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肉桂地链霉菌接合转移体系的构建及nsdA基因中断对其次级代谢的影响

陈芬  熊伟  闵勇  范与庆  梁运祥  吕和平  邢仁昌  郑应华  
【摘要】:以pSET152和pHL212为出发质粒,通过供体大肠杆菌(Escherichia coli)ET12567(pUZ8002)和S17-1属间接合转移肉桂地链霉菌(Streptomyces cinnamonensis),构建并优化了肉桂地链霉菌的接合转移系统。利用PCR介导的基因置换技术快速构建了肉桂地链霉菌nsdA(negative regulator of Streptomyces differentiation)基因中断载体,通过接合转移导入肉桂地链霉菌工业菌株BIB2005,筛选得到1株遗传稳定表型为AprRKanS的接合子BIB309。PCR分析结果显示,该接合子即为nsdA中断突变株。与出发工业菌株相比,在摇瓶水平上nsdA中断突变株BIB309莫能菌素产能提高了2.7倍。

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