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《生物医学工程学杂志》 2010年03期
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新型三维多肽自组装凝胶诱导神经干细胞实验研究

宋玉林  郑启新  郭晓东  
【摘要】:两亲性多肽与含神经干细胞(Neural stem cells,NSCs)的DMEM/F12混合,自组装为三维多孔细胞凝胶复合体,研究细胞在凝胶表面及内部的分化情况。取乳鼠大脑皮质,机械分离无血清培养法获取神经干细胞。1wt%多肽加入等体积密度为1×105/mlNSCs的DMEM/F12液,形成三维细胞凝胶复合体,细胞分布于凝胶内部(exper-imentgroup,EG);1wt%多肽与等体积DMEM/F12液混合,自组装为二维凝胶薄膜,1×105/mlNSCs接种于薄膜表面(control group,CG);无血清培养2周,免疫细胞化学法鉴定。透射电子显微镜(TEM)示凝胶由纳米纤维构成,纤维直径有3~5nm,长度为100~1500nm。获取细胞为Nestin阳性神经干细胞,纯度可达50%以上。激光扫描共聚焦显微镜(LSCM)观察:细胞在凝胶内部接种2d,存活达90%以上;1周后分化为NF及GFAP阳性细胞,分化率分别为50%±4.2%及20%±2.8%;细胞在凝胶表面1周后亦分化为NF阳性细胞及GFAP阳性细胞,分化率分别为40%±3.4%及31%±2.3%。肽基三维凝胶为细胞生存提供三维支撑,诱导细胞主要向神经元方向分化。表明肽自组装凝胶可作为新型神经组织工程支架材料。

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