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《现代生物医学进展》 2011年12期
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通过G418处理离体纯化小鼠胰腺上皮细胞

李丹  冯锐成  张丽新  郭方琪  梁洋  滕春波  
【摘要】:目的:探索一种能有效去除成纤维细胞,筛选有较强增殖能力上皮细胞的方法。方法:本研究利用成纤维细胞对G418敏感的特性,在成体小鼠胰腺细胞分离后,采用悬浮细胞直接接种到含30μg/mL G418的培养基中,或细胞贴壁生长汇合至50-70%后用30至100μg/mL之间不同浓度G418处理24h、48h或72h两种方案进行上皮细胞的纯化。结果:在直接接种法培养处理中,存活的大部分细胞为成纤维细胞,上皮细胞的生长受到抑制,无法得到纯化的胰腺上皮集落;而在细胞贴壁生长汇合至50-70%后经G418处理,成纤维细胞随着处理浓度的增加死亡率也在逐渐上升,其中50μg/mL G418处理72小时对去除成纤维细胞效果最佳。结论:G418处理能够有效去除成纤维细胞,分离纯化出一群在离体条件下具有强增殖能力、形成大上皮细胞集落的细胞。该分离纯化方法为今后进一步研究成体胰腺干/祖细胞增殖与分化调控机制等问题奠定基础。

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【参考文献】
中国期刊全文数据库 前1条
1 张丽新;滕春波;安铁洙;;利用成体干细胞治疗糖尿病[J];生物工程学报;2008年02期
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 李晓云;贾杏林;石德时;毕丁仁;;兔附红细胞体的体外培养[J];长江大学学报(自然科学版)农学卷;2010年03期
2 刘建熙;张鹏远;张玉杰;邓巍;;人脑胶质瘤细胞两种分离方法的对比研究[J];中国实用神经疾病杂志;2010年24期
3 师冰洋;张淑香;郭美锦;王永红;张嗣良;史小林;;小鼠睾丸支持细胞体外培养特性[J];生物工程学报;2009年05期
4 徐世平;毛学英;任发政;;大鼠前脂肪细胞的培养及酪蛋白糖巨肽对其增殖的影响[J];食品科学;2009年13期
5 马彦军;林家冲;杨絮;张勇刚;;大鼠胸主动脉外膜成纤维细胞的培养方法初探[J];汕头大学医学院学报;2011年01期
6 郭桥;肖艳玲;左毅;许国杰;鲁文艳;张岩;崔颖杰;;可溶性噻唑盐WST-8用于重组人白细胞介素-2的生物学活性测定[J];微生物学免疫学进展;2005年04期
7 李静;孙莉萍;叶社房;张建锋;李辉;王秀燕;关嫚;张其清;;组织工程真皮替代物的构建及在创伤修复中的作用[J];厦门大学学报(自然科学版);2008年03期
8 吴媛媛;李键;杨栎;毕琳;田甜;;牦牛乳腺上皮细胞的体外培养的研究[J];西南民族大学学报(自然科学版);2009年04期
9 李雪平;邓国华;田国斌;陈化兰;;H9亚型禽流感病毒SD96株HA蛋白特异性单抗的制备及鉴定[J];中国预防兽医学报;2008年02期
10 葛叶;邓国华;李雪平;陈化兰;;流感病毒聚合酶PB1-1蛋白的表达与单克隆抗体的制备[J];中国预防兽医学报;2009年09期
中国博士学位论文全文数据库 前3条
1 廉喜红;苦皮藤杀虫活性成分对粘虫肌细胞钙通道的作用机理研究[D];西北农林科技大学;2009年
2 张晶樱;2E8-NCTD-脂质体体外靶向B系白血病干细胞及机制研究[D];浙江大学;2010年
3 刘元花;杂交骨髓瘤细胞培养模型化研究[D];上海交通大学;2008年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 田静;蜂王浆中10-HDA对新生大鼠海马神经细胞增殖作用的研究[D];武汉工业学院;2010年
2 靳木子;牛胚胎干细胞技术研究[D];内蒙古大学;2010年
3 佟晓丽;重组人心肌肌钙蛋白I单克隆抗体的制备及鉴定[D];中国协和医科大学;2009年
4 白亮;大鼠胰腺腺泡细胞TAP与HMGB1表达的相关性[D];遵义医学院;2010年
5 谭雯雯;猪β-防御素2多克隆和单克隆抗体的制备及初步应用[D];华中农业大学;2010年
6 李静;组织工程真皮替代物的实验研究[D];厦门大学;2007年
7 王秀燕;皮肤组织工程种子细胞与支架材料的生物学研究[D];厦门大学;2008年
8 刘辉;犬细小病毒单克隆抗体的制备及临床初步应用[D];吉林大学;2009年
9 邢蕾;新生猪肌组织成纤维细胞系和耳部皮肤成纤维细胞系的建立[D];华中农业大学;2007年
10 赵昕;A23187诱导蓝狐精子顶体反应的研究[D];东北林业大学;2008年
【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前1条
1 李艳华,白慈贤,谢超,陈琳,裴雪涛;成人骨髓间充质干细胞体外定向诱导分化为胰岛样细胞团的研究[J];自然科学进展;2003年06期
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 本刊编辑部;;更正[J];眼科研究;2010年02期
2 孙燕;张爱琴;马胜林;包素珍;冯建国;;中肺合剂对放射性肺损伤大鼠血液中TGF-β1 IL-6及IL-1的影响[J];中华中医药学刊;2010年03期
3 王登妮;徐军全;宋维芳;张晓阳;王明亮;梁永刚;;黄芪对肝纤维化的防治作用[J];中国医药导报;2010年09期
4 陈江;陈玉满;夏勇;章荣华;蔡德雷;郑云燕;严峻;;大鼠肝纤维化复合模型的建立及动态观察[J];中国卫生检验杂志;2010年03期
5 潘际刚;刘新宇;周华;陈丽;郑煜;;硫化氢对人胚肺成纤维细胞缺氧后增殖活力及细胞凋亡的影响[J];中国药理学通报;2010年03期
6 郑翔;李瑛;孙运花;丁艳;毕文杰;周雪;;大鼠睫状神经营养因子siRNA的设计及其有效性验证的体外实验方法[J];江苏大学学报(医学版);2010年01期
7 廖前德;严安;钟达;尹科;周星;翁晓军;卢吉平;;犬骨髓间充质干细胞的培养及生物学特性[J];中国现代医学杂志;2010年02期
8 赵瑛;蔡绍皙;;鼠骨髓间充质干细胞的分离培养及定向诱导分化为内皮样细胞[J];中国应用生理学杂志;2010年01期
9 具星爱;郭子宽;靳继德;李占全;;凝血酶活化的富血小板血浆促进人骨髓间充质干细胞增殖[J];组织工程与重建外科杂志;2010年01期
10 马琴;牛凡;;血浆纤维蛋白原与冠状动脉粥样硬化性心脏病[J];中国实用医药;2010年04期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 董家龙;李菊香;丁浩;洪葵;吴清华;程晓曙;;Rho相关激酶Rock在缺血缺氧致心肌细胞凋亡过程中的表达及其作用机制研究[A];第12届中国南方国际心血管病学术会议专刊[C];2010年
2 戴德哉;成于思;彭洪军;戴茵;丛晓东;张云;;诱导恶性心律失常的机制和大精酸的调控作用[A];第12届中国南方国际心血管病学术会议专刊[C];2010年
3 程树军;焦红;秦瑶;;体外重建化妆品试验用皮肤替代模型AltSkin~(TM)[A];第八届中国化妆品学术研讨会论文集[C];2010年
4 宋娜;谢万华;周炎;黄永业;逄大欣;欧阳红生;赖良学;;CD163基因缺失猪成纤维细胞系的构建[A];全国动物生理生化第十一次学术交流会论文摘要汇编[C];2010年
5 张巍;孙晨;孙秀萍;苏高莉;贺文琦;赵魁;陈克研;宋德光;;仔猪口腔粘膜上皮细胞的体外培养[A];中国畜牧兽医学会动物解剖学及组织胚胎学分会第十六次学术研讨会论文集[C];2010年
6 翟晓翔;丁继存;陈向辉;李进果;张翠侠;;五倍子瘢痕膏水溶液对瘢痕疙瘩成纤维细胞Ⅰ、Ⅲ前胶原基因表达的影响[A];2010全国中西医结合皮肤性病学术会议论文汇编[C];2010年
7 刘平;王琼玉;王永贤;;他扎罗汀和全反式维A酸对热休克后的成纤维细胞表达金属基质蛋白酶及其抑制剂的研究[A];2010全国中西医结合皮肤性病学术会议论文汇编[C];2010年
8 胡刚;冯捷;金岩;;人循环成纤维细胞参与皮肤创伤修复的作用[A];2010全国中西医结合皮肤性病学术会议论文汇编[C];2010年
9 彭清华;姚小磊;林坤岳;吴权龙;曾志成;;应用抗青光眼术后滤过道瘢痕化的中药筛选体系对青光安中药组分库进行筛选[A];第九届全国中西医结合眼科学术交流会暨第八次东北亚国际眼科学术会论文汇编[C];2010年
10 翟晓翔;丁继存;陈向辉;李进果;张翠侠;;五倍子瘢痕膏水溶液对瘢痕疙瘩成纤维细胞 Ⅰ、Ⅲ前胶原基因表达的影响[A];中华中医药学会皮肤科分会第七次学术年会、2010年重庆四川中西医结合皮肤性病学术年会、全国中西医结合诊疗皮肤性病新进展新技术学习班论文汇编[C];2010年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 刘霞;美成功将成纤维细胞直接变为心肌细胞[N];科技日报;2010年
2 风痕;谁是真的“傲洛斯”?![N];大众科技报;2008年
3 中国医科院整形外科医院 王连召;瘢痕疙瘩不能一切了之[N];健康报;2008年
4 江照军张行勇;人造皮肤:皮肤损伤者的曙光[N];科学时报;2008年
5 冯卫东;美将成熟B细胞重组成干细胞状态[N];科技日报;2008年
6 陈丹;人类的断肢能“无”中生“有”吗[N];科技日报;2008年
7 冉新泽;成体干细胞促进难愈创伤修复研究取得新进展[N];中国医药报;2008年
8 许琦敏;撒点“玻璃片”创面愈合快[N];文汇报;2008年
9 柳志卿;我国实验成功世界首例体细胞克隆兔[N];中国矿业报;2007年
10 湖南中医药大学第一附属医院国家中医肝病防治中心;肝纤维化指标不正常意味着什么[N];大众卫生报;2007年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 李春明;色素上皮衍生因子在皮肤中的表达及功能研究[D];浙江大学;2011年
2 胡信雷;表皮细胞的生物反应器培养及其创面递呈[D];浙江大学;2011年
3 董智勇;以毛囊干细胞作为种子细胞构建组织工程表皮的研究[D];吉林大学;2010年
4 马静;RNA干扰抑制survivin基因表达诱导瘢痕疙瘩成纤维细胞凋亡的实验研究[D];昆明医学院;2010年
5 袁瑞红;IGF、VEGF、Decorin和Versican在病理性瘢痕中的表达及意义[D];昆明医学院;2010年
6 季健;血管外膜激活促进移植性血管病新内膜形成及发展的实验研究[D];山东大学;2010年
7 宗宪磊;KGF和TGF-β1噬菌体模拟肽改善创面愈合质量的实验研究[D];山东大学;2010年
8 刘羿羿;山羊类胚胎干细胞和PGCs的培养与鉴定[D];内蒙古农业大学;2010年
9 张浩;胃癌相关成纤维细胞源生长因子和趋化因子的高通量筛选和验证[D];第二军医大学;2010年
10 覃健;GAM材料促进自体前交叉韧带移植物愈合的体内外研究[D];第二军医大学;2010年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 王琪海;10600nmCO_2点阵激光对豚鼠光老化皮肤治疗作用的初步研究[D];广西医科大学;2011年
2 韩喜莉;血管紧张素Ⅱ对创伤愈合中成纤维细胞增殖的研究[D];山西医科大学;2011年
3 李赵锋;几丁糖加速组织扩张的临床应用与研究[D];山西医科大学;2011年
4 伍杰;雌激素拮抗剂对兔耳瘢痕模型作用的实验研究[D];泸州医学院;2011年
5 梁兴宇;胶原涂层的壳聚糖钛复合种植体的制备以及其细胞相容性的研究[D];山西医科大学;2011年
6 张显娟;TGF-β1、MMP-2和TIMP-2在煤工尘肺病中的表达及意义[D];山西医科大学;2011年
7 刘擂;骨髓间充质干细胞对A549肺腺癌细胞损伤修复作用的研究[D];山西医科大学;2011年
8 李欣欣;H.pylori对人牙周膜成纤维细胞形态学及表达TNF-α的研究[D];山西医科大学;2011年
9 高恒清;硝苦汤促进兔背部人粪污染创面愈合及其预防创面过度瘢痕化的实验研究[D];泸州医学院;2011年
10 高蔡玖;明胶—透明质酸复合纳米纤维组织工程支架的构建及其生物学评价[D];东华大学;2010年
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