛋白酶基因在大肠杆菌宿主JM10 9(DE3)中得到表达。SDS -PAGE分析显示融合表达产物的分子量为 30kD ,同核酸序列测定所推导的值相符。表达产物占细胞总蛋白的 7 5 % ,重组菌的酶活比出发菌株提高了 3 3倍。研究发现 ,重组的碱性蛋白酶在进入大肠杆菌周质空间时存在前肽自动脱落的现象

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