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《山东农业大学学报(自然科学版)》 2011年03期
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鸡白细胞介素18成熟蛋白在昆虫杆状病毒系统中的表达及其活性检测

范忠玲  王婷婷  马凤龙  胡敬东  
【摘要】:首先将鸡白细胞介素18成熟蛋白(mature chicken interleukin-18,mChIL-18)基因亚克隆至杆状病毒转移载体pFastBac HTb上,然后转化至含穿梭载体Bacmid的受体菌E.coli DH10BacTM中,构建重组Bacmid(rBacmid)。通过脂质体介导法将纯化的rBacmid转染sf9细胞,获得完整重组杆状病毒,将达到一定滴度的重组杆状病毒感染sf9,收获感染后不同时间段的培养上清和细胞,经SDS-PAGE分析、Western-blotting和间接免疫荧光(IFA)检测,结果表明,分子量约为23KDa的重组蛋白在昆虫细胞中获得了表达;鸡淋巴细胞转化试验和水疱性口炎病毒(VSV)抑制试验表明,表达产物具有良好的生物学活性。结论:在杆状病毒表达系统中成功表达了有活性的mChIL-18蛋白。

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【参考文献】
中国期刊全文数据库 前2条
1 胡敬东,崔治中,赵宏坤;鸡IL-18cDNA的克隆及在大肠杆菌中的高效表达[J];畜牧兽医学报;2005年03期
2 郑玉姝;赵朴;赵宏坤;;鸡IL-2基因的扩增、表达及生物学活性鉴定[J];细胞与分子免疫学杂志;2006年05期
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前2条
1 田兆菊;郑玉姝;胡敬东;赵宏坤;;牛IL-18成熟蛋白基因在昆虫细胞中的表达及其活性[J];细胞与分子免疫学杂志;2007年03期
2 胡敬东;赵宏坤;崔治中;;鸡白细胞介素18成熟蛋白基因真核表达质粒的构建及其在鸡胚成纤维细胞中的表达[J];畜牧兽医学报;2006年01期
中国博士学位论文全文数据库 前2条
1 胡慧琼;四川山地乌骨鸡IL-2、15、18、IFN-γ基因克隆测序及分子佐剂效应研究[D];四川农业大学;2006年
2 田兆菊;牛IL-18成熟蛋白基因的表达、生物学活性测定及其单克隆抗体的制备[D];山东农业大学;2007年
中国硕士学位论文全文数据库 前1条
1 韩国全;猪传染性胃肠炎病毒SC-Y株M基因序列分析、原核表达研究及真核表达载体构建[D];四川农业大学;2006年
【同被引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 赵可伟;运动对白细胞介素-1、白细胞介素-2与白细胞介素-6影响的研究进展[J];首都体育学院学报;2005年05期
2 杨慈清,赵有璋,姚军;无角陶赛特不同杂交组合羔羊育肥对比试验[J];中国草食动物;2005年02期
3 杨炳壮,梁贤威,文秋燕,邹彩霞,覃广胜,廖朝辉,庞春英,梁坤;杂交水牛不同生长阶段主要血液生理生化指标的测定[J];中国草食动物;2005年04期
4 罗玉柱,韩建林;血液蛋白多态性与毛用山羊早期选育方案的研究[J];中国草食动物;1999年02期
5 杨慈清,赵有璋,姚军;无角陶赛特羊和蒙古羊及其杂种后代血液生理生化指标测定分析[J];甘肃农业大学学报;2005年03期
6 吕军峰;萨福克肉羊的特征特性及开发利用途径[J];甘肃农业科技;2003年05期
7 马森,王荣鑫,张才骏,李鉴轩;青海高原家畜生理生化参数[J];青海畜牧兽医杂志;1994年04期
8 谢庆英,晁生玉,才让吉,王少纯,红英,肖明;柴达木山羊血液生理指标的测定[J];青海畜牧兽医杂志;1999年04期
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10 冯敏山,李祥龙,刘铮铸,巩元芳,张建文;波尔山羊及波唐杂交一代山羊生长发育规律研究[J];中国畜牧杂志;2004年11期
中国博士学位论文全文数据库 前5条
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3 王海艳;重组鸡γ-干扰素,鸡白细胞介素-18,-2活性及生物学作用的研究[D];内蒙古农业大学;2004年
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5 刘文强;牛羊白细胞介素-18基因的克隆和表达[D];山东农业大学;2005年
【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前9条
1 温纳相,黄青云,陈金顶,曹素芳;鸡IL-18基因的克隆与序列测定[J];动物医学进展;2003年02期
2 邱玉华,於葛华,陈永井,赵文宝,潘建忠,朱华亭,谢炜,张学光;激发型CD28单抗直接激发的T细胞及其表型[J];上海免疫学杂志;2003年05期
3 邱玉华,张学光,季玉红,居颂光,王廷;鼠抗人CD28分子单克隆抗体的研制及生物学特性研究[J];细胞与分子免疫学杂志;2001年04期
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5 胡敬东,崔治中,赵宏坤;鸡IL-18cDNA的克隆及在大肠杆菌中的高效表达[J];畜牧兽医学报;2005年03期
6 姚利晓;孙安国;傅志强;刘金明;苑纯秀;蔡幼民;林矫矫;;日本血吸虫丝氨酸-苏氨酸蛋白磷酸酶基因的表达及其免疫保护试验[J];中国兽医科学;2006年02期
7 潘蔚绮,刘胜旺,孔宪刚,李广兴,夏春;编码鸡IL-18成熟蛋白基因的分子克隆与序列测定[J];中国预防兽医学报;2003年02期
8 秦爱建,邵红霞,钱琨,刘岳龙,金文杰;抗禽流感病毒H5和H9亚型血凝素特异性单克隆抗体的研制及应用[J];中国预防兽医学报;2003年03期
9 姚利晓;林矫矫;傅志强;朱传刚;李浩;陆珂;刘金明;石耀军;沈阳;蔡幼民;;日本血吸虫新基因SjPP的筛选、克隆及对小鼠的免疫效果[J];中国农业科学;2006年08期
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 范忠玲;王婷婷;马凤龙;胡敬东;;鸡白细胞介素18成熟蛋白在昆虫杆状病毒系统中的表达及其活性检测[J];山东农业大学学报(自然科学版);2011年03期
2 ;[J];;年期
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