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《山东大学学报(医学版)》 2017年07期
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Sirtuin在低氧诱导人脐带间充质干细胞增殖中的作用

王凯民  谭娟娟  严志强  李志强  
【摘要】:目的探讨低氧对人脐带间充质干细胞(h UC-MSCs)中Sirtuin(SIRT)蛋白表达影响及与细胞增殖的关系。方法组织块贴壁法分离和培养h UC-MSCs;流式细胞仪鉴定细胞表面标志物;CCK-8法测定低氧与常氧下不同时间点h UC-MSCs的增殖能力;流式细胞仪检测低氧与常氧下细胞周期的变化;免疫荧光与Western blotting测定低氧与常氧下细胞SIRT蛋白定位与表达。结果成功分离h UC-MSCs;细胞CD90、CD105、CD29、CD44高表达,CD14、CD19、CD34、CD45、HLA-DR无表达;CCK-8测定低氧培养24、48、72 h细胞的增殖能力均高于常氧培养(P均0.05);在低氧下培养24、48 h后S期细胞比率高于常氧培养(P均0.05);免疫荧光检测SIRT1、6位于细胞核内,SIRT2定位于胞浆,SIRT3、4、5定位于线粒体。Western blotting测定SIRT1在低氧培养24、48 h蛋白表达量均高于常氧条件(P均0.05),常氧培养72 h的SIRT1表达量高于24 h及48 h(P均0.05);SIRT2表达量在低氧培养24 h高于常氧培养(P0.05),48 h后低于常氧培养,72 h后高于常氧培养(P0.05);低氧培养24、48、72 h后SIRT5的表达量均高于常氧处理(P均0.05),常氧与低氧培养细胞48 h和72 h后均高于24 h时SIRT5的表达(P均0.05)。结论低氧处理24、48、72 h均可以促进h UC-MSCs的增殖。低氧诱导SIRT1、2与5表达改变提示SIRT1、2、5可能参与了低氧对h UC-MSCs增殖的调控。
【作者单位】南方医科大学第三临床医学院附属奉贤区中心医院神经外科;上海交通大学生命科学技术学院;南方医科大学第三临床医学院附属奉贤区中心医院中心实验室;
【关键词】人脐带间充质干细胞 低氧 增殖 Sirtuin
【基金】:国家自然科学基金(10972141,11172176,31570949)
【分类号】:R329.2
【正文快照】:
网络出版地址:http://kns.cnki.net/kcms/detail/37.1390.R.20170601.1704.002.html3.南方医科大学第三临床医学院附属奉贤区中心医院中心实验室,上海201499)间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)是来源于早期中胚层的一种多能干细胞,具有自我更新及向三系分化的潜能,是

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