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《水生生物学报》 2010年01期
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草鱼血清IgM蛋白的纯化及抗血清的制备

丁炜东  曹丽萍  曹哲明  
【摘要】:采用盐析法、重组蛋白A(HiTrapr Protein A Sepharose)亲和层析法分离纯化草鱼血清中的IgM,并通过SDS-PAGE及Western-blot技术对纯化蛋白的部分特性进行分析比较并制备兔抗IgM抗血清。结果表明:33%硫酸铵溶液可以沉淀血清中大部分蛋白,但电泳条带仍较多,其中含有78kD和28kD的条带,因此仅可作为免疫球蛋白粗提的方法;而rProtein A亲和层析法所提蛋白则仅有上述重链(78kD)和轻链(28kD)。Western-blot显示,鼠抗人Ig抗体可与78kD及28kD条带发生发应。rProtein A亲和法提纯蛋白的纯度较高,但含量较低,条带较淡,仅可作为实验室小量提纯草鱼IgM的有效方法。将提纯的蛋白免疫实验兔后可制得效价高达1:25600的兔抗鱼IgM血清,并测得血清蛋白总量和IgM含量分别为25.87mg和4.5mg,IgM占血清蛋白总量的17.39%。本实验所采用的蛋白A亲和层析法提取草鱼血清IgM可以方便、快捷地获得高纯度的产物,适合在实验室中纯化鱼类IgM。同时本研究所制备的兔抗草鱼IgM血清也为今后的相关研究工作打下基础。

【引证文献】
中国期刊全文数据库 前5条
1 郑磊;马振宁;吴斌;樊海平;唐凤翔;郭养浩;;美洲黑石斑鱼血清IgM纯化及其兔抗血清部分特性[J];上海海洋大学学报;2011年04期
2 欧铜;雷晓颖;张奇亚;;不同水生脊椎动物的血清与黏液蛋白图谱分析[J];水生生物学报;2012年01期
3 陈丛琳;罗绍祥;张晓华;戴和平;;草鱼免疫球蛋白IgM四聚体的分析鉴定[J];水生生物学报;2012年01期
4 张小萍;魏静;邱艳;;南方鲇免疫球蛋白单克隆抗体的制备及特性[J];水生生物学报;2012年03期
5 邱艳;张小萍;魏静;梁筱燕;;优球蛋白法纯化南方鮎血清免疫球蛋白及多克隆抗体制备[J];西南大学学报(自然科学版);2011年10期
中国硕士学位论文全文数据库 前3条
1 金晶;牦牛血IgG分离纯化工艺研究[D];甘肃农业大学;2010年
2 苏岭;三种中药复方对鲤鱼生长及免疫性能影响的研究[D];上海海洋大学;2011年
3 唐秀;重组金黄色葡萄球菌蛋白A的制备性质研究与应用[D];华东理工大学;2012年
【参考文献】
中国期刊全文数据库 前4条
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3 江育林;李燕;于平;;草鱼免疫应答的初步研究[J];水生生物学报;1991年04期
4 鄢庆枇;韩一凡;高天翔;庄峙厦;王小如;;大黄鱼血清IgM纯化及其兔抗血清的制备[J];中国水产科学;2006年03期
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 李亚南;嗜水产气单胞菌诱导的草鱼免疫球蛋白分析[J];动物学报;2001年02期
2 张福淼,杨桂文,李国田,曹善东,安利国;鲈血清免疫球蛋白分离纯化及部分特性分析[J];动物学杂志;2004年05期
3 张静;安利国;张福淼;谢萍;杨桂文;;黄鳝血清、肠黏液免疫球蛋白的分离纯化及部分特性分析[J];水产科学;2007年03期
4 张立颖;赵萌;;鱼类免疫球蛋白的研究进展[J];水产科学;2009年11期
5 吴光辉;王庆;巩华;石存斌;李华;吴淑勤;;用Protein A亲和层析法快速分离纯化鲫血清IgM方法的建立和应用[J];大连海洋大学学报;2010年03期
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7 王希龙;龚晖;杨金先;林天龙;;优球蛋白法纯化欧鳗免疫球蛋白[J];福建农业学报;2009年03期
8 黄婷;张彬;陈明;陈福艳;雷爱莹;余晓丽;杨传萍;梁万文;;罗非鱼和斑点叉尾鮰血清IgM的纯化及兔抗血清的制备[J];广西农业科学;2010年12期
9 吕爱军;胡秀彩;张艳华;程超;朱爱华;;鱼类中新发现的免疫球蛋白[J];水产科学;2011年07期
10 王希龙;龚晖;林能锋;王凡;刘晓东;林天龙;;多抗技术对多种鱼类血清免疫球蛋白的研究[J];福建农业学报;2011年06期
中国重要会议论文全文数据库 前1条
1 张铃铃;任燕;石存斌;吴淑勤;;定量PCR检测不同温度下免疫后剑尾鱼IgM的表达[A];第九届中国实验动物科学年会(2010新疆)论文集[C];2010年
中国博士学位论文全文数据库 前9条
1 宋增福;丁酸梭菌C_2菌株对鮸鱼肠道微生态调控作用与机理研究[D];浙江大学;2006年
2 钱国英;极端超微细菌蛋白多糖对动物免疫功能调节的研究[D];浙江大学;2006年
3 毛芝娟;副溶血弧菌Vibrio parahaemolyticus主要外膜蛋白的克隆、表达和免疫原性研究[D];浙江大学;2007年
4 贾伟章;乌鳢免疫相关基因的克隆鉴定与特征分析[D];中国科学院研究生院(水生生物研究所);2007年
5 吕爱军;三种养殖鱼类抗病毒免疫的初步研究[D];中国科学院研究生院(水生生物研究所);2007年
6 田敬云;鳜B淋巴细胞的发生和T淋巴细胞受体基因的克隆[D];中国科学院研究生院(水生生物研究所);2007年
7 岳礼溪;解脂耶罗威亚酵母菌表面展示质粒的构建及应用的初步研究[D];中国海洋大学;2009年
8 李风铃;鱼类适应性免疫系统的早期发生以及Ikaros基因的克隆和表达[D];中国海洋大学;2009年
9 马璀艳;TNP-LPS和TNP-KLH诱导的虹鳟(Oncorhynchus mykiss)抗体分泌细胞的分化研究[D];中国海洋大学;2011年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 石建华;七种鲤科鱼免疫球蛋白免疫原性的比较[D];南京农业大学;2001年
2 黄素文;七种常见养殖鱼α_2巨球蛋白的比较[D];南京农业大学;2002年
3 王欣欣;草鱼免疫球蛋白重链基因的克隆[D];中国科学院研究生院(水生生物研究所);2006年
4 林娟娟;欧洲鳗鲡粘膜免疫球蛋白的纯化及其结构分析[D];福建农林大学;2006年
5 徐镇;大黄鱼粘液抗体及抗体分泌细胞的研究[D];华中农业大学;2006年
6 王振辉;山羊抗新城疫病毒抗体的提纯及免疫效果的研究[D];吉林大学;2006年
7 张俊杰;大黄鱼抗溶藻弧菌感染免疫及抗菌肽的纯化和鉴定研究[D];集美大学;2007年
8 谢芳靖;大黄鱼抗病功能基因的克隆与分析[D];集美大学;2007年
9 刘振兴;黄鳍棘鲷rIL-1β生物学活性检测及血清IgM的纯化[D];华中农业大学;2007年
10 魏鉴腾;溶藻胶弧菌rpoS基因突变菌株的构建及其特性研究[D];中国海洋大学;2008年
【同被引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 陈松林,邓文涛,刘宪亭,陈细华,龙华;草鱼垂体生长激素分离纯化及其抗体制备的研究[J];动物学报;1995年03期
2 李亚南;嗜水产气单胞菌诱导的草鱼免疫球蛋白分析[J];动物学报;2001年02期
3 张福淼,杨桂文,李国田,曹善东,安利国;鲈血清免疫球蛋白分离纯化及部分特性分析[J];动物学杂志;2004年05期
4 程顺峰;;牙鲆淋巴囊肿病毒双抗体夹心ELISA检测方法的建立[J];水产科学;2009年07期
5 陆仲磷;中国的牦牛资源[J];中国草食动物;1999年02期
6 张清玉;口服免疫球蛋白治疗小儿病毒性肠炎60例疗效观察[J];第二军医大学学报;2004年11期
7 简纪常,吴灶和;中草药对建鲤非特异性免疫功能的影响[J];大连水产学院学报;2002年02期
8 朱宏友;王广军;余德光;谢骏;;水温骤降后凡纳滨对虾血清中NO、NOS水平及对副溶血弧菌的敏感性[J];大连水产学院学报;2006年01期
9 吴垠,张峰,桂远明,江仁党;几种养殖鱼类越冬生理生化指标的变化Ⅲ──血清蛋白组分[J];大连水产学院学报;1995年04期
10 白丽,钱金栿,王晶;应用辛酸硫酸胺法提取小鼠腹水和血清中的IgG抗体[J];大理医学院学报;2000年04期
中国博士学位论文全文数据库 前1条
1 谢小军;南方鮎的能量收支的研究[D];北京师范大学;1989年
【二级引证文献】
中国期刊全文数据库 前1条
1 郑磊;郭养浩;马振宁;樊海平;吴斌;唐凤翔;;副溶血弧菌融合蛋白FlaA-OmpK疫苗的制备及免疫保护作用[J];中国水产科学;2012年05期
【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 李亚南;嗜水产气单胞菌诱导的草鱼免疫球蛋白分析[J];动物学报;2001年02期
2 陈怀青,陆承平;从比较免疫学看鱼类的免疫特性[J];动物学杂志;1994年04期
3 曲凌云,孙修勤,战文斌,张进兴;牙鲆抗淋巴囊肿病毒免疫球蛋白的纯化[J];高技术通讯;2000年09期
4 王先磊,张培军,李军,徐永立;牙鲆血清中免疫球蛋白M的分离及其测定[J];海洋科学;2004年04期
5 侯亚义,韩晓冬;温度和类固醇激素对虹鳟免疫球蛋白M(IgM)的影响[J];南京大学学报(自然科学版);2001年05期
6 冯娟,胡超群;四种海水养殖鱼类血清免疫球蛋白的分离纯化及分子量测定[J];热带海洋学报;2002年04期
7 林天龙,陈强,俞伏松,杨金先,龚晖,林能锋,许斌福,伊光辉;欧洲鳗血清免疫球蛋白纯化及部分特性分析[J];水产学报;2001年01期
8 林天龙,陈强,龚晖,刘晓东,俞伏松,杨金先,董传甫;欧洲鳗免疫球蛋白单克隆抗体的制备与特性[J];水产学报;2001年06期
9 张永安,聂品;鳜血清免疫球蛋白的分离纯化及其亚单位分子量的测定[J];水生生物学报;1998年02期
10 李清禄,陈强;海水网箱养殖大黄鱼细菌性病原鉴定与感染治疗研究[J];应用与环境生物学报;2001年05期
【相似文献】
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1 王二先;李振山;;高活性发酵蛋白对猪生长及免疫性能的影响[J];养猪;2011年04期
2 吕爱军;胡秀彩;张艳华;程超;朱爱华;;鱼类中新发现的免疫球蛋白[J];水产科学;2011年07期
3 宋文华;于翔;富丽静;姚福向;张健;李赫;胡宗云;张涛;张继飞;;黄芪多糖和香菇多糖对草鱼非特异性免疫功能的影响[J];安徽农业科学;2011年24期
4 王珺;吴晓;霍乃蕊;;牛初乳中免疫因子研究进展——以长江中下游油菜和水稻种子生产商为例[J];天津农业科学;2011年03期
5 覃川杰;杨川;陈昌福;;水温对鱼类免疫活动的影响[J];河南师范大学学报(自然科学版);2011年05期
6 宋文华;胡宗云;富丽静;张涛;李赫;姚福向;张健;;金丝桃素、绿原酸和硬葡聚糖对草鱼幼鱼生长及免疫功能的影响[J];水产学杂志;2011年02期
7 于翔;李赫;宋文华;富丽静;姚福向;胡宗云;张涛;张健;;三种免疫添加剂对草鱼非特异性免疫功能的影响[J];水产养殖;2011年07期
8 晋大鹏;;绵羊免疫球蛋白G Fc受体Ⅲ(FcγRⅢ)的克隆及鉴定[J];中国畜牧兽医;2011年06期
9 王志峰;郭德慧;;分娩舍仔猪腹泻原因及预防措施[J];农村养殖技术;2011年12期
10 黄辉龙;赵文静;邹晓庭;李慧;张敏;董信阳;;γ-氨基丁酸对蛋鸽就巢习性、免疫和抗氧化性能的影响[J];中国兽医学报;2011年09期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 尹晓林;马红京;郭坤元;尚振川;肖露露;叶欣;;供者活化性杀伤免疫球蛋白样受体与骨髓移植预后的临床关系[A];中华医学会第八次全国血液学学术会议论文汇编[C];2004年
2 刘锦华;刘莉;高涛;蒋音;;病毒性肝炎合并高免疫球蛋白E(IgE)血症[A];中华医学会全国第九次感染病学学术会议论文汇编[C];2006年
3 田迎;张春妮;;免疫球蛋白游离轻链测定方法评价[A];中华医学会第七次全国检验医学学术会议资料汇编[C];2008年
4 鲁云;段继慧;李倩;于珍;王亚非;邱录贵;;多发性骨髓瘤常见免疫球蛋白易位相关基因的表达及临床意义研究[A];第12届全国实验血液学会议论文摘要[C];2009年
5 刘中勇;高东微;刘津;马孝斌;王雅静;;血浆蛋白粉研究与应用进展[A];中国畜牧兽医学会2009学术年会论文集(下册)[C];2009年
6 李斐;黎海芪;;孕期妇女免疫球蛋白变化及婴儿脐血IgE分析[A];新世纪预防医学面临的挑战——中华预防医学会首届学术年会论文摘要集[C];2002年
7 李翠英;邱晓彦;;人口腔上皮及其肿瘤细胞中免疫球蛋白的mRNA和蛋白表达研究[A];中华口腔医学会第七届全国口腔病理学术会议论文摘要汇编[C];2006年
8 魏巍;刘红柏;王荻;卢彤岩;尹家胜;;哲罗鱼免疫球蛋白轻链可变区序列及其多样性研究[A];2008年中国水产学会学术年会论文摘要集[C];2008年
9 潘卫利;;面部皮疹1个月,泛发全身2周[A];2008年浙江省皮肤病学术会议论文汇编[C];2008年
10 刘虹;;手足口病患儿免疫功能临床分析[A];全国第2届中西医结合传染病学术会议暨国家中医药管理局第1届传染病协作组会议论文汇编[C];2008年
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1 武汉工业学院动物营养与饲料科学湖北省重点实验室 胡晓艳 王春维;免疫球蛋白的制备方法及在畜禽生产中的应用[N];中国畜牧兽医报;2009年
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3 记者 郑莉丽;双异亚基免疫球蛋白使一药治多病成为可能[N];健康报;2008年
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5 平平;免疫球蛋白可治SPS[N];医药经济报;2002年
6 记者 曲俊雅;免疫球蛋白可能治早老性痴呆[N];新华每日电讯;2005年
7 董江萍;FDA批准国际首个皮下给药免疫球蛋白制剂[N];中国医药报;2006年
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10 朱晓京;沈阳未发现问题免疫球蛋白[N];沈阳日报;2008年
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1 陈炫;溃给宁合剂治疗溃疡性结肠炎的临床研究[D];成都中医药大学;2001年
2 徐镇;中华鳖免疫球蛋白连接链和重链基因与抗体产生规律[D];华中农业大学;2009年
3 李强;牙鲆免疫球蛋白单克隆抗体的研制及其在牙鲆淋巴囊肿病研究中的应用[D];中国海洋大学;2007年
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6 林存智;海分枝杆菌培养及致病性研究[D];中国海洋大学;2009年
7 赵絃;黄芪脱敏汤治疗变应性鼻炎的研究[D];北京中医药大学;2005年
8 覃纲;免疫球蛋白M与鼻咽癌的实验研究[D];四川大学;2007年
9 鲍永华;犬免疫球蛋白遗传特性及可变区多样性研究[D];吉林大学;2008年
10 李慧英;壳聚糖对肉鸡免疫功能的影响及其分子机理研究[D];内蒙古农业大学;2009年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 金春华;癫痫大鼠神经细胞核转录因子表达及免疫球蛋白对其表达的影响[D];延边大学;2006年
2 李晓舟;亚麻木脂素对雏鸡生长及免疫机能的影响[D];东北农业大学;2007年
3 沈红石;骨髓瘤细胞系KM3中免疫球蛋白重链基因易位的初步研究[D];第二军医大学;2000年
4 田亚光;颊粘膜细胞IL-1β表达及血清免疫球蛋白含量与慢性牙周炎相关关系的研究[D];中国医科大学;2005年
5 吴颖洁;椎间盘炎动物模型的建立及自免疫状态的研究[D];天津医科大学;2007年
6 李建磊;牛初乳中免疫球蛋白的提取及其保护剂研究[D];河北农业大学;2008年
7 王成虎;不同类型过敏性紫癜患儿免疫功能的变化趋势及意义[D];山西医科大学;2008年
8 邵蓬;牙鲆感染淋巴囊肿病毒后靶器官定位及抗体水平检测[D];中国海洋大学;2008年
9 刘文君;益生菌与早产儿院内感染[D];中国协和医科大学;2009年
10 王彤光;犬细小病毒单克隆抗体在治疗犬细小病毒病上的应用研究[D];西北农林科技大学;2003年
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