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《中华男科学杂志》 2011年07期
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隐丹参酮对Akt2基因缺失雄性小鼠生殖及代谢影响的研究

赵玲玲  张跃辉  王娜梅  吴效科  侯丽辉  
【摘要】:目的:检测蛋白激酶B2(Akt2)基因缺失对睾丸生殖功能的影响,探讨隐丹参酮对Akt2基因缺失雄性小鼠生殖功能的调控及其分子机制。方法:①雄性Akt2-/-纯合子小鼠29只,Akt2+/+野生型小鼠15只。将Akt2+/+小鼠随机分为2组:A(Akt2+/+,基础组,n=7)、B(Akt2+/+,刺激组,n=8);Akt2-/-小鼠随机分为4组:C(Akt2-/-,基础组,n=7)、D(Akt2-/-,刺激组,n=8)、E(Akt2-/-,溶剂组,n=7)、F(Akt2-/-,隐丹参酮组,n=7);②B组、D组行人绒毛膜促性腺激素(hCG)兴奋试验,5 IU/20 g,A组、C组予等体积的生理盐水,刺激4 h后取材;F组给予中药隐丹参酮治疗,600 mg/kg每日2次灌胃,连续8周,E组予等体积的溶剂,A、B、C、D组测随机血糖,E及F组治疗前后分别行口服葡萄糖耐量实验(OGTT)2 g/kg体重。③称取各组体重和双侧睾丸重量,测血清睾酮(T)水平,RT-PCR法检测各组睾丸甾体激素合成酶及糖代谢相关基因表达水平。结果:①随机血糖测定发现C、D组小鼠血糖显著高于A、B组小鼠[(10.38±1.42),(10.96±1.81)mmol/L vs(7.92±0.63),(8.32±0.44)mmol/L,P0.05],OGTT实验发现,治疗前后E组和F组0、30、60及120 min血糖值均无显著差别(P0.05);②体重各组之间无显著差别(P0.05),C、D组睾丸重量显著高于A、B组[(0.17±0.01),(0.17±0.01)gvs(0.15±0.02),(0.15±0.01)g,P0.05],E、F组睾丸重量无显著差别。血清T水平C组显著高于A组[(9.08±1.59)nmol/L vs(6.42±0.95)nmol/L,P0.05],F组显著低于E组[(5.94±0.49)nmol/L vs(8.18±1.44)nmol/L,P0.05];③RT-PCR检测,基础状态下C组小鼠睾丸组织中Cyp11、Cyp17、3β-HSD、Star、Gsk3β、Erk-1、MCM2 mRNA的表达水平显著高于A组小鼠(P0.05);hCG刺激后B组和D组Cyp11、Cyp17、3β-HSD、StarmRNA的表达都显著增强,但两组间无显著差别(P0.05);F组睾丸组织中Cyp11、Cyp17、3β-HSD、Star、Gsk3β、Erk-1、MCM2 mRNA的表达水平较E组明显下降(P0.05)。结论:Akt2基因缺失可以影响雄性小鼠糖代谢及睾丸功能,出现糖代谢异常及雄激素分泌异常,其分子机制为糖代谢关键分子表达增高及雄激素合成关键酶表达升高,中药隐丹参酮可以降低雄激素水平,其作用机制为降调节雄激素合成关键酶的表达水平。

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