用于检测芳香烃类化合物的重组细胞构建

【摘要】：芳香烃类化合物是自然界中广泛存在的一类对人体健康有重要影响的物质。芳香烃受体(AhR)是配体依赖性转录因子,能够被多种天然或化学合成的物质激活,介导AhR配体的毒性效应和生物学效应。为了探究AhR对其配体的应答,实验利用质粒pGl4.43[luc2P/XRE/Hygro]转染鼠肝癌细胞Hepa1.6和人肝癌细胞HepG2,构建了两株受XRE应答元调控的、以荧光素酶作为报告基因的重组细胞株。浓度为100pM的二噁英(TCDD)即能诱导此细胞株荧光素酶活性值升高,且重组细胞的荧光素酶活性值呈浓度依赖性。为了验证实验结果的准确性,利用TCDD、FICZ刺激野生型鼠肝癌细胞Hepa1.6和人肝癌细胞HepG2,检测细胞色素酶CYP1A1、CYP1B1的表达量,结果与重组细胞株呈现相同的趋势。因此,本实验成功构建了应答芳香烃类化合物的高灵敏细胞系,可以利用构建的重组细胞系对芳香烃类化合物进行检测,也可用于探究AhR配体对AhR的调控机制。

【作者单位】： 中国农业科学院农业质量标准与检测技术研究所农业部农产品质量安全重点实验室;
【关键词】： 芳香烃 重组细胞 荧光素酶 AhR 细胞色素酶
【基金】：国家自然科学基金面上项目“食源性内分泌干扰物诱导的芳香烃受体与雌激素受体互作机理研究”(31371779)
【分类号】：Q5-33
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