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《生物化学与生物物理进展》 2007年02期
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CK8寡糖链结构及翻译水平改变与人肝癌细胞转移相关性研究

代智  刘银坤  郭坤  孙强玲  卢雯静  杨芃原  
【摘要】:糖组学方法筛查人肝癌细胞转移过程中发挥重要作用的核心岩藻糖基化蛋白质分子,解析比较筛出的差异蛋白——细胞角蛋白8(CK8)翻译及糖基化修饰改变与人肝癌细胞转移潜能的关系.应用双向电泳(2-DE)、凝集素亲和印迹、凝集素亲和沉淀联合质谱分析技术,筛查并验证与肝癌转移相关的核心岩藻糖基化蛋白;应用细胞免疫荧光和蛋白质免疫印迹检测CK8的蛋白质表达情况;应用免疫沉淀结合多种凝集素亲和印迹,推测其与肝癌转移相关的寡糖链结构改变.研究发现,3种不同转移潜能人肝癌细胞Hep3B、MHCC97-L和MHCC97-H的扁豆凝集素(LCA)亲和印迹表达谱中,分子质量55~60ku、等电点4~6区域处有核心岩藻糖基化蛋白呈差异表达,质谱鉴定为CK8.LCA亲和沉淀及蛋白质印迹进一步验证CK8异常核心岩藻糖基化与肝癌转移相关;研究发现,CK8分布于细胞浆内,在MHCC97-L和MHCC97-H细胞中蛋白质表达水平较Hep3B高,在MHCC97-H中与LCA和蓖麻凝集素(RCA-1)的亲和力较Hep3B强.以上结果提示,2-DE和凝集素印迹技术联合MALDI-TOF-MS/MS分析可用于筛查疾病过程相关的异常糖基化蛋白质分子,CK8蛋白水平、核心岩藻糖基化及β-1,4末端半乳糖基化的增加均与肝癌细胞转移潜能相关.

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【参考文献】
中国期刊全文数据库 前2条
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【共引文献】
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1 代智,刘银坤,崔杰峰,冯钜涛,宋海燕,陈洁,孙瑞霞,李娜,申华莉,张予,杨芃原;肝癌转移相关的核心岩藻糖基化蛋白质表达谱的研究[J];生物化学与生物物理进展;2005年05期
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【二级参考文献】
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1 吴兴中,陈迎风;岩藻糖糖链与肝癌细胞的迁移作用[J];生物化学与生物物理进展;2002年06期
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