收藏本站
《食品工业科技》 2014年19期
收藏 | 投稿 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

大肠杆菌L-谷氨酸脱羧酶定点突变及其酶学性质初步研究

毕金丽  刘娅  王建平  史吉平  柳鹏福  
【摘要】:L-谷氨酸脱羧酶(L-glutamate decarboxylase,GAD)是生物法生产GABA的关键酶,但是野生型L-谷氨酸脱羧酶的最适pH过低,这限制了它的工业应用。本文对编码来源于大肠杆菌谷氨酸脱羧酶的gadB基因进行了定点突变,分别构建了表达野生型GadB和突变型GadBΔHT的基因工程菌。在获得高表达的基础上,对两个酶的最适温度、最适pH、温度稳定性和pH稳定性进行了系统研究,证实了突变酶GadBΔHT在保持了与野生型相当的催化活性的前提下,表现出更广泛的pH适应能力,在pH3.4~6.2的范围内,仍能保持50%以上的催化活性。突变酶更能适应工业生产的需要,降低生产成本,对于实际应用具有重要价值。

手机知网App
【参考文献】
中国期刊全文数据库 前7条
1 徐传伟,夏应和,郑振文,张向前;γ-氨基丁酸控制哮喘急性发作临床疗效观察[J];滨州医学院学报;1999年02期
2 叶惟泠;γ-氨基丁酸的发现史[J];生理科学进展;1986年02期
3 赵艳;梁新乐;张虹;;大肠杆菌谷氨酸脱羧酶的结构、功能及其基因表达调控[J];食品与发酵工业;2006年07期
4 许建军,江波,许时婴;Lactococcus lactis谷氨酸脱羧酶的分离纯化及部分酶学性质[J];无锡轻工大学学报;2004年03期
5 刘婷婷;杨套伟;张术聪;夏海锋;饶志明;;高效转化L-谷氨酸为γ-氨基丁酸菌株的筛选、鉴定及初步优化[J];食品与生物技术学报;2010年05期
6 胡家澄;邹晓庭;;新型绿色饲料添加剂—γ-氨基丁酸[J];畜牧与兽医;2009年08期
7 谭少云,佘伟鸣,叶放;HPLC法测定脑复清胶囊中γ-氨基丁酸的含量[J];中国新药杂志;2002年11期
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 牛永东,许丽艳,李恩民;酵母单杂交诱饵质粒pHis-3NF和pLacZ-3NF的构建与鉴定[J];癌变.畸变.突变;2003年01期
2 欧阳松应,徐寿水,沈文律,周传香,李春艳,欧阳红生;人PTEN基因表达载体的构建及其在U_(251)细胞中的表达[J];癌变.畸变.突变;2004年04期
3 李涛,石年,吴又桐,周丽,董洁,王素青,陈亮;Bcl-2在溴氰菊酯诱导神经细胞凋亡机制中的作用[J];癌变.畸变.突变;2004年05期
4 史冬燕;程在全;;元江普通野生稻金属硫蛋白基因的获得和序列分析[J];安徽大学学报(自然科学版);2009年03期
5 张珂;薛正莲;;工程菌产酶制备GABA测定条件的优化[J];安徽工程大学学报;2012年01期
6 鞠玉栋;郑回勇;吴维坚;陈永快;何炎森;吴松海;;中国水仙MADS-box基因克隆及其序列分析[J];安徽农学通报;2008年21期
7 张金洲;项智锋;王清华;李学斌;赵海涛;张廷虎;郭玉娇;;利用RAPD标签分析3种鲤科鱼群体的遗传变异[J];安徽农业科学;2008年23期
8 曾青兰;;纤维素降解细菌的分离鉴定和筛选方法的研究[J];安徽农业科学;2008年24期
9 王延云;;峨边花牛肌肉生长抑制素基因cDNA克隆及序列分析[J];安徽农业科学;2008年25期
10 卢高峰;夏平安;邱璜;李伟娟;王中明;刘明莉;;PRRSV Hn-1/06株GP5蛋白基因的克隆及表达载体的构建[J];安徽农业科学;2008年26期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 田永强;张荣意;朱中元;;人乳头瘤病毒线性平行杂交分型检测条件的建立及优化[A];2009年海南省微生物学检测及质量保证研讨会论文集[C];2009年
2 梁权;毛培菊;罗春贞;王缦;;HIV-1跨膜蛋白gp41的截短表达及其免疫反应性[A];第五次全国免疫诊断暨疫苗学术研讨会论文汇编[C];2011年
3 朱勤勋;严雪;韩友斌;;鼠源IgG抗体F(ab')2片段及Fab片段的制备纯化及其免疫活性研究[A];第五次全国免疫诊断暨疫苗学术研讨会论文汇编[C];2011年
4 朱美财;占志;王雅静;蔡庆;;刺桐胰蛋白酶抑制剂突变体在大肠杆菌中的表达及在TPA纯化中的应用[A];微生物与人类健康科技论坛论文汇编[C];2009年
5 刘俊莹;张华鹏;王聪聪;张剑峰;;马铃薯卷叶病毒ORF1克隆及序列分析[A];马铃薯产业与科技扶贫(2011)[C];2011年
6 冯琦;孙秉中;赵永同;孙凯;张英起;颜真;韩苇;;Bcr-abl特异性系列核酶载体的构建及初步鉴定[A];生命科学与生物技术:中国科协第三届青年学术年会论文集[C];1998年
7 白玉杰;苏成芳;杨安刚;;抗人CD3单链抗体基因的构建及表达[A];生命科学与生物技术:中国科协第三届青年学术年会论文集[C];1998年
8 赵洁;刘楚吾;;笛鲷AFLP分析体系的确立[A];经济发展方式转变与自主创新——第十二届中国科学技术协会年会(第三卷)[C];2010年
9 马艳芝;张玉星;;梨属植物基因组DNA提取部位对RAPD扩增的影响[A];第二届全国果树分子生物学学术研讨会论文集[C];2009年
10 高水平;范丙友;刘改秀;史国安;李嘉珏;孔祥生;;牡丹ACS反义基因植物表达载体的构建[A];中国观赏园艺研究进展(2010)[C];2010年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 王庆莲;苹果多胺和脯氨酸合成代谢相关基因的功能鉴定[D];山东农业大学;2009年
2 郭爱疆;猪带绦虫六钩蚴TSOL18抗原表位及组织定位的研究[D];甘肃农业大学;2010年
3 郑小坚;家蚕类胰岛素基因BBX-B8的功能研究[D];苏州大学;2010年
4 王发明;柚(citrus grandis Osbeck)单染色体AFLP分子标记体系及文库的建立[D];福建农林大学;2010年
5 黄亚辉;茶树种质间谷氨酸脱羧酶活性差异及γ-氨基丁酸茶的研究[D];中南林业科技大学;2010年
6 于蕾;野西瓜极性生物碱A10组分诱导SGC-7901细胞凋亡线粒体通路的研究[D];北京中医药大学;2010年
7 王欣梅;大肠杆菌f2噬菌体分子印迹膜的制备、评价和应用[D];华中科技大学;2011年
8 赵雪倩;维甲酸相关孤核受体α在α-黑素细胞刺激素及其类似物STY39调控树突状细胞成熟中的作用[D];第二军医大学;2011年
9 张荻;百子莲花芽分化及开花机理研究[D];东北林业大学;2011年
10 罗其花;中国小蜂螨自然种系构成、流行病学调查及寄生生物学研究[D];中国农业科学院;2011年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 仇婷;短乳杆菌NCL912连续培养生产γ-氨基丁酸研究[D];南昌大学;2011年
2 孙晓宇;γ-氨基丁酸高产菌株的选育[D];黑龙江大学;2011年
3 史小峰;曲霉型豆豉中GABA变化规律研究[D];西北农林科技大学;2008年
4 王芳;白茶GAD活性及γ-氨基丁酸白茶加工技术研究[D];福建农林大学;2009年
5 孟祥勇;糙米、大豆发芽富集γ-氨基丁酸及复合谷物饮料的研究[D];江南大学;2009年
6 赵大伟;大麦磷高效特性及籽粒功能性成分的评价[D];云南农业大学;2009年
7 姜宏瑛;理化诱变提高乳酸菌STX2 γ-氨基丁酸产量的研究[D];南京农业大学;2013年
8 袁军;不同发酵处理对酸肉中GABA形成的影响及富集技术的研究[D];西南大学;2014年
9 余芳;肠出血型大肠埃希菌O157:H7 Tir-C在大肠杆菌和嗜酸乳杆菌中的表达研究[D];南方医科大学;2014年
10 李海鑫;超滤离心在双水相萃取谷氨酸脱羧酶中的应用[D];东北农业大学;2014年
【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 刘清,姚惠源,张晖;生产γ-氨基丁酸乳酸菌的选育及发酵条件优化[J];氨基酸和生物资源;2004年01期
2 王芳权;陈蔚青;陈虹;;比色法快速测定酶转化反应中γ-氨基丁酸质量分数[J];氨基酸和生物资源;2006年02期
3 徐项桂,杨再福,黄胜和,弋小红;γ-氨基丁酸对小白鼠离体胃标本胃酸分泌的促进效应(英文)[J];动物学报;2001年02期
4 王纪华;富含γ-酪氨酸米胚的开发利用[J];北京农业科学;1999年02期
5 徐传伟,夏应和,郑振文,张向前;γ-氨基丁酸控制哮喘急性发作临床疗效观察[J];滨州医学院学报;1999年02期
6 曹德瑞;邹晓庭;;γ-氨基丁酸对生长肥育猪生长性能和胴体品质的影响[J];饲料工业;2007年23期
7 陈黎龙;江青艳;肖世平;;γ-氨基丁酸的生物学功能及其在畜牧生产中的应用[J];饲料工业;2010年04期
8 黄俊;梅乐和;盛清;许静;吴晖;;γ-氨基丁酸液体发酵过程的条件优化及补料研究[J];高校化学工程学报;2008年04期
9 何熙璞;张敏;李俊芳;王邕;;γ-氨基丁酸的生理学功能及研究现状[J];广西大学学报(自然科学版);2007年S1期
10 林亲录;王婧;陈海军;;γ-氨基丁酸的研究进展[J];现代食品科技;2008年05期
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 王朝章;;谷氨酸脱羧酶活度——一种粮食品质指标[J];四川粮油科技;1977年03期
2 盛自华;林秋霞;汪秀娥;;高活力谷氨酸脱羧酶大肠杆菌的应用[J];发酵科技通讯;1981年02期
3 李亢宗;姚侃;;大肠杆菌中谷氨酸脱羧酶的制备及其性质的研究[J];兰州医学院学报;1983年04期
4 何亚明;胡雨前;;谷氨酸脱羧酶电极的研制[J];化学传感器;1989年04期
5 任慧,马逸龙,任恕;一种新的谷氨酸脱羧酶电极[J];传感技术学报;1992年01期
6 许建军,江波,许时婴;Lactococcus lactis谷氨酸脱羧酶的分离纯化及部分酶学性质[J];无锡轻工大学学报;2004年03期
7 范恩宇;黄俊;胡升;梅乐和;;重组谷氨酸脱羧酶的表达条件优化、纯化及酶学性质研究[J];发酵科技通讯;2010年03期
8 林谦;杨胜远;陆兆新;吕凤霞;别小妹;邹晓葵;;嗜热链球菌谷氨酸脱羧酶基因及其侧翼区序列分析[J];食品科学;2011年03期
9 ;应用固相大肠杆菌谷氨酸脱羧酶生产γ——氨酪酸[J];江苏发酵;1978年Z1期
10 赵景联;王子浩;;大肠杆菌谷氨酸脱羧酶的纯化及其性质的研究[J];陕西师大学报(自然科学版);1990年01期
中国重要会议论文全文数据库 前4条
1 蒋春雷;李泉;李润平;孙学军;刘昀;;急性氧中毒机制——高分压氧对谷氨酸脱羧酶含量的影响[A];救捞专业委员会2004年学术交流会论文集[C];2004年
2 李春林;王尚珍;刘瑞莲;;成人隐匿性自身免疫性糖尿病的临床特点——91例谷氨酸脱羧酶抗体检测结果和临床资料分析[A];中华医学会第六次全国内分泌学术会议论文汇编[C];2001年
3 董元祥;陈涛;李云庆;;大鼠导水管周围灰质内谷氨酸脱羧酶和阿片μ受体阳性神经元与亮氨酸-脑啡肽、β-内啡肽和强啡肽阳性终末的联系[A];解剖学杂志——中国解剖学会2002年年会文摘汇编[C];2002年
4 汪海东;楼旭丹;夏世金;张晓丽;孙皎;;谷氨酸脱羧酶抗体生物素-链霉亲合素放大ELISA系统的构建与临床应用[A];中华医学会第十一次全国内分泌学学术会议论文汇编[C];2012年
中国博士学位论文全文数据库 前3条
1 郁凯;以计算机辅助分子设计方法改造谷氨酸脱羧酶的研究[D];浙江大学;2013年
2 张晖;米胚谷氨酸脱羧酶性质及其富集γ-氨基丁酸研究[D];江南大学;2004年
3 林谦;嗜热链球菌Y2谷氨酸脱羧酶基因的克隆与表达[D];南京农业大学;2009年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 张珂;谷氨酸脱羧酶转化制备γ-氨基丁酸工艺的研究[D];安徽工程大学;2012年
2 黄祖耀;高产γ-氨基丁酸乳酸菌的选育与谷氨酸脱羧酶基因的克隆[D];安徽工程大学;2012年
3 王期;生物转化法应用重组谷氨酸脱羧酶合成γ-氨基丁酸[D];南京师范大学;2011年
4 林玲;利用定向进化及半理性设计提高谷氨酸脱羧酶催化活性的研究[D];浙江大学;2013年
5 韩国晖;口服谷氨酸脱羧酶延缓NOD小鼠发生1型糖尿病的免疫因素探测[D];山西医科大学;2006年
6 范国权;谷氨酸脱羧酶腹腔注射延缓NOD小鼠发生1型糖尿病免疫因素检测[D];山西医科大学;2003年
7 徐薇;脐带间充质干细胞联合谷氨酸脱羧酶抗原肽对1型糖尿病患者外周血单个核细胞的免疫调节研究[D];青岛大学;2012年
8 范恩宇;短乳杆菌谷氨酸脱羧酶基因的克隆与表达[D];浙江大学;2010年
9 李泉;谷氨酸脱羧酶在急性脑型氧中毒中的快速变化[D];青岛大学;2005年
10 缪存影;高产γ-氨基丁酸乳酸菌的筛选鉴定、条件优化及谷氨酸脱羧酶基因的克隆[D];浙江师范大学;2010年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62791813
  • 010-62985026