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《热带农业科学》 2009年04期
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巴西橡胶树叶片蛋白样品的制备及质谱初步分析

林秀琴  邓军  袁坤  王真辉  杨礼富  
【摘要】:采用TCA-丙酮沉淀法并稍做改进提取巴西橡胶树叶片总蛋白,蛋白溶解后,用试剂盒对蛋白上清液进行纯化和浓度测定。十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和双向凝胶电泳(2-DE)的结果均表明,所制得的蛋白样品质量较高,并且纯化过的蛋白样品2-DE(双向电泳)图谱效果更好(7cm,考染)。根据预实验结果,选用17cmIPG预制干胶条对纯化的蛋白样品进行2-DE实验,采用快速银染法进行染色,随机挖取银染胶上6个蛋白点进行MALDI-TOFMS分析和数据库检索,鉴定了3个蛋白,它们是:1-氨基环丙烷-1羧酸合酶2,核酮糖-1,5-二磷酸羧化酶/加氧酶大亚基和F11O4.2。本实验为进一步对巴西橡胶树叶片中具有重要生物学功能蛋白的筛选和鉴定打下了方法学基础。

【参考文献】
中国期刊全文数据库 前2条
1 陈伟,黄春梅,吕柳新;顽拗植物荔枝蛋白质双向电泳的改良方法[J];福建农业大学学报;2001年01期
2 丁坤善,郑彩霞,包仁艳,姜春宁;油松雌性不育系球果蛋白质双向电泳技术的建立[J];植物学通报;2005年02期
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 韩晓光;王玎;;羽衣甘蓝丛生芽诱导和植株再生研究[J];安徽农业科学;2006年03期
2 王恒旭;王文成;胡永华;王志坤;赵波;付巧玲;宁福政;胡俊成;盛奇;;杞县大蒜产区土壤及大蒜中营养元素化学特征研究[J];安徽农业科学;2006年06期
3 张少斌;刘慧;;双向电泳技术在植物蛋白质组研究中的应用[J];安徽农业科学;2006年10期
4 侯碧辉;孙桂芳;吉元;赵晨霞;王代殊;权雪玲;;电镜分析399生长剂对香椿等的叶表影响[J];北京工业大学学报;2007年01期
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8 张俊莲,张金文,陈正华,王蒂;植物Na~+/H~+逆向转运蛋白与植物耐盐性的研究进展[J];草原与草坪;2005年04期
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中国重要会议论文全文数据库 前5条
1 宋宇琴;崔芳;刘艳红;吴国良;王勇;;核桃枝条总酚和黄酮类物质含量的测定[A];第四届全国干果生产、科研进展研讨会论文集[C];2005年
2 范力仁;田惠卿;李茂松;罗文君;宋吉青;栗海峰;马睿;周东方;;吸水材料的水势及非金属矿物/高分子吸水保水复合材料的水势研究[A];第六届中国功能材料及其应用学术会议论文集(9)[C];2007年
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4 刘晓燕;何冰;许鸿源;周凤珏;梁琼月;;灵发素促进插条生根与IAAO,POD活性变化的关系[A];全国“植物生物技术及其产业化”研讨会论文摘要集[C];2007年
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中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 肖华山;荔枝(Litchi chinensis Sonn.)花性分化的细胞学及生理生化基础[D];福建农林大学;2002年
2 李彩凤;植物生长调节物质对甜菜(Beta Vulgaris L.)抽苔调控及其机理的研究[D];东北农业大学;2003年
3 林金科;茶树高EGCG的种质资源及外源诱导研究[D];福建农林大学;2003年
4 尹守东;红松和落叶松人工林养分生态学比较研究[D];东北林业大学;2004年
5 李天煜;稀脉萍(Lemna aequinoctialis)和紫萍(Spirodela polyrrhiza)的重金属生态毒理学研究[D];武汉大学;2003年
6 马李一;漂白紫胶水果保鲜剂的研制与应用研究[D];北京林业大学;2004年
7 康红梅;切花月季营养特性与诊断技术研究[D];北京林业大学;2004年
8 曹永兵;转录因子Caplp促进白念珠菌抗药性形成的分子机制研究[D];第二军医大学;2004年
9 张明如;太行山低山丘陵区植被恢复机理与构建模式[D];北京林业大学;2005年
10 刘凯于;粉纹夜蛾细胞对Bt Cry1Ac毒素的抗性特点及其机制的研究[D];华中师范大学;2005年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 李凤娟;红皮云杉种源间植物激素、硝酸还原酶和可溶性蛋白的遗传变异[D];东北林业大学;2002年
2 梁艳;白桦花发育不同时期内源激素及蛋白质变化分析[D];东北林业大学;2003年
3 徐幸福;桂花切花花瓣衰老过程中的蛋白质变化分析[D];华中农业大学;2003年
4 郭美丽;拟南芥隐性抗盐单基因突变体的筛选与鉴定[D];山西大学;2004年
5 张朝峰;镁和过氧化氢对萝卜液泡膜SV通道作用的膜片钳法研究[D];山西大学;2004年
6 何超;植物抗逆诱导剂IPT和SA对水稻RCI-1基因表达状况的影响[D];中国农业大学;2004年
7 王毓;抗逆诱导剂IPT和ABA对水稻悬浮细胞PAL、LOX基因表达状况的影响[D];中国农业大学;2004年
8 张玉平;帕金森病患者脑脊液蛋白质的双向凝胶电泳初步分析[D];重庆医科大学;2004年
9 郁晓敏;拟南芥低氮耐性突变体的筛选及其生理特性研究[D];浙江大学;2004年
10 郭立新;循环水培高等陆生植物系统对水产养殖废水的净化研究[D];浙江大学;2004年
【同被引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 潘建伟,潘伟槐,朱睦元;植物发育遗传学——一个新兴的遗传学分支[J];浙江大学学报(理学版);2002年05期
2 赵华燕,张景昱,刘惠荣,王台,宋艳茹,魏建华;抑制COMT与CCoAOMT调控植物木质素的生物合成[J];科学通报;2002年08期
3 彭世清,陈守才;巴西橡胶树Polyubiquitin基因5'调控序列的克隆及分析[J];农业生物技术学报;2002年01期
4 孔德謇;黄俊生;潘志强;;巴西橡胶树酯酶等同工酶酶谱初步研究[J];热带作物学报;1987年02期
5 鲁国东,郑学勤,谢联辉,陈守才;稻瘟病菌3-磷酸甘油醛脱氢酶基因的克隆及序列分析[J];热带作物学报;1998年04期
6 曾日中,白先权,黎瑜,谭海燕,郝秉中,吴继林;外源茉莉酸诱导巴西橡胶树乳管分化的酶学研究(Ι)[J];热带作物学报;2001年03期
7 陈雄庭,王泽云,吴胡蝶,张秀娟;橡胶树新种植材料——自根幼态无性系[J];热带作物学报;2002年01期
8 程汉;安泽伟;黄华孙;;巴西橡胶树CBF1基因的克隆和序列分析[J];热带作物学报;2005年03期
9 段翠芳;聂智毅;曾日中;;橡胶粒子膜蛋白双向电泳体系的建立和质谱初步分析[J];热带作物学报;2006年03期
10 张治礼,郑学勤;树木发育阶段理论及其在橡胶树育种中的应用(综述)[J];热带亚热带植物学报;2001年03期
中国博士学位论文全文数据库 前2条
1 彭世清;巴西橡胶树43KD橡胶粒子膜蛋白cDNA的克隆及表达[D];华南热带农业大学;2001年
2 王立岩;甘遂的化学成分及其生物活性的研究[D];沈阳药科大学;2003年
【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 马凯,高述民,胡青,程朋军,吴江黛,李凤兰;文冠果雄蕊发育的解剖学及雄性不育蛋白的研究[J];北京林业大学学报;2004年05期
2 林金科,郑金贵,袁明,张学琴,王凤;茶树蛋白质提取及双向电泳的改良方法[J];茶叶科学;2003年01期
3 陈伟,黄春梅,吕柳新;顽拗植物荔枝蛋白质双向电泳的改良方法[J];福建农业大学学报;2001年01期
4 詹显全,陈主初;蛋白质组中蛋白质鉴定技术的研究近况[J];国外医学.分子生物学分册;2002年03期
5 程国栋,龚明月;蛋白质组研究进展[J];黄山学院学报;2004年03期
6 司晓敏,李巧云,晏月明;蛋白质组技术及小麦蛋白质组研究进展[J];麦类作物学报;2005年03期
7 刘勇,张峻华;蛋白质组学研究进展及展望[J];内江师范学院学报;2003年02期
8 孟慧;段翠芳;曾日中;;植物蛋白质组学研究概况[J];热带农业科学;2006年02期
9 郭尧君;SDS电泳技术的实验考虑及最新进展[J];生物化学与生物物理进展;1991年01期
10 李民,周宗灿;蛋白质芯片[J];生命的化学;2001年02期
【相似文献】
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1 刘伟;翟金玲;许慧敏;黄惜;;橡胶HbJAZ1基因的原核表达与纯化分析[J];热带生物学报;2011年02期
2 喻修道;王真辉;袁坤;杨礼富;;巴西橡胶树胚胎晚期丰富蛋白基因的克隆及序列分析[J];热带作物学报;2011年07期
3 陈鑫;朱家红;张治礼;;巴西橡胶树钙调蛋白基因的克隆及表达分析[J];中国农学通报;2011年22期
4 姜泽海;周权男;李哲;;巴西橡胶树树根组织培养外植体消毒研究[J];安徽农业科学;2011年17期
5 李言;杨署光;陈月异;田维敏;;渗透胁迫与植物激素等对巴西橡胶树HbMT2a基因表达的影响[J];热带作物学报;2011年05期
6 谭德冠;吴煜;孙雪飘;付莉莉;马帅;张家明;;巴西橡胶树游离小孢子培养[J];热带作物学报;2011年05期
7 陈月异;杨署光;杨武;田维敏;;巴西橡胶树乳管细胞HbWRKY1基因克隆及表达分析[J];热带作物学报;2011年06期
8 Paulode Souza Goncalves;田郎;;几个橡胶无性系茎围生长和干胶产量的基因型×环境互作及稳定性分析[J];世界热带农业信息;2011年06期
9 张世鑫;刘世彪;田维敏;;形成层活动对机械伤害诱导巴西橡胶树次生乳管分化的影响[J];热带作物学报;2011年06期
10 谭德冠;孙雪飘;付莉莉;马帅;张家明;;巴西橡胶树花药体胚发生类型及其培养条件的改良[J];热带作物学报;2011年07期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 王立丰;田维敏;;白粉病和衰老对巴西橡胶树叶片线粒体结构和功能的影响[A];第九届全国植物结构与生殖生物学学术研讨会论文摘要集[C];2010年
2 刘先宝;蔡吉苗;高宏华;潘羡心;彭建华;张科立;李超萍;陈瑶;时涛;黄贵修;;巴西橡胶树棒孢霉落叶病及其鉴定[A];生物入侵与生态安全——“第一届全国生物入侵学术研讨会”论文摘要集[C];2007年
3 杨署光;陈月异;史敏晶;田维敏;;茉莉酸信号途径与天然橡胶生产[A];第九届全国植物结构与生殖生物学学术研讨会论文摘要集[C];2010年
4 李惠波;周堂英;;橡胶树新品种云研77-2和云研77-4的细胞学鉴定及育种历程总结[A];云南省热带作物学会第七次代表大会暨2009年学术年会会议材料[C];2009年
5 张欣;张贺;蒲金基;漆艳香;谢艺贤;;一种新的巴西橡胶树棒孢霉落叶病菌产孢方法——纸片法[A];中国植物病理学会2008年学术年会论文集[C];2008年
6 胡彦师;曾霞;黄华孙;方家林;安泽伟;;橡胶树新种质主要性状鉴定评价研究报告——1994年定植大田新种质鉴定评价[A];中国热带作物学会2005年学术(青年学术)研讨会论文集[C];2005年
7 史敏晶;田维敏;;巴西橡胶树乳管伤口堵塞物形成机制的研究[A];第九届全国植物结构与生殖生物学学术研讨会论文摘要集[C];2010年
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9 刘世彪;林位夫;郝秉中;吴继林;胡正海;;巴西橡胶树嫁接接合区接穗和砧木径向生长差异的研究[A];中国植物学会七十周年年会论文摘要汇编(1933—2003)[C];2003年
10 罗雪华;邹碧霞;吴菊群;杨俐苹;;氮素对巴西橡胶树花药苗生长及氮代谢、光合作用的影响[A];中国植物营养与肥料学会2010年学术年会论文集[C];2010年
中国博士学位论文全文数据库 前6条
1 谭德冠;巴西橡胶树体胚发生的改良及乳管分化研究[D];海南大学;2011年
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4 张云霞;巴西橡胶树HbMyb1调控基因的克隆及表达[D];华南热带农业大学;2005年
5 刘晓妹;巴西橡胶树棒孢霉落叶病病菌MAPK基因(CCK1)和毒素基因(ct)克隆与功能鉴定[D];海南大学;2012年
6 何鹏;低磷胁迫下橡胶树的生理应答及SSH文库构建与分析[D];海南大学;2011年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 祝建顺;巴西橡胶树HbEBP1基因表达及其功能研究[D];海南大学;2010年
2 王亚丽;巴西橡胶树体外体细胞胚发育的细胞学和组织学研究[D];华南热带农业大学;2004年
3 庄海燕;巴西橡胶树水通道蛋白基因cDNA的克隆及其在乙烯利刺激下表达的初步分析[D];西北农林科技大学;2010年
4 史敏晶;外源茉莉酸的移动与巴西橡胶树次生乳管分化的研究[D];华南热带农业大学;2004年
5 苏文潘;橡胶树遗传转化的研究[D];华南热带农业大学;2005年
6 邱海燕;巴西橡胶树REF、RT和SRPP基因物理定位的研究[D];海南大学;2010年
7 孟春晓;巴西橡胶树割胶后乳管伤口封闭机制的研究[D];华南热带农业大学;2002年
8 李凯;拟南芥CBF3基因转化巴西橡胶树的研究[D];海南大学;2010年
9 张全琪;巴西橡胶树HbWRKY1转录因子基因的克隆与功能鉴定[D];海南大学;2010年
10 郑杰;不同生长期橡胶苗木对乙烯利伤害敏感性的研究[D];华南热带农业大学;2007年
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