收藏本站
《中国热带医学》 2017年07期
加入收藏 投稿

PbrR大肠埃希菌外膜展示株体内外生长特性

吴晓燕  郭妍  惠长野  陈剑辉  高朝贤  曾新军  
【摘要】:目的考察Pbr R大肠埃希菌外膜展示株在不同条件下的体内外生长特性,为其体内定植驱铅能力的研究奠定基础。方法 15%SDS-PAGE分析不同浓度诱导剂L-阿拉伯糖诱导展示菌p BAD-loa-pbrr/DH10B的重组蛋白表达情况;铅平板敏感实验对比重组菌诱导及非诱导条件下在含铅平板上的菌落形成能力;体外培养实验考察诱导剂的加入对重组菌生长能力及耐铅能力的影响;通过混合共培养实验对比诱导条件下重组菌与空宿主菌的竞争生长能力;考察重组菌6 h内的胃酸耐受性;考察诱导剂及染菌方式对重组菌小鼠体内定植的影响。结果低至0.002%的L-阿拉伯糖即可诱导重组蛋白的高效表达;Pbr R展示菌对铅表现出了一定的耐受力;诱导剂引入后重组菌生长能力降低;重组菌对胃酸有较好的抗性,经口染菌方式重组菌可定植于小鼠肠道,但摄入L-阿拉伯糖水后,粪便中重组菌快速丢失,通过连续染菌方式可维持其定植水平。结论重组菌体内外培养实验结果表明,基于商品化的诱导型表达载体构建的展示菌难以表达重组蛋白的同时实现小鼠体内的稳定定植。
【作者单位】深圳市职业病防治院;
【关键词】铅结合蛋白 细菌外膜展示 体外生长特性 体内定植
【基金】:广东省自然科学基金(No.2015A030313838) 广东省医学科研基金(No.A2015307) 深圳市科技研发资金(No.JCYJ20150403091305481)
【分类号】:Q78;R595.2
【正文快照】:
WHO认为环境毒物中对儿童威胁最大的是铅,儿童铅中毒已成为一个全球性的公共安全问题,引起社会广泛关注。儿童是铅中毒的易感人群,铅可造成儿童神经、造血、免疫等多系统损害,并影响其智力及生长发育[1]。儿童血铅水平主要受室内外环境、饮食、生活习惯等诸多因素的影响,经口

【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 孟建华;;日两家公司计划用基因重组菌工业生产酶[J];生物工程进展;1988年01期
2 朱俊波;龙敏南;徐方成;邬小兵;徐惠娟;;Klebsiella oxytoca HP1 adhE基因插入失活法构建产氢重组菌[J];科学通报;2007年01期
3 陈丽;郭美锦;储炬;庄英萍;张嗣良;;拷贝数对毕赤酵母重组菌表达猪胰岛素前体的影响[J];化学与生物工程;2011年02期
4 周斌;程咏梅;邓超;刘卫超;陈潮梁;陈敬华;许正宏;;黄杆菌肝素酶Ⅱ重组菌培养条件的优化及高密度发酵[J];生物工程学报;2014年04期
5 冯美卿;史训龙;黄海;张金晨;周珮;;不同构建策略对D-氨基酸氧化酶表达的影响及发酵调节[J];复旦学报(医学版);2008年01期
6 丁波;孟庆玲;乔军;陈创夫;才学鹏;张再超;杨丽红;;单核细胞增生李斯特菌prfA基因重组菌的构建及其生物学特性研究[J];中国预防兽医学报;2012年09期
7 李环;陈悦;翁秋萍;朱大伟;韦萍;;argE基因的表达优化及Zn~(2+)添加时间和浓度的影响机制分析[J];过程工程学报;2007年06期
8 郭春叶;龚月生;刘林丽;曹雨莉;;酵母菌生长曲线的测定及其转葡萄芪合酶基因重组菌遗传稳定性的检测[J];安徽农业科学;2007年07期
9 马媛媛;邹少兰;张鲲;洪解放;井欣;刘成;张敏华;;半定量RT-PCR检测运动发酵单胞菌中外源基因转录水平的研究[J];微生物学通报;2009年06期
10 孙雨葳,廖世奇,张小爱,张雪力,王黎,张春梅,王晓辉;用PCR技术筛选小分子DNA重组菌落的研究[J];青海科技;2003年03期
中国重要会议论文全文数据库 前2条
1 杨健美;高崧;刘秀梵;;表达PWD和ED保护性抗原的两种重组菌的免疫原性初步研究[A];中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第六届全国会员代表大会暨第11次学术研讨会论文集[C];2005年
2 杨健美;高崧;刘秀梵;;表达PWD和ED保护性抗原的两种重组菌的免疫原性初步研究[A];第六届全国会员代表大学暨第11次学术研讨会论文集(上)[C];2005年
中国博士学位论文全文数据库 前5条
1 吕桂善;乳源抗高血压生物活性肽在大肠杆菌中表达的研究[D];东北农业大学;2003年
2 胡静涛;新城疫病毒HN基因重组乳酸菌抗小鼠结肠癌及免疫机制的初步研究[D];吉林大学;2015年
3 张大伟;微生物中生产辅酶Q_(10)的研究[D];北京化工大学;2007年
4 傅维琦;产5-氨基乙酰丙酸重组菌的优化和发酵过程调控研究[D];浙江大学;2009年
5 宿玲恰;重组Thermobifida fusca角质酶的高效胞外表达及其分子机制[D];江南大学;2013年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 蔡霞;黄色短杆菌基因组的初步分析及其产L-精氨酸重组菌的构建[D];华南理工大学;2015年
2 李华芳;结核分枝杆菌Rv0394c蛋白在粘附肺泡上皮细胞中的作用研究[D];中国农业科学院;2015年
3 范如婷;聚3-羟基丙酸重组菌构建及代谢调控[D];北京化工大学;2015年
4 董奇峰;恶臭假单胞重组菌YN-2S的聚合物材料固定及其吸附重金属离子的应用研究[D];华中农业大学;2013年
5 常颖;基因重组菌高效表达p53C蛋白及色谱纯化[D];天津大学;2014年
6 王杰;代谢工程改造大肠杆菌合成粘康酸的研究[D];江南大学;2015年
7 姚丽萍;蔗糖利用途径改造促进谷氨酸棒杆菌合成L—丝氨酸[D];江南大学;2016年
8 吴世雄;嗜酸热硫化叶菌MTSase和MTHase的异源表达及应用[D];江南大学;2016年
9 张彬彬;表达yenI基因的APEC重组菌的致病机理研究[D];扬州大学;2016年
10 罗爱红;青海弧菌荧光素酶基因重组菌的构建与初步应用[D];天津理工大学;2016年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62791813
  • 010-62985026