收藏本站
《免疫学杂志》 2007年04期
收藏 | 投稿 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

小鼠MIP-1α-DT390重组免疫毒素原核表达载体的构建及鉴定

吕梅励  李虹  梁伟波  李明远  蒋忠华  贾怡  陈文捷  张林  
【摘要】:目的构建小鼠MIP-1α基因和白喉杆菌外毒素DT390基因的原核融合表达载体,诱导并鉴定该蛋白的表达。方法通过RT-PCR获得mMIP-1α基因,通过PCR扩增质粒SRα-DT390获得DT390基因,酶切、连接,构建原核表达载体pET-32a(+)-mMIP-1α-DT390,重组质粒证实构建成功后,转化感受态大肠杆菌BL21(DE3),通过IPTG诱导融合蛋白表达,并用SDS-PAGE和蛋白免疫印迹法鉴定。结果成功构建了mMIP-1α与DT390基因的原核融合表达载体pET-32a(+)-mMIP-1α-DT390,重组载体在大肠杆菌中获得了稳定的表达,表达蛋白的相对分子质量与预期值一致,并可被抗mMIP-1α和抗白喉毒素的特异性抗体所识别。结论获得了mMIP-1α与DT390融合基因在原核系统中的稳定表达,为研究其临床应用奠定了基础。

手机知网App
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前2条
1 李海峰,李军;原发性进展性多发性硬化[J];国外医学(神经病学神经外科学分册);2003年01期
2 施琦赟;吕传真;;多发性硬化与趋化因子及其受体[J];中国临床神经科学;2006年05期
中国博士学位论文全文数据库 前2条
1 贾怡;一种新型重组免疫毒素DT390-Rantes治疗小鼠实验性自身免疫性脑脊髓炎的研究[D];四川大学;2006年
2 吕梅励;mMIP-1α-DT390重组免疫毒素治疗小鼠实验性自身免疫性脑脊髓炎的研究[D];四川大学;2006年
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 吕梅励;李虹;梁伟波;陈文捷;贾怡;蒋忠华;张卫东;张林;;mM IP-1α-DT390重组免疫毒素真核表达载体的构建及表达研究[J];四川大学学报(医学版);2007年01期
2 吕梅励;李虹;梁伟波;陈文捷;贾怡;李明远;蒋忠华;张林;;mMIP-1α-DT390核酸制剂治疗实验性变态反应性脑脊髓炎的研究[J];南方医科大学学报;2007年06期
3 王润华,沈倍奋;重组免疫毒素研究概况[J];国际免疫学杂志;1992年01期
4 吴雨岗,汪良,丘凌,何宋兵,杨桂林,万兵,张雁云;趋化性细胞因子MIP-1α促小鼠外周血DC前体细胞动员的实验研究[J];现代免疫学;2005年03期
5 张小平,杜冰,钱旻;PE重组免疫毒素在肿瘤导向治疗中的应用[J];免疫学杂志;2004年S1期
6 覃林花,卫立辛;巨噬细胞类症蛋白-1α趋化因子及其在肿瘤治疗研究中的进展[J];第二军医大学学报;2001年04期
7 潘静,李招权,蒲晓允,邓均,黄辉;MIP-1α联合IL-8对小鼠CD34~+细胞体外增殖的影响[J];重庆医学;2002年12期
8 罗良生,王爱东,黄强;抗胶质瘤重组免疫毒素SZ39-PE40的原核表达、纯化及复性研究[J];细胞与分子免疫学杂志;2002年04期
9 付勇,刘彦仿,赵君,杨守京,孙志伟,刘军;二硫键稳定的人源化抗肝癌单链抗体与人嗜酸性细胞神经毒素重组免疫毒素融合基因的构建及表达[J];西北国防医学杂志;2004年05期
10 罗良生,黄强;基因重组免疫毒素研究进展[J];国外医学.肿瘤学分册;2000年05期
中国重要会议论文全文数据库 前2条
1 葛洪霞;廖玉华;程翔;李彬;刘英;郭张强;;急性心肌梗死大鼠趋化因子表达与心功能的关系[A];中华医学会心血管病分会第八次全国心血管病学术会议汇编[C];2004年
2 卢美萍;杜立中;俞珍珠;陈湘湘;孙眉月;;rhSOD-肺表面活性物质磷脂乳剂气道给药治疗胎粪诱导幼鼠急性肺损伤的实验研究[A];2004年浙江省危重病学学术年会论文汇编[C];2004年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 吕梅励;mMIP-1α-DT390重组免疫毒素治疗小鼠实验性自身免疫性脑脊髓炎的研究[D];四川大学;2006年
2 金海龙;重组免疫毒素CTLA4-ScFv-Mel的构建、制备及活性研究[D];中国人民解放军军医进修学院;2012年
3 邵文爱;单纯疱疹病毒Ⅱ型gD糖蛋白加趋化因子MIP-1α核酸疫苗的构建及初步免疫观察[D];天津医科大学;2004年
4 曾令宇;活化T细胞选择性清除分子hS83-P34的构建、制备及功能研究[D];四川大学;2005年
5 李虹;IL-18-PE38重组免疫毒素及其治疗实验性变态反应性脑脊髓炎的研究[D];四川大学;2004年
6 王芳;免疫促凋亡分子e23sFv-TD-tBID的基因构建、表达及肿瘤靶向杀伤作用的研究[D];第四军医大学;2009年
7 贾怡;一种新型重组免疫毒素DT390-Rantes治疗小鼠实验性自身免疫性脑脊髓炎的研究[D];四川大学;2006年
8 陈文捷;DT390-IP10新型重组免疫毒素及其治疗实验性变态反应性脑脊髓炎的研究[D];四川大学;2006年
9 马怡然;T淋巴细胞分泌的MIP-1α与人脑微血管内皮细胞膜受体CCR5相互作用:Aβ依赖性促进T淋巴细胞穿过血脑屏障[D];中国医科大学;2007年
10 刘艳华;小分子重组免疫毒素GnRH-luffinS的制备及其靶向治疗肿瘤的实验研究[D];中国人民解放军军事医学科学院;2008年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 徐伟;重组免疫毒素抗c-Met/PE38KDEL对胃癌细胞增殖及凋亡的影响[D];南京医科大学;2011年
2 金洪涛;抗HIV-1单链抗体基因的表达及重组毒素的构建[D];中国人民解放军军需大学;2002年
3 赵强子;抗肝癌单链抗体融合PE38重组免疫毒素的构建、表达及纯化[D];中国人民解放军第四军医大学;2003年
4 夏胜英;呼吸道合胞病毒感染患儿血清趋化因子的测定及意义[D];武汉大学;2005年
5 顾小龙;堆型艾美耳球虫单链抗体-PE40重组毒素构建及活性研究[D];河北农业大学;2006年
6 朱晓娟;重组免疫毒素抗c-Met/PE38KDEL的构建、表达、纯化及初步鉴定[D];南京医科大学;2009年
7 王子露;全人源抗肝癌重组免疫毒素的构建、表达及初步鉴定[D];南京医科大学;2005年
8 王一凡;雷公藤内酯醇对佐剂性关节炎大鼠中CC趋化因子表达的影响[D];中国科学院研究生院(上海生命科学研究院);2007年
9 郑君;重组免疫毒素ScFv-PE40在大肠杆菌中的表达、纯化及活性测定[D];吉林农业大学;2008年
10 林长艺;OX-LDL对类风湿关节炎患者外周血单核细胞表达IL-10、MIP-1α的影响[D];福建医科大学;2008年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62791813
  • 010-62985026