收藏本站
收藏 | 投稿 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

嗜热子囊菌光孢变种cbh1基因的cDNA克隆及在毕赤酵母的高效表达

陈静  李多川  张玉芹  杜欣可  
【摘要】:以嗜热子囊菌光孢变种(Thermoascusaurantiacusvar.levisporus)总RNA为模板,通过RT-PCR克隆出外切纤维二糖水解酶基因cbh1片段,采用RACE方法获得全长cDNA克隆,其全长为1710bp,编码一种由457个氨基酸组成的单肽,推导的氨基酸序列中1~19位为信号肽序列,GenBank的登录号为AY840982。将该片段克隆到毕赤酵母(Pichiapastoris)分泌型表达载体pPIC9K上,获得表达重组质粒pPIC9K/cbh1,转化毕赤酵母GS115,所得重组子经PCR验证后进行诱导表达,筛选出一重组子GSp-15,经144h诱导后,外切纤维二糖水解酶表达量为1.17mg/mL,产酶活力为20.3U/mL。

知网文化
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前20条
1 马长艳,周开亚,郭豫杰,赵乃刚,汪朝晖;中华绒螯蟹卵巢新基因EJO6的全长cDNA克隆和序列分析[J];南京师大学报(自然科学版);2003年03期
2 沈洁,郭连英,金成刚;新基因TMBP-1的全长cDNA克隆[J];大连医科大学学报;2000年04期
3 张焦平,张子平,邹志华,王艺磊;日本对虾(Penaeus japonicus)性腺差异表达基因GD13之cDNA5’端克隆[J];厦门大学学报(自然科学版);2004年06期
4 戚金亮,马小娟,王丽,印莉萍,韩振海;常规PCR与RACE结合法快速从cDNA文库中克隆基因[J];首都师范大学学报(自然科学版);2004年01期
5 毛立群,吴乃虎;RACE——低丰度mRNA的cDNA末端快速扩增[J];高科技与产业化;1996年03期
6 朴;促使细胞自杀的“Fas”的cDNA克隆化成功[J];中国生物工程杂志;1992年06期
7 王福生;丙型肝炎病毒的分子遗传学研究现状[J];军事医学科学院院刊;1993年03期
8 张勇群;代龙军;陈金军;蒋立平;刘中华;梁宋平;;一种新的从新疆穴居狼蛛中鉴定的细胞裂解肽(英文)[J];中国生物化学与分子生物学报;2009年09期
9 刘海峰;杨成君;赵权;李波;王军;;山葡萄中类黄酮3’-羟化酶基因(F3’H)cDNA的克隆和分析[J];植物生理学通讯;2009年12期
10 黄震宇,朱伟民,洪锦心;PCR技术在单克隆抗体cDNA的筛选及标记同位素探针上的应用[J];细胞与分子免疫学杂志;1992年04期
11 赵崇,王立斌,宋学文,张镜宇;大鼠脑神经元特异性烯醇化酶基因的cDNA克隆及序列分析[J];中国生物化学与分子生物学报;1994年03期
12 王罡,万里川,胡汉桥,王萍,吴颖,季静;小麦抗白粉病特异表达cDNA克隆的分子生物学研究[J];生物技术通讯;1997年Z1期
13 陈东海,寿成超;抗肿瘤单抗3H11对应抗原cDNA片段的克隆[J];中国生物化学与分子生物学报;1999年02期
14 何水林,赖钟雄,官德义,郑金贵;辣椒钙调蛋白cDNA克隆[J];农业生物技术学报;2000年02期
15 郭润芳;李多川;;嗜热真菌Thermomyces lanuginosus热稳定几丁质酶基因的cDNA克隆及表达[J];微生物学报;2006年01期
16 刘朝良;王磊;梶浦善太;中垣雅雄;;天蚕卵黄原蛋白cDNA的克隆及序列分析[J];激光生物学报;2006年01期
17 肖颖;赵冬;王刚;;紫杉醇合成途径中紫杉烯合成酶cDNA的克隆[J];中国农业科学;2006年10期
18 杨之帆;何光存;;褐飞虱乙酰胆碱酯酶基因全长cDNA的克隆及序列分析[J];昆虫学报;2006年06期
19 丁中;彭德良;黄文坤;贺文婷;高必达;;甘薯茎线虫乙酰胆碱酯酶基因Dd-ace-2全长cDNA的克隆和序列分析[J];生物工程学报;2008年02期
20 韩笑;王义强;陈介南;张伟涛;谭力;刘海波;;黑曲霉bgl基因的cDNA克隆及序列分析[J];生物学杂志;2008年04期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 韩春来;汪明;;一种获取新基因的有效方法——cDNA末端快速扩增(RACE)[A];中国畜牧兽医学会2004学术年会暨第五届全国畜牧兽医青年科技工作者学术研讨会论文集(下册)[C];2004年
2 张利红;张为民;陈振业;;黄鳝的鸡Ⅱ型促性腺激素释放激素的cDNA克隆[A];中国生理学会肥胖的临床与基础暨神经免疫内分泌学术研讨会论文摘要汇编[C];2003年
3 曾燕如;黄敏仁;王明庥;;杨树抗黑斑病相关基因的cDNA克隆及序列分析[A];中国的遗传学研究——中国遗传学会第七次代表大会暨学术讨论会论文摘要汇编[C];2003年
4 韩红兵;徐署光;连正兴;陆泉枝;李宁;;中国人白细胞介素-12(hIL-12)cDNA克隆及序列分析[A];全国首届动物生物技术学术研讨会论文集[C];2004年
5 陈炯;陈剑平;;马铃薯γ病毒属成员基因组全序列的简并引物PCR和RACE扩增方法[A];中国植物病理学会第七届代表大会暨学术研讨会论文摘要集[C];2002年
6 富伟能;Li Jia;孙开来;;人白血病K562和CEM/VLB_(100)细胞Apaf-1 cDNA的类型与表达的关系[A];中国的遗传学研究——中国遗传学会第七次代表大会暨学术讨论会论文摘要汇编[C];2003年
7 叶建国;陈瑾;左小潘;吉永华;;两个新型东亚钳蝎类α型毒素的cDNA克隆和鉴定[A];中国毒理学会生物毒素毒理专业委员会第4次、中国生物化学与分子生物学会毒素专业组第5次学术研讨会论文摘要[C];2001年
8 杨惠夷;张利红;张为民;张扬;;黄鳝促性腺激素释放激素受体的cDNA克隆[A];第二届中国动物学会比较内分泌学分会和发育生物学分会联合学术研讨会论文集[C];2005年
9 曹湛;司红彬;武力;向蓉;曾振灵;;猪细胞色素P450 3A亚族基因的克隆及表达[A];中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十次研讨会论文摘要集[C];2009年
10 付艳平;苏生昌;彭友良;;稻瘟菌诱导性水稻小GTP结合蛋白的cDNA克隆[A];中国植物病理学会第七届代表大会暨学术研讨会论文摘要集[C];2002年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 葛荣朝;小麦耐盐相关基因cDNA的克隆与功能研究[D];河北师范大学;2005年
2 李华;嗜热毛壳菌(Chaetomium thermophilium)热稳定性β-1,3-葡聚糖酶的纯化特性及cDNA克隆[D];山东农业大学;2008年
3 王骥;福寿螺(Ampullaria crossean)多功能纤维素酶EGX的研究[D];中国科学院研究生院(上海生命科学研究院);2004年
4 许守明;小盐芥C_2H_2类锌指蛋白基因ThZF1的克隆及其功能研究[D];中国农业大学;2005年
5 任清;早熟禾中DREB基因的克隆及特性分析[D];中国农业科学院;2005年
6 马彩霞;棉铃虫细胞色素P450基因的克隆与表达[D];西北农林科技大学;2005年
7 童斌;柿果实扩张蛋白cDNA克隆及其生物活性研究[D];西北农林科技大学;2003年
8 刘思秀;应用生物技术对植物材料抗冷胁迫的研究[D];复旦大学;2004年
9 张腾国;高山离子芥MAP激酶基因CbMAPK3的克隆及功能分析[D];兰州大学;2006年
10 苏敬东;γ-干扰素调变小鼠乳腺癌细胞系MA891转移潜能分子机制的研究[D];中国协和医科大学;1998年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 于恺;嗜热子囊菌光孢变种几丁质酶基因的克隆和表达[D];山东农业大学;2008年
2 陈卫红;嗜热子囊菌光孢变种β-葡萄糖苷酶的基因克隆、表达及酶学性质分析[D];山东农业大学;2009年
3 姬翔;杜氏盐藻(Dunaliella salina)14-3-3蛋白基因cDNA全长的克隆与序列分析[D];郑州大学;2006年
4 杨子荣;草鱼α1-抗胰蛋白酶基因cDNA全长克隆与表达分析[D];湖南农业大学;2008年
5 邱峰;甘蓝型油菜Cr3529正向消减文库部分片段的序列分析及反向文库中一个未知蛋白基因的cDNA克隆[D];四川大学;2005年
6 陈春娜;胭脂鱼α-淀粉酶的cDNA克隆与组织表达研究[D];西南大学;2007年
7 袁树楷;荣昌猪BPI基因全长cDNA克隆及SNP分析[D];西南大学;2007年
8 贺俊飞;中华卵索线虫tra-1基因的克隆及表达分析[D];华中师范大学;2008年
9 黄发平;水分胁迫下小麦脱水素基因wzy2的RACE克隆及游离氨基酸的研究[D];西北农林科技大学;2008年
10 王淑娟;小麦叶绿体信号识别颗粒54和G蛋白的全长cDNA克隆及生物信息学分析[D];西北农林科技大学;2008年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 企文;B-BUS:宽带运营统一解决方案[N];通信产业报;2003年
2 谢建平 执笔;以促进人类科技创新为准绳[N];医药经济报;2001年
3 蓝容;美国、日本开发植物塑料[N];中国包装报;2005年
4 余海涛;重新认识步行[N];中国医药报;2003年
5 佚名;诠释环境与人的“亲密”关系[N];医药经济报;2001年
6 赵毅;六三一所共产党员把先进性体现在创新上[N];中国航空报;2005年
7 记者 曹继军 通讯员 赵如江;我科学家首次发现附睾中一种抗菌肽基因[N];光明日报;2001年
8 东娜;安捷伦推出第三套基因筛选微阵列试剂盒[N];科技日报;2002年
9 ;WDM全光网技术概述(上)[N];人民邮电;2001年
10 ;智能天线的研究进展[N];通信产业报;2002年
中国知网广告投放
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62982499
  • 010-62783978