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《中国生物化学与分子生物学报》 2003年06期
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新型Taq Man-MGB探针在结核分枝杆菌实时PCR检测中的应用

赵锦荣  白玉杰  罗明  张庆华  郭晏海  张菊1  阎小君  
【摘要】:为建立一种比现有方法敏感、准确性高、重复性好的结核分枝杆菌DNA定性定量检测方法 ,以TaqMan探针技术为基础 ,运用TaqMan MGB探针 ,实时检测临床标本中的结核分枝杆菌DNA .用来自临床标本的DNA及克隆于载体的IS6 1 1 0序列检测所建立方法的有效性 .结果显示 ,所建立方法的最低检测限度为 1个基因拷贝 反应 ,在每反应 1 0 0 ~ 1 0 8拷贝范围内 ,Ct 值同DNA量的对数呈线性关系 .同一模板不同时间或同一时间不同管内扩增 ,所得Ct 值恒定 .用该方法检测 37例结核分枝杆菌培养阳性的痰液标本 ,敏感度为 1 0 0 % ;用该方法检测 1 6例TB系列阴性参考品 ,特异性为1 0 0 % .结果表明 ,所建立的方法是用于结核分枝杆菌定性定量检测较理想的方法

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【引证文献】
中国期刊全文数据库 前6条
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3 杨艳;刘衡川;叶运莉;苏红卫;汪川;;利用正交设计优化脑膜炎奈瑟氏菌Taqman-MGB探针检测反应体系[J];现代预防医学;2008年08期
4 贺松;;荧光定量PCR检测结核分枝杆菌Meta分析[J];中国微生态学杂志;2010年12期
5 白静;陈红运;傅俊范;李桂芬;朱水芳;;实时荧光RT-PCR-步法检测南方菜豆花叶病毒[J];植物保护学报;2007年01期
6 葛建军;曹爱新;刘先宝;陈长法;;应用TaqMan-MGB探针进行松材线虫的实时荧光定量检测技术研究[J];植物病理学报;2005年S1期
中国重要会议论文全文数据库 前1条
1 葛建军;曹爱新;刘先宝;陈长法;;应用TaqMan-MGB探针进行松材线虫的实时荧光定量检测技术研究[A];中国植物病理学会2005年学术年会暨植物病理学报创刊50周年纪念会论文集[C];2005年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
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2 张秀娥;荧光定量PCR检测兔出血症病毒的研究及初步应用[D];山东农业大学;2006年
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【同被引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
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4 王雷,夏咸柱,卫广森,扈荣良,刘维全,邹啸环,黄耕;犬腺病毒、犬细小病毒联合PCR方法的建立与应用[J];病毒学报;2003年03期
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8 邬小薇;3种方法检测结核分枝杆菌的比较[J];重庆医学;2005年10期
9 宗卉,曾少灵,林庆燕,温燕辉;饲料中马、驴源性成分的分子生物学检测技术[J];中国草食动物;2005年05期
10 邹运明;邹丽红;任艳红;李一经;;单核增生性李斯特杆菌感染和李氏溶血素[J];东北农业大学学报;2006年01期
中国硕士学位论文全文数据库 前3条
1 石晓路;沙门氏菌荧光PCR快速检测方法的建立与应用[D];华中农业大学;2003年
2 杨洋;PCR技术检测测乳品中金黄色葡萄球菌研究[D];河北农业大学;2005年
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【二级引证文献】
中国期刊全文数据库 前10条
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6 邝良德;朱晓霞;谢晓红;易军;雷岷;任永军;郭志强;李丛艳;郑洁;;沙门氏菌快速检测技术概述[J];湖北农业科学;2011年02期
7 李佳;彭德良;黄文坤;;香蕉穿孔线虫28S rRNA基因的D2/D3区序列分析[J];华中农业大学学报;2008年05期
8 吴霞;张桂芬;万方浩;;基于TaqMan实时荧光定量PCR技术的西花蓟马快速检测[J];应用昆虫学报;2011年03期
9 郭庆;王忠跃;孔繁芳;武艳霞;;实时荧光定量PCR在植物害虫研究中的应用[J];江西植保;2011年02期
10 徐亚丽;胡荣盛;王巧燕;朱振坤;;痰标本高压灭菌对结核杆菌抗酸染色及核酸检测的影响研究[J];现代实用医学;2012年06期
中国重要会议论文全文数据库 前2条
1 彭彦昆;张雷蕾;;光谱技术在生鲜肉品质安全快速检测的研究进展[A];中国机械工程学会包装与食品工程分会2010年学术年会论文集[C];2010年
2 袁金钱;张子群;路义鑫;韩彩霞;宋铭忻;;实时荧光PCR检测旋毛虫方法的建立与初步应用[A];第二届全国人畜共患病学术研讨会论文集[C];2008年
中国博士学位论文全文数据库 前5条
1 吴永魁;仔猪冷应激反应中激素、HSP70及其mRNA的动态分析[D];吉林大学;2006年
2 于秀梅;条锈菌诱导的小麦抑制差减杂交文库构建(SSH)及其表达序列标签(ESTs)研究[D];西北农林科技大学;2006年
3 李星;小麦抗叶锈病基因Lr41差异表达研究[D];河北农业大学;2008年
4 迟文娟;东北小麦白粉病菌群体遗传结构与分子检测技术研究[D];沈阳农业大学;2009年
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中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 杨志艺;镉处理对花生品质、生理机制和金属硫蛋白Ⅱ型基因表达的影响[D];中国海洋大学;2010年
2 刘先宝;马铃薯腐烂茎线虫的鉴定及分子检测[D];华南热带农业大学;2006年
3 郁红;二花脸和皮特兰两品种仔猪心脏和肾脏的运输应激性损伤与Hsp70相关性研究[D];南京农业大学;2007年
4 龙瑞敏;松材线虫移行的研究和灰葡萄孢菌液中活性物质的提取及其对松材线虫的诱引[D];厦门大学;2007年
5 王淑娟;小麦叶绿体信号识别颗粒54和G蛋白的全长cDNA克隆及生物信息学分析[D];西北农林科技大学;2008年
6 李佳;香蕉穿孔线虫(Radopholus similis)rRNA基因的部分序列特征研究[D];中国农业科学院;2008年
7 杨柳;热应激对鼠精液品质的影响及其与HSP70相关性分析[D];吉林大学;2009年
8 张曼;牛乳中金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、产气荚膜梭菌多重PCR检测方法的建立及应用[D];西北农林科技大学;2010年
9 马慧霞;江苏省核盘菌(Sclerotinia sclerotiorum)的抗药性监测及对菌核病的防治研究[D];南京农业大学;2009年
10 鞠静;利用荧光定量PCR技术分析捕食性天敌对大豆蚜的控害作用[D];东北农业大学;2010年
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1 戴佩佩;裘晓乐;;三种检测方法对活动性结核病的临床诊断价值[J];中国卫生检验杂志;2011年07期
2 罗丹;向延根;潘建华;彭雪峰;邓为之;石国民;;反向斑点杂交技术检测结核分枝杆菌3种耐药相关基因[J];吉林大学学报(医学版);2011年04期
3 郭颖;许钦龙;;110株结核分枝杆菌二线药敏结果分析[J];临床肺科杂志;2011年08期
4 况宇;万腊根;程小平;胡庆红;易诚予;;荧光定量聚合酶链反应在颈部、胸壁脓肿穿刺液中诊断结核的应用[J];实验与检验医学;2011年04期
5 汪圣强;王柯;裴豪;;主动外排系统与结核分枝杆菌耐药[J];中国医学工程;2011年07期
6 王海全;;64例尘肺结核痰结核分枝杆菌培养药敏结果分析[J];中国医药指南;2011年21期
7 董海燕;张建中;万康林;;结核分枝杆菌毒力相关因子研究进展[J];医学研究杂志;2011年06期
8 黄志强;张日东;吴智龙;陈世浩;;新型改良罗氏培养基与罗氏酸基检测结核分枝杆菌比较[J];广东医学;2011年09期
9 吕中全;张明新;张慧;;荧光定量聚合酶链反应检测结核分枝杆菌的价值[J];新乡医学院学报;2011年04期
10 陈士东;;296例结核性脑膜炎临床分析[J];医学理论与实践;2011年13期
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1 吴园;钟敏;王易伟;钟静;胡频频;毛旭虎;;Rv0341用于诊断依赖利福平结核分枝杆菌结核病的研究概况[A];中国防痨协会临床委员会、中国防痨协会基础委员会学术研讨会论文集[C];2008年
2 戴广明;曹以诚;杜正平;陈洵;黄曙海;逄宇;周杨;黄海荣;赵雁林;;结核分枝杆菌环介导恒温扩增(LAMP)快速检测方法的构建[A];中华医学会结核病学分会2010年学术年会论文汇编[C];2010年
3 许优;孙惠平;张增贤;刘莉娜;;关于结核分枝杆菌定量方法的研究[A];中华医学会结核病学分会2006年学术会议论文汇编[C];2006年
4 刘毅;李卫民;田苗;孙照刚;李传友;周辉;张治国;高铁杰;高峰;;快速筛选定义北京基因型结核分枝杆菌的新方法[A];2007年中国防痨协会全国学术会议论文集[C];2007年
5 张月新;辛毅;马郁芳;;结核分枝杆菌RmlB的表达、纯化及酶促反应动力学研究[A];2008年全国糖生物学学术会议论文摘要[C];2008年
6 刘焰;刘胜武;谈蓉;马立新;刘君炎;;结核分枝杆菌Ag85B与ESAT-6双顺反子重组腺表达载体的构建[A];第六届全国免疫学学术大会论文集[C];2008年
7 张旭霞;张海青;李传友;田苗;赵冰;李卫民;张健源;印云青;焦扬;端木宏谨;;结核分枝杆菌黏附素HBHA防治结核病的动物实验研究[A];2005年中国防痨协会全国学术会议论文集[C];2005年
8 陈曦;张宗德;刘忠泉;贾红彦;邢爱英;古书香;;结核分枝杆菌rv3873、rv3879c基因原核表达载体的构建和表达[A];中华医学会结核病学分会2006年学术会议论文汇编[C];2006年
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10 陈涛;周琳;周杰;江勇;周志刚;彭建明;文力;彭东东;何超文;钟球;;环介导等温扩增法快速检测结核分枝杆菌的方法建立与临床应用评估[A];中华医学会结核病学分会2011年学术会议论文汇编[C];2011年
中国重要报纸全文数据库 前10条
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2 胡德荣;我学者改进“聚合酶链式反应”技术[N];中国医药报;2006年
3 庄愉;新型抗结核疫苗的开发研究[N];中国医药报;2002年
4 记者贾晓惠 实习生 庞亚斌;PCR技术可快速准确诊断非典“窗口期”[N];科技日报;2003年
5 记者 陈青;让结核菌三天内原形毕露[N];文汇报;2009年
6 吴志军薜荃 郝成涛;军事医学科学院研制成功蓝舌病病毒检测试剂盒[N];中国医药报;2008年
7 钱忠军;华中农大发现新基因有望控制结核病[N];江苏科技报;2009年
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9 记者 黄每裕;珠海推出两种检测试剂新产品[N];中国医药报;2009年
10 黄显斌 唐明山;谨防“非典”卷土重来[N];科技日报;2003年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 董海燕;中国13省市结核分枝杆菌基因多态性分析[D];中国疾病预防控制中心;2011年
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4 陈军;武汉地区结核分枝杆菌药物敏感性及氟喹诺酮耐药分子机制的研究[D];华中科技大学;2011年
5 陈军;武汉地区结核分枝杆菌药物敏感性及氟喹诺酮耐药分子机制研究[D];华中科技大学;2011年
6 乐军;耐药结核分枝杆菌的多维分析[D];复旦大学;2003年
7 范雄林;结核分枝杆菌基因疫苗的构建及其免疫学特性的初步研究[D];第四军医大学;2001年
8 宋文刚;茜草素抗结核分枝杆菌作用机制的蛋白质组学研究[D];吉林大学;2007年
9 赵明才;结核分枝杆菌喹诺酮耐药基因功能研究[D];四川大学;2005年
10 王甦民;1.结构分枝杆菌毒力相关基因的研究 2.结构分枝杆菌DNA指纹技术及其应用研究[D];北京市结核病胸部肿瘤研究所;2001年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 徐亚军;分子信标荧光定量PCR快速检测结核分枝杆菌技术及产品的开发[D];四川大学;2007年
2 卢洪华;聚合酶链反应—单链构象多态性技术鉴别结核分支杆菌链霉素耐药基因[D];吉林大学;2005年
3 宋薇薇;聚合酶链反应—单链构象多态性技术快速检测耐多药结核分枝杆菌突变基因[D];吉林大学;2005年
4 蔡溢;结核分枝杆菌RmlA的表达、纯化以及酶促反应动力学研究[D];大连医科大学;2006年
5 孙文霞;结核分枝杆菌抗原模拟肽纳米金生物传感器诊断结核病的研究[D];湖南师范大学;2011年
6 王霞芳;IFN-γ增强BALB/c小鼠对结核分枝杆菌感染的抵抗力[D];苏州大学;2002年
7 曹立雪;应用膜芯片检测结核分枝杆菌rpoB基因突变[D];中国人民解放军军事医学科学院;2003年
8 韩喜琴;噬菌体生物扩增法检测结核分枝杆菌药物敏感性研究及评价[D];北京市结核病胸部肿瘤研究所;2004年
9 王琳;结核分枝杆菌ClpX和ClpP2蛋白酶的克隆表达及其性质研究[D];西南大学;2010年
10 丁卫民;耐多药肺结核与结核分枝杆菌L型感染的临床研究[D];山西医科大学;2003年
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