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《中国生物化学与分子生物学报》 2006年08期
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重组环状胸腺五肽结构类似物Cyclo-(Cys-Arg-Lys-Asp-Val-Tyr-)的制备、鉴定和活性检测

余榕捷  高媛  林剑  谢秋玲  谭毅力  洪岸  周天鸿  
【摘要】:为了实现蛋白内含肽(Intein)介导的重组环状胸腺五肽结构类似物[cyclo-(Cys-Arg-Lys-Asp-Val-Tyr-),cTP]的高效制备,设计并合成编码6个氨基酸的cTP基因,克隆到表达载体pTWIN1,重组表达质粒pTW-cTp转化E.coliER2566构建工程菌,IPTG诱导由几丁质结合域纯化标签(chitinbindingdomain,CBD)、2个蛋白内含肽和目的多肽组成的“多元”融合蛋白(CBD-intein1-cTP-intein2-CBD)的高效表达.几丁质柱亲合层析纯化融合蛋白后,改变pH值和温度诱导intein1C端切割,硫醇MESNA诱导intein2N端切割,释放N端为Cys,C端为硫酯的重组cTP线性前体,通过非保护多肽硫酯环合法实现环肽生成.激光飞行质谱结果显示,纯化产物的分子量为764·4,与环肽的理论值相符.免疫活性检测结果显示,环肽cTP较线性多肽TP-5具有更显著的促进巨噬细胞吞噬能力的活性(P0·01)和促进B细胞抗体生成的活性(P0·01).

【参考文献】
中国期刊全文数据库 前4条
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4 沈鸿鹄,李培芳;免疫调节剂合成胸腺五肽[J];安徽医药;2001年02期
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 沈鸿鹄,李培芳;免疫调节剂合成胸腺五肽[J];安徽医药;2001年02期
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中国重要会议论文全文数据库 前1条
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中国博士学位论文全文数据库 前4条
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中国硕士学位论文全文数据库 前10条
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【同被引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
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【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前8条
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3 王勤,杨金波,胡晓愚;胸腺生成素Ⅱ活性片段TP-5增强免疫功能的剂量效应[J];兰州大学学报(自然科学版);1992年03期
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【相似文献】
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1 余榕捷;高媛;林剑;谢秋玲;谭毅力;洪岸;周天鸿;;重组环状胸腺五肽结构类似物Cyclo-(Cys-Arg-Lys-Asp-Val-Tyr-)的制备、鉴定和活性检测[J];中国生物化学与分子生物学报;2006年08期
中国硕士学位论文全文数据库 前1条
1 高媛;新型重组环状胸腺五肽结构类似物cyclo-(Cys-Arg-Lys-Asp-Val-Tyr-)的研制[D];暨南大学;2006年
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