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《山东大学学报(自然科学版)》 2001年01期
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青岛文昌鱼神经胚中期cDNA文库的构建

张燕君  陈忠科  张红卫  
【摘要】:提取青岛文昌鱼 1 8小时神经胚中期mRNA ,以 5′脱磷的NotⅠ oligo(dT) 18为引物 ,反转录合成cDNA .双链cDNA的 5′端钝端连接上带EcoRⅠ突出末端的衔接头 ,再经NotⅠ酶切 ,在cDNA的 3′端形成NotⅠ突出末端 .以SizeSep离心层析柱除去 4 0 0bp以下的小分子 ,与带有NotⅠ和EcoRⅠ突出末端并经过 5′端脱磷的λExCellNotⅠ /EcoRⅠ /CIP载体DNA进行连接 ,经体外包装和感染NM52 2宿主菌 ,得到了 3.6× 1 0 4个独立的重组噬菌体克隆 .从中随机选取 2个克隆提取DNA ,NotⅠ、EcoRⅠ双酶切 ,电泳结果显示 2个克隆含有不同的插入片段 .以α 32 P dCTP标记的文昌鱼hedgehog基因片段为探针 ,通过噬菌斑原位杂交对cDNA文库进行了 2次筛选 ,得到了 1 6个阳性克隆 .由此认为文昌鱼神经胚cDNA文库确已建立 .

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【引证文献】
中国期刊全文数据库 前3条
1 梁恺龙,张晓辉,张红卫;青岛文昌鱼NADH脱氢酶亚基I基因片段的克隆[J];山东大学学报(自然科学版);2002年01期
2 张春兰,李金泉,尹俊;内蒙古阿尔巴斯白绒山羊毛囊兴盛期cDNA文库的构建[J];聊城大学学报(自然科学版);2004年01期
3 马勇;;内蒙古绒山羊KAP6-2全长cDNA的特征分析[J];阴山学刊(自然科学版);2007年03期
中国博士学位论文全文数据库 前2条
1 李金泉;内蒙古绒山羊育种方法的研究[D];中国农业大学;2005年
2 陈忠科;青岛文昌鱼AmphiTCTP,AmphiG10及核糖体蛋白基因的研究[D];山东大学;2006年
中国硕士学位论文全文数据库 前1条
1 赵冰;内蒙古白绒山羊HGT序列及结构的特征分析[D];内蒙古农业大学;2004年
【参考文献】
中国期刊全文数据库 前1条
1 毛炳宇,张燕君,郭晓霞,张红卫;青岛文昌鱼hedgehog基因表达图式的研究[J];山东大学学报(自然科学版);1999年02期
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前8条
1 张燕君,陈忠科,任前升,张红卫;文昌鱼神经胚cDNA文库的构建和hedgehog基因的筛选[J];动物学报;2001年S1期
2 毛炳宇,张燕君,张红卫;青岛文昌鱼发育信号传导相关基因hedgehog的克隆[J];山东大学学报(自然科学版);2001年01期
3 张燕君,梁恺龙,黄向炜,张红卫;青岛文昌鱼hedgehog及两个hedgehog-like片段的克隆[J];山东大学学报(自然科学版);2001年02期
4 梁恺龙,张晓辉,张红卫;青岛文昌鱼NADH脱氢酶亚基I基因片段的克隆[J];山东大学学报(自然科学版);2002年01期
5 张晓辉,陈忠科,林浴霜,李琳,杨焕明,石德利,张红卫;青岛文昌鱼profilin样蛋白基因的克隆与同源性分析[J];山东大学学报(理学版);2002年06期
6 李忻怡,张伟,林浴霜,于善清,王振光,张红卫;青岛文昌鱼铁蛋白ferritin基因的序列分析、同源性比较及二级结构预测[J];山东大学学报(理学版);2003年05期
7 时硕永,丁达夫;判定直系同源关系的进化分析方法[J];生物化学与生物物理学报;2002年01期
8 ;Ribosomal Protein Genes S23 and L35 from Amphioxus Branchiostoma belcheri tsingtauense:Identification and Copy Number[J];Acta Biochimica et Biophysica Sinica;2005年08期
中国博士学位论文全文数据库 前8条
1 谭训刚;鱼类肌肉发育及成肌因子的进化[D];中国科学院研究生院(海洋研究所);2003年
2 林浴霜;青岛文昌鱼早期发育相关基因AmphiMdp和brp-like的研究[D];山东大学;2005年
3 李忻怡;青岛文昌鱼发育相关基因AmphiSom、Tropomyosin, eIF3k和文昌鱼进化学的研究[D];山东大学;2006年
4 赵博生;青岛文昌鱼p23基因的克隆、鉴定、表达、纯化和功能分析[D];中国海洋大学;2006年
5 陈忠科;青岛文昌鱼AmphiTCTP,AmphiG10及核糖体蛋白基因的研究[D];山东大学;2006年
6 张伟;文昌鱼几个发育相关基因的研究及三崎柱头虫的形态学观察[D];山东大学;2006年
7 张颖;酒精对胚胎发育的影响及文昌鱼、斑马鱼Mef2 MRLC和hadh2基因的研究[D];山东大学;2007年
8 邵燕;稀有鮈鲫近交系的遗传质量检测[D];中国科学院研究生院(水生生物研究所);2007年
中国硕士学位论文全文数据库 前7条
1 王永杰;水稻农林8号、农林8号m cDNA文库的构建和BSL基因的筛选[D];安徽农业大学;2003年
2 李楠;青岛文昌鱼AmphiS28基因的克隆及进化分析[D];中国海洋大学;2004年
3 李娴;青岛文昌鱼AmphiS23基因和AmphiL35基因的克隆及进化分析[D];中国海洋大学;2005年
4 安云鹤;文昌鱼Hedgehog信号通路重要成员和Rbx1基因以及TLR2蛋白表达的研究[D];山东大学;2007年
5 王志强;白氏文昌鱼BAC测序与比较基因组学分析[D];广西大学;2007年
6 陈锦;厦门文昌鱼遗传多样性与保护遗传学的研究[D];集美大学;2008年
7 蔡召平;发育相关几个重要信号通路分子的研究[D];山东大学;2009年
【同被引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 朱国萍;人类基因组计划及研究[J];安徽师范大学学报(自然科学版);1999年01期
2 方永强,王龙;文昌鱼LH-RH的初步分离及其生物活性的测定[J];动物学报;1989年03期
3 方永强,翁幼竹,胡晓霞;性类固醇激素及其受体在文昌鱼性腺和神经系统中的分布[J];动物学报;2001年04期
4 翁幼竹,方永强,胡晓霞;雌、雄激素受体在文昌鱼神经系统和哈氏窝的免疫识别[J];动物学报;2001年06期
5 张燕君,陈忠科,任前升,张红卫;文昌鱼神经胚cDNA文库的构建和hedgehog基因的筛选[J];动物学报;2001年S1期
6 陈丹英,高云飞,李丽霞,翟中和;PK15细胞凋亡过程中角蛋白中间纤维的变化[J];动物学报;2002年01期
7 方永强,翁幼竹,黄威权,孙岚;芳香化酶在文昌鱼神经系统、哈氏窝和性腺特异性定位:原位杂交和免疫细胞化学研究(英文)[J];动物学报;2003年06期
8 宋霞,周开亚,马长艳;中华绒螯蟹蜕皮抑制激素1(Ers-MIH1)基因组DNA的分子克隆和序列分析[J];动物学报;2004年01期
9 王义权,许群山,彭宣宪,周涵韬;通过Cyt b基因同源序列比较评估厦门文昌鱼的分类学地位[J];动物学报;2004年02期
10 方永强;文昌鱼生态习性及其资源的保护[J];动物学杂志;1987年02期
中国博士学位论文全文数据库 前1条
1 尹俊;内蒙古绒山羊毛囊发育、生长周期及相关基因的研究[D];内蒙古大学;2004年
中国硕士学位论文全文数据库 前1条
1 张焱如;内蒙古白绒山羊皮肤毛囊活性的变化规律及生长激素受体在毛囊中的定位研究[D];内蒙古农业大学;2001年
【二级引证文献】
中国期刊全文数据库 前3条
1 张志甫;穆淑梅;康现江;李振秋;;莠去津对中华绒螯蟹蜕皮抑制激素表达的影响[J];水产科学;2011年04期
2 张文广;陈铭;李金泉;;绒山羊分子生物学数据库的设计与构建[J];中国生物工程杂志;2005年S1期
3 苏蕊;李金泉;张文广;尹俊;赵珺;常子丽;;骨形态发生蛋白2(BMP2)基因在内蒙古绒山羊不同时期皮肤毛囊中的表达[J];中国农业科学;2008年02期
中国博士学位论文全文数据库 前4条
1 周亦红;褐飞虱生物型的研究[D];南京农业大学;2003年
2 张燕军;内蒙古绒山羊胎儿期皮肤毛囊形态发生和发育规律及部分Hox基因家族成员研究[D];内蒙古农业大学;2007年
3 武涛;南瓜矮化突变体cgα的遗传、生理生化及相关基因表达分析[D];浙江大学;2008年
4 王更先;家蚕和棉铃虫若干lethal相关基因的克隆、表达及功能研究[D];苏州大学;2009年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 张文;内蒙古绒山羊毛被生长规律的研究[D];内蒙古农业大学;2011年
2 王敏;绒山羊11号染色体遗传连锁图谱的构建[D];内蒙古农业大学;2011年
3 梅步俊;内蒙古白绒山羊繁殖性状的遗传规律及选择方法的研究[D];内蒙古农业大学;2006年
4 马俊凯;青岛文昌鱼肌肉生化分析及其功能基因的研究[D];中国科学院研究生院(海洋研究所);2007年
5 吴晓梅;牛睫毛毛囊的形态发生与生长期毛乳头cDNA文库构建[D];西北农林科技大学;2007年
6 张俊霞;山羊HGT KAP基因家族成员的克隆及其mRNA在皮肤中的表达[D];内蒙古农业大学;2007年
7 张廷虎;南疆白绒山羊微卫星多态性及其与部分经济性状的相关性分析[D];新疆农业大学;2008年
8 张海军;内蒙古绒山羊BMP-2基因DNA序列的克隆与荧光原位杂交定位[D];内蒙古农业大学;2008年
9 陈锦;厦门文昌鱼遗传多样性与保护遗传学的研究[D];集美大学;2008年
10 徐磊;绒山羊X染色体遗传连锁图谱的构建[D];内蒙古农业大学;2010年
【相似文献】
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1 张燕君,陈忠科,任前升,张红卫;文昌鱼神经胚cDNA文库的构建和hedgehog基因的筛选[J];动物学报;2001年S1期
2 吴贤汉,张宝禄,曲艳梅;温度和盐度对青岛文昌鱼胚胎发育的影响[J];海洋科学;1998年04期
3 张燕君,毛炳宇,张红卫;文昌鱼sfy1基因的克隆及其在早期发育中的表达[J];中国生物化学与分子生物学报;2005年04期
4 本刊编辑部;“青岛文昌鱼幼体培育”通过技术鉴定[J];海洋科学;1991年03期
5 马辉;刘桂丰;徐晨曦;王玉成;杨传平;;二色补血草海藻糖-6-磷酸磷酸酯酶基因的克隆及分析[J];东北林业大学学报;2008年08期
6 张翅;戴国飞;刘军立;夏炎枝;甘南琴;红凌;;盐胁迫下杜氏盐藻(Dunaliella salina)cDNA文库的构建与新表达序列标签(EST)的获取、分析[J];武汉大学学报(理学版);2009年03期
7 贺福初;邢桂春;吴祖泽;;人胎肝cDNA文库的构建[J];军事医学科学院院刊;1992年02期
8 刘敏;张伟;陈天艳;蔺淑梅;赵良;刘锦锋;赵英仁;张树林;;丙型肝炎病毒核心蛋白酵母双杂交诱饵载体的构建及人胎肝cDNA文库的扩增、纯化和鉴定[J];西安交通大学学报(医学版);2006年01期
9 牛永东;许丽艳;韩溟;方王楷;沈忠英;李恩民;;酵母单杂交筛选实验中的关键问题[J];中国实验诊断学;2006年07期
10 徐锋;武晓丽;邱德文;;利用磁珠构建稻瘟菌cDNA文库[J];微生物学报;2008年06期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 张红卫;;关于文昌鱼发育机制的研究[A];第二届中国动物学会比较内分泌学分会和发育生物学分会联合学术研讨会论文集[C];2005年
2 张红卫;毛炳字;张燕君;张士瑶;;青岛文昌鱼hedgehog基因的研究[A];中国细胞生物学学会第七次会议论文摘要汇编[C];1999年
3 王勇;郎刚华;徐永立;张培军;;青岛文昌鱼LIM类同源框基因的序列分析和功能研究[A];中国细胞生物学学会第七次会议论文摘要汇编[C];1999年
4 和亚男;杨庆利;迟晓元;任增凯;禹山林;;花生谷胱甘肽硫转移酶基因的克隆和序列分析[A];全国植物分子育种研讨会摘要集[C];2009年
5 梁一;王昆;林嘉诚;汤子建;孙慧;;药用真菌Agrocybe aegerita cDNA文库构建及表达序列标签分析[A];第二届中国青年学者微生物遗传学学术研讨会论文集[C];2006年
6 郭莉;汤永民;徐晓军;沈红强;钱柏芹;罗春芳;;恶性淋巴瘤细胞cDNA T7噬菌体展示文库的建立及意义[A];第七届全国血液免疫学学术大会暨2008年浙江省血液病学术年会论文汇编[C];2008年
7 蒋立平;彭黎;梁宋平;;基于虎纹捕鸟蛛转录子分析的分子多样性[A];第八届中国生物毒素学术研讨会论文摘要[C];2007年
8 苗大利;杜昌升;张义兵;张奇亚;;紫外灭活鱼类弹状病毒诱导的牙鲆脾脏cDNA文库的构建及分析[A];武汉市首届学术年会论文集[C];2004年
9 乔军;孟庆玲;才学鹏;田广孚;景志忠;张艳;;运用SMART技术构建斯氏艾美耳球虫子孢子cDNA文库[A];中国畜牧兽医学会家畜寄生虫学分会第九次学术研讨会论文摘要集[C];2006年
10 张辉;陈创夫;王远志;盛金良;曹旭东;任艳;;羊种布鲁氏菌侵染HPT-8细胞cDNA文库的构建及EST序列功能分析[A];中国畜牧兽医学会兽医病理学分会第十六次学术研讨会、中国病理生理学会动物病理生理专业委员会第十五次学术研讨会论文集[C];2009年
中国重要报纸全文数据库 前8条
1 ;让鹿宝造福人类[N];经济消息报;2000年
2 ;我国基因组研究向“海洋”延伸[N];中国海洋报;2000年
3 记者 薛冬 通讯员 张猛、何春权;我科学家将开发海洋生物基因资源[N];光明日报;2000年
4 王雪飞;树突状细胞“面目”更清晰[N];健康报;2004年
5 王振岭;诱发心肌肥厚新基因被发现[N];健康报;2005年
6 记者 铁铮;野生动植物种质基因保护有了保证[N];中国绿色时报;2002年
7 曹文英 刘观浦;山农大选育出三个糯性小麦新品系[N];山东科技报;2005年
8 ;国际规范化的人基因功能和干细胞工程技术研究中心[N];科技日报;2003年
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1 唐勇;猪伪狂犬病鉴别诊断研究与猪繁殖与呼吸综合征病毒基因组序列的测定[D];华中农业大学;2004年
2 王颖;人参叶和根cDNA文库构建及表达序列标签分析[D];东北师范大学;2007年
3 柳淑芳;小尾寒羊多胎性状相关基因的鉴定和遗传研究[D];山东农业大学;2004年
4 陈晓红;慢性肝病患者组织cDNA文库的构建及用SEREX方法筛选HCC抗原[D];浙江大学;2005年
5 王海鸿;B型烟粉虱热休克蛋白基因的克隆和表达及其与胁迫耐受性关系的研究[D];中国农业科学院;2005年
6 白文涛;汉坦病毒受体的筛选及鉴定[D];第四军医大学;2005年
7 陈娟;可卡因安非他明调节转录肽相互作用蛋白的筛选[D];第二军医大学;2005年
8 余建秋;大熊猫基因资源库构建及粪便高质量DNA提取方法的建立[D];浙江大学;2006年
9 栾晶;文昌鱼钙结合蛋白基因的鉴定、表达与进化研究[D];中国海洋大学;2007年
10 于丽;金黄地鼠神经管cDNA文库的构建及高温致畸相关基因的筛选[D];山东大学;2005年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 李楠;青岛文昌鱼AmphiS28基因的克隆及进化分析[D];中国海洋大学;2004年
2 董娟;青岛文昌鱼GpHR基因的表达、鉴定及定位[D];山东理工大学;2010年
3 毕佳;青岛文昌鱼AmphiHSP 90基因克隆、组织表达及其免疫作用初步研究[D];山东大学;2011年
4 曹慧慧;青岛文昌鱼Sox1/2/3-like基因的扩增与表达研究[D];鲁东大学;2011年
5 陈维;青岛文昌鱼Amphisox9基因的克隆与表达研究[D];鲁东大学;2012年
6 王奕华;青岛文昌鱼遗传多样性的RAPD分析[D];中国海洋大学;2003年
7 荆晓丽;青岛文昌鱼谷丙转氨酶基因克隆、表达和功能研究[D];中国海洋大学;2010年
8 赵耀儒;墨胸胡蜂毒腺基因cDNA文库的构建[D];武汉大学;2004年
9 温钢;小鼠嗅球cDNA文库的构建[D];东北师范大学;2006年
10 王志成;棉花与膜结合的内切-1,4-β-葡聚糖酶基因的克隆及序列特征分析[D];湖南农业大学;2004年
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