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《中国生物工程杂志》 2008年07期
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逆转录病毒介导的siRNA对宫颈癌细胞CXCR4表达的抑制及对侵袭能力的影响

康楷  朱元方  董晓静  胡丽娜  
【摘要】:目的:观察逆转录病毒介导RNA干扰抑制宫颈癌Caski细胞CXCR4基因表达的效率。方法:人工合成CXCR4特异性小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)片段,装入带有绿色荧光蛋白(GFP)的逆转录病毒载体pSOS,先转染PT67细胞包装成病毒,收获病毒上清,再将其转染Caski细胞,采用实时定量PCR和Western blotting观察CXCR4表达受抑的情况,并通过Transwells小室检测对肿瘤细胞侵袭能力的影响。结果:成功构建pSOS-CXCR4载体,并发现在24h,48h和72h,CXCR4mRNA的抑制率分别为29.9%,56.8%和62.8%,CXCR4蛋白的抑制率分别为43.6%,49.6%和62.9%。pSOS-CXCR4对Caski细胞的侵袭能力的抑制率为57.91%。结论:逆转录病毒介导RNA干扰能有效抑制宫颈癌细胞CXCR4表达并能降低癌细胞的侵润能力。

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