收藏本站
《农业生物技术学报》 2009年05期
收藏 | 投稿 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

新型cry7Ab基因的鉴定、克隆、表达与杀虫活性

邓淑  束长龙  林毅  宋福平  张杰  
【摘要】:应用PCR-RFLP法鉴定出苏云金芽胞杆菌(Bacillus thuringiensis,Bt)HQ40中含有cry7Ab基因,并根据cry7A全长基因序列设计特异性引物,成功地克隆了该基因。该基因核苷酸序列已在GenBank中登录,登录号为EU380678,并由Btδ-内毒素基因国际命名委员会正式命名为cry7Ab4。通过穿梭载体pSTK将该基因导入Bt无晶体突变株中,获得工程菌HD7Ab4。SDS-PAGE分析表明,cry7Ab4基因在其中能正常表达,并形成菱形晶体。提取工程菌HD7Ab4和野生菌HQ40晶体蛋白,并在体外用胰蛋白酶酶解活化。分别对直翅目、鳞翅目和鞘翅目的害虫进行了杀虫活性测定。结果表明,Cry7Ab4蛋白trypsin酶解液对鞘翅目的大猿叶甲(Colophellus bowringi)显示了一定的杀虫活性,其野生菌蛋白及表达蛋白酶解液LC50分别为231.59μg/mL和293.79μg/mL。但对鳞翅目的小菜蛾(Plutella xylostella)、甜菜夜蛾(Spadoptera exigua)、亚洲玉米螟(Ostrinia fur-nacalis)、马铃薯甲虫(Leptinotarsa decemlineata)、榆蓝叶甲(Pyrrhalta aenescens)和直翅目的东亚飞蝗(Oroental migratory locust)基本无杀虫活性。

手机知网App
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 吴昌标;;源自动物粪便苏云金芽胞杆菌的cry基因型鉴定[J];福建农林大学学报(自然科学版);2010年01期
2 竺利红;施跃峰;吴吉安;梁建根;李翀;;苏云金芽胞杆菌Bt9875杀虫晶体蛋白可诱导Caspase和Bcl-2家族参与调控HL-60细胞凋亡[J];农业生物技术学报;2010年01期
3 ;转基因水稻[J];北京农业;2010年11期
4 蔡福营;樊云;张光亚;林毅;;杀虫晶体蛋白对小菜蛾杀虫活性的识别预测[J];华侨大学学报(自然科学版);2009年01期
5 刘东;陈月华;蔡峻;肖亮;刘传;;苏云金芽胞杆菌几丁质酶B特性及其杀虫抑真菌的作用[J];微生物学报;2009年02期
6 伍金元;冯纪年;张兴;;苏云金芽孢杆菌杀虫晶体蛋白基因cry1 Ab22的克隆与表达[J];西北农林科技大学学报(自然科学版);2009年01期
7 陈丽珍;林毅;张杰;;苏云金芽胞杆菌杀虫蛋白增效物质与增效机理[J];植物保护;2009年01期
8 朱军;谭芙蓉;余秀梅;关鹏;唐杰;王世全;郑爱萍;李平;;四川盆地生态区苏云金芽胞杆菌cry基因的鉴定及新型模式cry基因的克隆[J];微生物学报;2009年03期
9 刘廷辉;郭巍;申建茹;;苏云金芽胞杆菌GS8菌株的生物学特性及其cry基因型鉴定[J];农药学学报;2009年01期
10 李青;刘华梅;丁咏梅;陈振民;宋福平;张杰;;几株具有杀虫特异性的苏云金芽胞杆菌菌株的生物活性及杀虫蛋白基因型的鉴定[J];现代农业科学;2009年04期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 苏慧琴;束长龙;张杰;高继国;宋福平;;利用高分辨熔点仪鉴定苏云金芽胞杆菌cry9类基因[A];粮食安全与植保科技创新[C];2009年
2 周琳;李超;束长龙;宋福平;张杰;;不动杆菌Acinetobacter baylyi ADP1检测转基因水稻外源基因转移模型的建立[A];粮食安全与植保科技创新[C];2009年
3 郎志宏;李艳萍;李国勋;黄大昉;;多基因融合表达载体的构建及对烟草的遗传转化[A];全国植物分子育种研讨会摘要集[C];2009年
4 谭芙蓉;唐雪明;;四川生态区苏云金芽胞杆菌资源的筛选鉴定及其新型杀虫基因的克隆表达研究[A];第二届上海市植物生理学青年学术研讨会论文摘要集[C];2008年
5 潘洁茹;陈丽仙;黄天培;关雄;;荧光差异显示技术在Bt上的初步应用[A];2008年福建省科协第八届学术年会农业分会场论文集[C];2008年
6 周帼萍;闫建平;郑大胜;周晓慧;袁志明;;苏云金芽胞杆菌在食品中分布及来源分析[A];中国微生物学会《第二届全国农业微生物研究及产业化研讨会》和《第十一届全国杀虫微生物学术研讨会》暨《湖北省暨武汉市微生物学会和内蒙古微生物学会2008年会》论文摘要[C];2008年
7 ;会议安排[A];中国微生物学会《第二届全国农业微生物研究及产业化研讨会》和《第十一届全国杀虫微生物学术研讨会》暨《湖北省暨武汉市微生物学会和内蒙古微生物学会2008年会》论文摘要[C];2008年
8 宋春旭;赵昌明;喻子牛;孙明;;Zwittermicin A合成基因簇中腺苷酰化功能域的预测、表达与活性验证[A];中国微生物学会《第二届全国农业微生物研究及产业化研讨会》和《第十一届全国杀虫微生物学术研讨会》暨《湖北省暨武汉市微生物学会和内蒙古微生物学会2008年会》论文摘要[C];2008年
9 赵昌明;刘晓艳;罗毅;宋春旭;阮丽芳;喻子牛;孙明;;苏云金芽胞杆菌中两种非蛋白质杀虫物质的生物合成途径[A];中国微生物学会《第二届全国农业微生物研究及产业化研讨会》和《第十一届全国杀虫微生物学术研讨会》暨《湖北省暨武汉市微生物学会和内蒙古微生物学会2008年会》论文摘要[C];2008年
10 关雄;;苏云金芽胞杆菌新资源及其生物活性因子研究[A];中国微生物学会《第二届全国农业微生物研究及产业化研讨会》和《第十一届全国杀虫微生物学术研讨会》暨《湖北省暨武汉市微生物学会和内蒙古微生物学会2008年会》论文摘要[C];2008年
中国重要报纸全文数据库 前4条
1 本报记者 李徽;技改创新独领风骚[N];宁夏日报;2010年
2 上海农科热线供稿;应对转基因水稻严格进行安全性评价[N];东方城乡报;2010年
3 谈海亮 金安江;“转基因抗虫水稻品种培育”在华中农大启动[N];农民日报;2009年
4 本报记者 牛海卫 余平凡 通讯员 王景刚;以创新成果推动农业微生物发展[N];科学时报;2002年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 赵新民;苏云金芽胞杆菌Cry1Ac蛋白的结构与功能及其与20-kb DNA相互作用的研究[D];湖南师范大学;2009年
2 闫贵欣;对金龟甲科、叶甲科害虫高毒力苏云金芽胞杆菌杀虫基因及工程菌的研究[D];中国农业科学院;2009年
3 刘廷辉;苏云金芽胞杆菌菌株Bt11和GS8的研究[D];河北农业大学;2009年
4 任羽;苏云金芽胞杆菌杀虫晶体蛋白Cry1Ca7分子设计[D];中国农业科学院;2008年
5 付祖姣;苏云金芽胞杆菌4.0718新菌株功能基因组的研究和高效杀虫工程菌的构建[D];湖南师范大学;2008年
6 郑毅;苏云金芽孢杆菌FS140菌株蛋白酶的研究[D];福建农林大学;2008年
7 刘小锦;苏云金芽胞杆菌菌株YBT-1520基因组中TA系统的研究[D];华中农业大学;2008年
8 郭刚;苏云金芽胞杆菌S-层蛋白形成内涵体的研究[D];华中农业大学;2008年
9 余洁;苏云金芽胞杆菌杀线虫菌株的筛选及其活性因子研究[D];福建农林大学;2008年
10 余子全;苏云金芽胞杆菌杀线虫蛋白基因cry6Aa的表达负调控及杀线虫蛋白进入根结线虫体内的模式[D];华中农业大学;2008年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 袁灿;苏云金芽胞杆菌Cry1Ac毒蛋白对棉铃虫中肠BBMV蛋白质组的影响[D];湖南师范大学;2009年
2 张茜茜;苏云金芽胞杆菌spoⅢD基因功能的研究[D];中国农业科学院;2009年
3 谢月霞;苏云金芽胞杆菌杀虫基因的鉴定与克隆[D];河北农业大学;2009年
4 张静涛;新型cry2基因克隆、表达及活性分析[D];中国农业科学院;2009年
5 刘楠;苏云金芽胞杆菌新cry基因克隆、表达与杀虫功能研究[D];东北农业大学;2009年
6 邵小虎;苏云金芽胞杆菌自溶素蛋白用于构建表面展示系统的研究[D];华中农业大学;2009年
7 黄新凤;利用AcmA蛋白在乳酸乳球菌表面展示锰超氧化物歧化酶[D];华中农业大学;2009年
8 李淑云;H5N1禽流感病毒血凝素蛋白的表位预测及重组表达[D];华中农业大学;2009年
9 卢林静;外源抗原在蜡样芽胞杆菌细胞表面展示的可行性研究[D];华中农业大学;2009年
10 刘要;苏云金杆菌芽胞中华亚种中一种具有杀线虫活性新毒素的初步鉴定及其与苏云金素的代谢关系[D];华中农业大学;2009年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62791813
  • 010-62985026