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《南京医科大学学报(自然科学版)》 2018年11期
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SP1基因在sublytic C5b-9促大鼠肾小球系膜细胞增殖中的作用

朱宇峰  蔡梦媛  刘昌伟  王庆林  张恩瑞  钱宝梅  张志伟  赵聃  邱文  王迎伟  
【摘要】:目的:检查特异性蛋白1(specificity protein 1,SP1)在Thy-1肾炎(Thy-1 nephritis,Thy-1N)大鼠肾组织中和亚溶解型C5b-9(sublytic C5b-9)刺激的大鼠肾小球系膜细胞(glomerular mesangial cells,GMCs)中的表达情况,并探讨SP1表达上调对sublytic C5b-9促大鼠GMCs增殖的作用。方法:复制大鼠Thy-1N模型,同时用sublytic C5b-9刺激体外培养的大鼠GMCs,分别用real-time PCR和Western blot检查Thy-1N大鼠肾组织(体内)和sublytic C5b-9刺激的大鼠GMCs(体外)中SP1基因的mRNA和蛋白表达水平及其表达时相。与此同时,构建SP1基因的表达质粒(p EGFP-N1/SP1-His)和发夹状小干扰RNA质粒(SP1shRNA,shSP1)。将上述质粒分别转染大鼠GMCs(同时设对照质粒转染组),再给予或不给予sublytic C5b-9刺激。用real-time PCR和Western blot检查SP1表达量,并行CCK-8实验检查GMCs的增殖情况。结果:在Thy-1N大鼠肾组织和sublytic C5b-9刺激的大鼠GMCs中,SP1 mRNA和蛋白表达水平均显著上调,且其体内外表达时相较为一致。体外过表达SP1可显著促进GMCs增殖,而沉默SP1可明显抑制sublytic C5b-9诱导的GMCs增殖反应。结论:Sublytic C5b-9刺激大鼠GMCs后能通过上调SP1表达促进GMCs增殖。

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