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《农业生物技术学报》 2009年01期
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荧光RT-PCR鉴别诊断O型与Asia Ⅰ型口蹄疫病毒方法的建立

薄清如  罗宝正  杨素  徐海聂  沙才华  罗吉新  
【摘要】:从GenBank中获取多个口蹄疫病毒(Foot-and-mouth disease virus,FMDV)基因组序列,进行多序列比对之后,设计对应于口蹄疫病毒的3D、VP3和3C区域的引物和探针,分别建立了FMDV群特异性实时荧光RT-PCR、O型特异性实时荧光RT-PCR和AsiaⅠ型特异性实时荧光RT-PCR检测方法。三种FMDV实时荧光RT-PCR在Lightcycler荧光PCR仪上扩增均出现标准的S型曲线,并且具有良好的特异性,可以很好地将FMDV与传染性牛鼻气管炎病毒(Infectious bovine rhinotracheitisvirus)、猪传染性胃肠炎病毒(Swine transmissible gastroenteritis virus)、赤羽病病毒(Akabane virus)和猪呼吸系统冠状病毒(Porcine respiratory corona virus)区分。FMDV群特异性实时荧光RT-PCR可以成功扩增O型(O1和O2毒株)和AsiaⅠ型(AsiaⅠ1和AsiaⅠ2毒株)FMDV;O型特异性实时荧光RT-PCR可成功扩增O型(O1和O2毒株)FMDV,AsiaⅠ型(AsiaⅠ1和AsiaⅠ2毒株)FMDV为阴性;AsiaⅠ型特异性实时荧光RT-PCR可成功扩增AsiaⅠ型(AsiaⅠ1和AsiaⅠ2毒株)FMDV,O型(O1和O2毒株)FMDV为阴性。FMDV群特异性实时荧光RT-PCR、O型特异性实时荧光RT-PCR和AsiaⅠ型特异性实时荧光RT-PCR都可以检测到10个拷贝的模板,灵敏度接近检测方法的极限。检测时间短,从加样到反应结束只需要70 min。该方法有潜力用于FMDV的实验室筛查与鉴别诊断。

【引证文献】
中国期刊全文数据库 前1条
1 邱杨;赵丽;卢小雨;刘建丽;兰文生;王伟;陈进会;;五种动物疫病诊断方法研究进展[J];动物医学进展;2012年12期
【参考文献】
中国期刊全文数据库 前2条
1 朱彩珠,卢永干,邱孝高,赵启祖,谢庆阁,张维德,员美蓉,杨福荣,张强;应用反转录-聚合酶链反应检测口蹄疫病毒[J];病毒学报;1998年03期
2 花群义,金宁一,周晓黎,董俊,杨云庆,徐自忠;应用实时荧光定量TaqManRT-PCR检测口蹄疫病毒[J];中国兽医学报;2005年02期
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 张险朋;兰婷妹;赖笑娴;;实时荧光PCR技术在动物疫病诊断中的应用[J];动物医学进展;2006年03期
2 钟金栋;花群义;肖荣海;夏雪山;杨云庆;周晓黎;董俊;邓祖洪;;多重PCR同时检测口蹄疫病毒、猪水疱病病毒和水疱性口炎病毒[J];动物医学进展;2006年07期
3 李乐;苗海生;;口蹄疫病毒非型特异性检测方法研究进展[J];动物医学进展;2010年03期
4 吕建强;杨俊兴;花群义;曹琛福;张彩虹;陶虹;刘建利;阮周曦;;口蹄疫病毒抗原胶体金试纸条的研究[J];动物医学进展;2012年03期
5 陈文炳,王志明,李寿崧,朱晓南,邵碧英,江树勋,陈艳,陈亮;分子标记在动植物检验检疫与GMO产品检测中的应用[J];福建农业大学学报;2004年04期
6 宋敏,何孔旺,胡建民;用RT-PCR方法检测口蹄疫病毒[J];黑龙江畜牧兽医;2005年04期
7 胡晓亮;林欢;姜骞;李春艳;曲连东;;口蹄疫诊断技术的研究进展[J];黑龙江畜牧兽医;2011年17期
8 朱文钏;孔繁德;林祥梅;徐淑菲;吴德峰;韩雪清;吴绍强;;口蹄疫检测技术的研究进展与应用[J];经济动物学报;2009年03期
9 王伊琴,包勇敢,杜美英,张新兰;口蹄疫在口岸中的检疫及消毒技术[J];内蒙古畜牧科学;2002年06期
10 温立斌;何孔旺;杨汉春;倪艳秀;吕立新;张雪寒;茅爱华;;猪抗病毒蛋白基因重组质粒实时荧光定量PCR标准曲线的建立[J];中国农业大学学报;2009年02期
中国重要会议论文全文数据库 前2条
1 姚军;周婷;王强;;蜜蜂克什米尔病毒及其他病毒病检测的研究进展[A];中国养蜂学会蜜蜂保护专业委员会第九次学术研讨会专辑[C];2003年
2 查成刚;吴绍强;林祥梅;韩雪清;刘建;贾广乐;梅琳;;应用荧光RT-PCR检测亚欧型口蹄疫病毒[A];中国畜牧兽医学会2008年学术年会暨第六届全国畜牧兽医青年科技工作者学术研讨会论文集[C];2008年
中国博士学位论文全文数据库 前6条
1 任林柱;口蹄疫病毒反向遗传技术体系及分子标记疫苗株的构建[D];吉林大学;2007年
2 苏春霞;口蹄疫基因工程疫苗重组策略的探讨[D];南京农业大学;2007年
3 王开宇;口蹄疫基因工程疫苗免疫效果的评价与机制研究[D];第二军医大学;2008年
4 康波;籽鹅卵巢组织基因差异表达及产蛋相关基因定量的研究[D];吉林大学;2009年
5 李勇;口蹄疫病毒3C(D)蛋白与宿主细胞因子Fascin-1相互作用研究[D];武汉大学;2010年
6 蒋韬;免疫层析技术在口蹄疫POCT中的应用研究[D];甘肃农业大学;2012年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 吉艳红;口蹄疫病毒感染PK-15细胞后细胞基因表达谱变化的分析[D];中国农业科学院;2011年
2 赵俊;豚鼠模型评价牛口蹄疫Asia-1型灭活疫苗效力的研究[D];中国农业科学院;2011年
3 程军;柔嫩艾美耳球虫抗药性相关基因M_(20)的克隆及检测方法的建立[D];上海师范大学;2011年
4 宋军;牛Asia1型口蹄疫病毒3A非结构蛋白B细胞线性抗原表位鉴定[D];东北农业大学;2011年
5 王家福;牛O型口蹄疫高倍浓缩灭活疫苗的研制[D];中国农业大学;2005年
6 王钢;口蹄疫病毒VP1基因的序列分析及巢式PCR检测研究[D];四川农业大学;2005年
7 段廷云;H1N1亚型SIV河南株的分离鉴定、HA基因的克隆和序列分析及荧光定量PCR诊断方法的建立[D];河南农业大学;2006年
8 石鑫;泡菜中蛔虫卵分子鉴定技术研究[D];内蒙古农业大学;2006年
9 曲哲会;口蹄疫病毒RT-PCR与抗体ELISA检测方法的建立及初步应用[D];东北农业大学;2006年
10 赵建军;鉴别猪瘟病毒野毒株和兔化弱毒疫苗株的复合实时荧光定量RT-PCR方法的建立与评价[D];中国农业科学院;2007年
【同被引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 王建东;郭建宏;杨春生;刘在新;;基因芯片技术及口蹄疫病毒基因芯片研究进展[J];动物医学进展;2007年S1期
2 杨鹏辉;杨潞芳;王希良;;流感病毒呼吸道黏膜感染免疫防御机制的研究进展[J];国际免疫学杂志;2006年05期
3 吕翠;马小明;尹燕博;单虎;;猪流感病毒M基因核酸探针的制备与应用[J];华北农学报;2009年01期
4 武刚;王洪梅;刘晓;宋玲玲;陈莉莉;仲跻峰;何洪彬;;口蹄疫诊断技术研究进展[J];家畜生态学报;2011年02期
5 张鑫宇;孙怀昌;刘文俊;夏晓莉;成大荣;;非洲猪瘟病毒p72基因的纳米金探针研究[J];扬州大学学报(农业与生命科学版);2011年01期
6 池海蓬;于闯;赵崇;张维震;孙健;;高致病性猪蓝耳病现场诊断及预防措施[J];现代畜牧兽医;2009年08期
7 叶芬;蔡家利;;猪瘟诊断方法的研究进展[J];四川畜牧兽医;2010年09期
8 刘明;徐娜;李志勇;柳纪省;;口蹄疫诊断技术的研究进展[J];生物技术通报;2010年05期
9 李国娟;柳纪省;李宝玉;田永强;;猪流感的诊断技术研究进展[J];生物技术通报;2010年06期
10 杨若松;姜金庆;张志;李晓成;王建华;任夫波;张丽丽;;4种猪群常见病毒基因芯片检测方法的建立与应用[J];西北农林科技大学学报(自然科学版);2012年03期
中国硕士学位论文全文数据库 前2条
1 王元;PRRSV NVDC-JXA1株膜基质蛋白单克隆抗体的研制及冰冻切片免疫荧光技术快速检测PRRSV抗原[D];新疆农业大学;2009年
2 王海静;应用SPR生物传感器快速检测A型流感病毒研究[D];河北师范大学;2010年
【相似文献】
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1 毕研丽;沈小燕;才学鹏;从国正;常惠芸;;用口蹄疫病毒非结构蛋白区分注苗动物和自然感染动物研究进展[J];生物技术通讯;2008年03期
2 朱咏梅;朱来华;郑小龙;王宫璞;王琰;;口蹄疫非结构蛋白研究进展[J];中国动物检疫;2011年05期
3 吉艳红;刘艳红;;用口蹄疫病毒非结构蛋白鉴别感染动物与疫苗免疫接种动物[J];动物医学进展;2009年10期
4 王冰;周国辉;涂亚斌;朴范泽;于力;;口蹄疫病毒vp3-间接免疫荧光诊断方法的建立[J];黑龙江八一农垦大学学报;2008年02期
5 刘高生,卢升云,贾国富;猪体水疱伴有发热性疫病的鉴别诊断[J];山东畜牧兽医;2005年04期
6 罗宝正,薄清如,陈金顶,王伟毅,程钢,何蕴韶;昆虫杆状病毒系统表达口蹄疫病毒3ABC基因[J];中国病毒学;2005年03期
7 邹学刚;;猪口蹄疫和水泡病、水泡性口炎、猪水泡性疹的鉴别诊断[J];北方牧业;2010年05期
8 罗宝正,薄清如,王伟毅,程钢,何蕴韶;口蹄疫病毒非结构蛋白3ABC基因的克隆与原核表达[J];农业生物技术学报;2005年02期
9 唐玉芳;;浅析猪口蹄疫、水疱病及痘病的鉴别诊断[J];畜禽业;2006年13期
10 查成刚;吴绍强;林祥梅;韩雪清;刘建;贾广乐;梅琳;;应用荧光RT-PCR检测亚欧型口蹄疫病毒[J];中国动物检疫;2009年01期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 杨鑫;王红宁;周英顺;高荣;曾博;徐昌文;丁梦蝶;;猪源O型口蹄疫病毒分离株VP1基因特征分析[A];四川省动物学会第九次会员代表大会暨第十届学术研讨会论文集[C];2011年
2 邬苏晓;刘镇明;罗满林;戚一达;;口蹄疫病毒3ABC基因的原核表达[A];中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会成立20周年庆典暨第十次学术研讨会论文集(上)[C];2003年
3 邱杨;肖性龙;刘建丽;李惠芳;张经纬;余以刚;吴晖;;口蹄疫通用型实时荧光RT-PCR检测方法的建立[A];中国畜牧兽医学会2009学术年会论文集(下册)[C];2009年
4 潘群兴;王永山;何孔旺;欧阳伟;王晓丽;诸玉梅;夏兴霞;;重组口蹄疫病毒T细胞表位基因的猪细小病毒VP2蛋白病毒样颗粒的构建[A];中国畜牧兽医学会兽医公共卫生学分会第二次学术研讨会论文集[C];2010年
5 李夏莹;王建昌;郑世军;;口蹄疫病毒VP1,2C蛋白与宿主细胞相互作用机制的研究[A];中国畜牧兽医学会兽医公共卫生学分会第三次学术研讨会论文集[C];2012年
6 张洪勇;金宁一;;口蹄疫病毒RNA组成、功能及分子致病机制的研究进展[A];中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会成立20周年庆典暨第十次学术研讨会论文集(下)[C];2003年
7 鲁会军;韩松;郑敏;贾雷立;王凯;金宁一;;口蹄疫病毒3AB基因在重组杆状病毒中的表达及检测[A];人畜共患传染病防治研究新成果汇编[C];2004年
8 张洪勇;金宁一;;口蹄疫病毒分子流行病学的研究进展[A];中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会成立20周年庆典暨第十次学术研讨会论文集(下)[C];2003年
9 郑敏;金宁一;张洪勇;刘棋;韦婷;郭建刚;李华明;尹革芬;鲁会军;;口蹄疫病毒O/NYOO株的分子生物学特性研究[A];中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会成立20周年庆典暨第十次学术研讨会论文集(下)[C];2003年
10 郝雪梅;;口蹄疫流行病学及防制措施[A];中国畜牧兽医学会2008年学术年会暨第六届全国畜牧兽医青年科技工作者学术研讨会论文集[C];2008年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 ;昏迷的诊断要点及鉴别诊断[N];农村医药报(汉);2006年
2 主任医师 陈福新;时间对精神疾病鉴别诊断的意义[N];医药经济报;2010年
3 张洪让 辛崇兴 王孝荣;猪拉稀症候群的鉴别诊断[N];中国畜牧兽医报;2005年
4 贺泽龙;评《中医诊断与鉴别诊断学》[N];中国中医药报;2000年
5 张洪让 韦有奎;猪呼吸道症侯群的鉴别诊断[N];中国畜牧报;2004年
6 武汉大学人民医院精神卫生中心主任医师 王晓萍;急性焦虑症 鉴别诊断最关键[N];健康报;2010年
7 庞文;鸡流行性大肠杆菌病鉴别诊断[N];河北科技报;2001年
8 肖祥云;五种急症的鉴别诊断[N];保健时报;2005年
9 邱玲;专家教您学看化验单[N];农村医药报(汉);2008年
10 张洪让 王孝荣;猪流产症候群的鉴别诊断[N];中国畜牧报;2005年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 李勇;口蹄疫病毒3C(D)蛋白与宿主细胞因子Fascin-1相互作用研究[D];武汉大学;2010年
2 孙萌;口蹄疫病毒VP1抗原基因在模式植物叶绿体中的重组和表达[D];浙江大学;2003年
3 吴雨霞;口蹄疫病毒结构蛋白VP1基因在原核和真核细胞中的表达[D];甘肃农业大学;2003年
4 朱远茂;表达口蹄疫病毒结构蛋白VP1重组牛疱疹病毒1型的构建及其免疫研究[D];东北农业大学;2010年
5 邵寒娟;A、O型口蹄疫双价疫苗研究[D];厦门大学;2004年
6 白兴文;我国O型泛亚1系口蹄疫病毒表型差异的分子基础[D];中国农业科学院;2012年
7 洪琦;口蹄疫—伪狂犬病二价与口蹄疫—猪细小—伪狂犬病三价基因工程疫苗的研究[D];华中农业大学;2005年
8 潘丽;口蹄疫病毒免疫原基因在番茄和拟南芥中的表达及转基因番茄动物免疫试验[D];中国农业科学院;2005年
9 易建中;抗A型口蹄疫病毒和O型口蹄疫病毒重组双价多肽疫苗研究[D];复旦大学;2005年
10 金明兰;口蹄疫病毒基因重组鸡痘病毒活载体疫苗系统鉴定研究[D];吉林大学;2007年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 阮力;检测口蹄疫病毒基因芯片技术与3B-ELISA鉴别诊断方法研究[D];华中农业大学;2005年
2 王冰;口蹄疫病毒3ABC-ELISA诊断方法的建立[D];黑龙江八一农垦大学;2008年
3 陈波;基于口蹄疫病毒非结构蛋白3AB的ELISA鉴别检测方法的研究[D];上海交通大学;2008年
4 张先锋;口蹄疫病毒非结构蛋白基因3ABC、3AB、3A的克隆表达及3A蛋白间接ELISA方法的初步建立[D];新疆农业大学;2010年
5 裴志花;牛O型口蹄疫病毒内蒙古疫苗株p1基因的克隆与序列分析[D];内蒙古农业大学;2005年
6 金华利;口蹄疫病毒vp1体外表达和DNA疫苗免疫效果的研究[D];新疆大学;2004年
7 孙琳;MUC1肿瘤抗原和口蹄疫病毒抗体检测方法的建立[D];吉林大学;2004年
8 王钢;口蹄疫病毒VP1基因的序列分析及巢式PCR检测研究[D];四川农业大学;2005年
9 田飞鹏;杆状病毒介导O型口蹄疫病毒P12A和3C基因在Sf9细胞和BHK细胞中的共表达[D];西北农林科技大学;2010年
10 杜宇;猪O型口蹄疫病毒VP_1基因的原核表达及重组蛋白的反应原性检测[D];山西农业大学;2005年
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