收藏本站
《生物工程学报》 2008年09期
收藏 | 投稿 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

苏云金芽胞杆菌杀虫晶体蛋白Cry1Ba结构域Ⅱ中Loops结构与功能关系研究

王广君  张杰  孙东辉  宋福平  黄大昉  
【摘要】:为了明确杀虫晶体蛋白中各个Loop的结构与功能的关系,以及Loop突变对Cry1Ba蛋白杀虫活性的影响,首先通过三维结构模拟以及同源序列分析的方法,找到Cry1Ba蛋白三个结构域及三个Loop相对应的氨基酸片段;然后通过重叠引物PCR将编码Cry1Ba蛋白结构域Ⅱ中的三个Loop进行了相应的突变,共获得了5个突变体M1(Loop1:340WSNTR344—缺失(Cry1A))、M2(Loop2:402Y—G)、M3(Loop2:400GIYLEP405—PSAV(Cry3A))、M4(400GIYLEPIH407—ILGS(Cry1A))、M5(Loop3:472LQSRV476—AGAVYTL(Cry1A))。将这些突变体在大肠杆菌BL21中进行了诱导表达,提取蛋白,分别对小菜蛾进行了生物活性测定。生测结果表明,Loop1的缺失突变M1的毒力,与Cry1Ba(LC500.96μg/mL)相比,显著降低,LC50为35.51μg/mL;在Loop2的突变中,单个氨基酸的突变M2(Y/G)的毒力略有下降(LC50为1.31μg/mL);而另两种突变(M3和M4)对小菜蛾的毒力明显下降,LC50值分别为11.56μg/mL、34.81μg/mL;Loop3的突变M5对小菜蛾的毒力略有提高(LC500.81μg/mL),但差异不显著。对Cry1Ba蛋白突变前后结构与功能之间关系的分析结果表明,Loop区突变对Cry1Ba蛋白的结构和功能影响非常显著;Loop1和Loop2在决定Cry1Ba对小菜蛾的毒性方面起着重要作用。

手机知网App
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 董树林;蜡样芽孢杆菌的分类地位和鉴定标准[J];微生物学免疫学进展;1985年03期
2 GinaKolata;王雪英;;锋利的刀和磨刀石——遗传生物工程学和生态学[J];世界科学;1986年10期
3 赵铭山,何永山,公允,王晓春,李宏伟,赵奇,蔡良琬;我国鼠疫菌13Mdal质粒的发现[J];中国地方病防治杂志;1988年03期
4 赵铭山,何永山,张春华,张贵斌;鼠疫菌携带的质粒种类、地理分布及其功能的研究[J];中国地方病防治杂志;1992年02期
5 刘子铎;洪玉枝;潘学文;喻凌;喻子牛;;苏云金芽胞杆菌YBT-803菌株cryI基因的克隆和表达[J];农业生物技术学报;1993年01期
6 ;农业部华中农业大学农业微生物重点开放实验室[J];高技术通讯;1994年04期
7 关雄,黄志鹏,高日霞;苏云金芽胞杆菌ICP基因工程菌的研究进展[J];福建农业大学学报;1995年02期
8 鲁松清,喻子牛;苏云金芽胞杆菌CT-43的芽胞萌发及芽胞和伴胞晶体的形成[J];华中农业大学学报;1995年01期
9 韩明,喻子牛;苏云金芽胞杆菌cryⅡ基因的克隆和表达[J];生物工程学报;1995年02期
10 胡萃,张传溪;浅论昆虫产业开发[J];浙江大学学报(农业与生命科学版);1995年04期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 常亚飞;陈守文;喻子牛;;苏云金素发酵培养基的优化[A];生命科学与微生物专辑[C];2004年
2 邹雪;余子全;孙明;喻子牛;;利用染色方法筛选对根结线虫高毒力的苏云金芽胞杆菌[A];生命科学与微生物专辑[C];2004年
3 陈守文;董纯明;宋明良;喻子牛;;苏云金杆菌伪劣制剂中化学农药的检出及评价[A];第三届全国绿色环保农药新技术、新产品交流会暨第二届全国生物农药研讨会论文集[C];2004年
4 刘华亮;吴继星;陈守文;孙明;喻子牛;;苏云金芽胞杆菌微胶囊剂残效性能的研究[A];第三届全国绿色环保农药新技术、新产品交流会暨第二届全国生物农药研讨会论文集[C];2004年
5 TSUCHIYA S;KASAISHI Y;HARADA H;ICHIMATSU Y;SAITOH H;MIZUKI E;OHBA M;张成省;;苏云金芽胞杆菌分离物对烟草甲的防治效果测定[A];2004年CORESTA会议第58届烟草科学研究会议论文集[C];2004年
6 乐超银;孙明;喻子牛;;苏云金芽胞杆菌广谱、遗传稳定工程菌的构建[A];中国生物工程学会2006年学术年会暨全国生物反应器学术研讨会论文摘要集[C];2006年
7 孙明;喻子牛;陈守文;刘子铎;阮丽芳;李林;;蜡状芽胞杆菌群基因组及其病原特征[A];第二届中国青年学者微生物遗传学学术研讨会论文集[C];2006年
8 赵昌明;罗毅;宋春旭;曾慧;喻子牛;孙明;;蜡状芽胞杆菌群中Zwittermicin A生物合成相关基因的克隆与分析[A];第二届中国青年学者微生物遗传学学术研讨会论文集[C];2006年
9 孙明;喻子牛;陈守文;刘子铎;李林;;苏云金芽胞杆菌系列基因工程菌的构建和开发[A];第二届中国青年学者微生物遗传学学术研讨会论文集[C];2006年
10 余子全;孙明;喻子牛;;苏云金芽胞杆菌中杀线虫晶体蛋白基因cry6A的负表达调控[A];第二届中国青年学者微生物遗传学学术研讨会论文集[C];2006年
中国重要报纸全文数据库 前4条
1 本报记者 牛海卫 余平凡 通讯员 王景刚;以创新成果推动农业微生物发展[N];科学时报;2002年
2 谈海亮 金安江;“转基因抗虫水稻品种培育”在华中农大启动[N];农民日报;2009年
3 本报记者 李徽;技改创新独领风骚[N];宁夏日报;2010年
4 上海农科热线供稿;应对转基因水稻严格进行安全性评价[N];东方城乡报;2010年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 邵宗泽;苏云金芽胞杆菌帮助蛋白对杀虫晶体蛋白表达的影响[D];华中农业大学;2000年
2 刘子铎;苏云金芽胞杆菌杀虫晶体蛋白和辅助蛋白基因的克隆表达[D];华中农业大学;1999年
3 李林;苏云金芽胞杆菌高频转化系统的建立及其性能[D];华中农业大学;1999年
4 鲁松清;苏云金芽胞杆菌对鳞翅目昆虫广谱高毒基因工程菌的构建[D];华中农业大学;1999年
5 张利莉;苏云金芽胞杆菌杀虫晶体蛋白cry1D的表达调控[D];华中农业大学;2000年
6 张琼;苏云金芽胞杆菌蛋白Aii及其对植物病原菌致病性的影响[D];华中农业大学;2001年
7 吴岚;苏云金芽胞杆菌解离载体的构建及其特性[D];华中农业大学;2000年
8 周琴;绿色荧光蛋白基因在苏云金芽胞杆菌中的表达与应用[D];华中农业大学;2004年
9 周学永;苏云金芽胞杆菌喷雾干燥工艺和杀虫蛋白纳米材料吸附剂型的研究[D];华中农业大学;2004年
10 朱晨光;苏云金芽胞杆菌抗病杀虫和广谱工程菌的构建[D];华中农业大学;2004年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 舒正玉;重组苏云金芽胞杆菌WG-001环境安全性分析[D];华中农业大学;2003年
2 林晓燕;绿色荧光蛋白基因标记苏云金芽胞杆菌及微量热特性[D];华中农业大学;2003年
3 胡鲲;阿维链霉菌NRRL8165的摇瓶发酵及其与苏云金芽胞杆菌制剂的协同作用[D];华中农业大学;2000年
4 张家学;苏云金芽胞杆菌BMB005的补料发酵工艺研究[D];华中农业大学;2004年
5 邵志会;苏云金芽胞杆菌的分批发酵动力学[D];华中农业大学;2004年
6 操丽丽;杀虫晶体蛋白和低聚异麦芽糖的毛细管电泳分析[D];华中农业大学;2004年
7 吴怀光;利用Tn5401转座子构建解离载体并在苏云金芽胞杆菌中高效、稳定表达AiiA蛋白[D];华中农业大学;2004年
8 张睿;苏云金芽胞杆菌的晶体蛋白cry26Aa和cry28Aa基因表达特性研究[D];华中农业大学;2005年
9 刘华亮;苏云金芽胞杆菌发酵液微滤浓缩和微胶囊剂的研究[D];华中农业大学;2005年
10 谭珊娜;CTC菌株的分类鉴定与S-层基因的表达载体构建[D];华中农业大学;2005年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62791813
  • 010-62985026