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表达阳春砂HMGR及DXR基因的转基因烟草的构建

杨锦芬  Megha Nath Adhikari  黄琼林  吴淑显  徐晖  陈蔚文  
【摘要】:【目的】3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A还原酶(3-hydroxy-3-methylglutaryl coenzyme A reductase,HMGR)和1-去氧-D-木酮糖-5-磷酸还原异构酶(1-deoxy-D-xylulose-5-phosphate reductoisomerase,DXR)是萜类生物合成途径的上游关键酶,构建表达阳春砂HMGR及DXR基因的转基因烟草,以期在模式植物中分析基因的生物学功能。【方法】采用亚克隆的方法构建AvHMGR和AvDXR的重组植物表达载体,电击转化农杆菌EHA105,获得带有目的基因的工程农杆菌;通过农杆菌介导的叶盘转化法转化烟草,筛选转基因植株;采用半定量逆转录—聚合酶链反应(RT-PCR)法分析目的基因在转基因烟草中的表达情况。【结果】构建了重组植物表达载体pBI-AvHMGR和pBI-AvDXR及其工程菌;对转基因烟草的PCR检测结果证实AvHMGR和AvDXR已整合到烟草基因组中;目的基因在部分转基因植株中得到表达。【结论】已构建成功表达阳春砂HMGR及DXR基因的转基因烟草。

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