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《免疫学杂志》 2007年01期
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pTARGET-TCR Vβ5.2真核表达质粒的构建及表达

马丽平  李蕴  赵文明  刘振龙  
【摘要】:目的构建含大鼠TCR Vβ5.2基因的重组真核表达质粒。方法以RT-PCR法扩增Lewis大鼠脾脏淋巴细胞的TCR Vβ5.2基因片段,将目的基因直接克隆到真核表达载体pTARGET中,构建重组质粒pTARGET-TCR Vβ5.2。连接产物转化E.coliJM109细胞后进行蓝白斑筛选,并经菌落PCR和DNA测序进行鉴定。将重组质粒以肌注法免疫Balb/c小鼠,用RT-PCR和免疫组化方法分别检测重组质粒在注射部位的转录和表达。通过脂质体介导,将重组质粒转染COS-7细胞进行瞬时表达,用免疫细胞化学染色法检测目的基因在真核细胞内的表达。结果测序鉴定证实,TCR Vβ5.2基因已被正确插入到pTAR-GET载体中,并检测到肌肉组织和COS-7细胞内目的蛋白的表达。结论成功构建了重组真核表达质粒pTARGET-TCR Vβ5.2,为进行TCR VβDNA疫苗对胶原诱导性关节炎大鼠保护作用的研究提供了基础。

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【参考文献】
中国期刊全文数据库 前2条
1 赵文明,山本一彦;类风湿关节炎小鼠关节聚集的T细胞克隆型变化的分析[J];细胞与分子免疫学杂志;2004年01期
2 张新梅,赵文明,李蕴,刘振龙;胶原诱导的关节炎大鼠关节中浸润的T细胞TCR Vβ克隆型分析[J];细胞与分子免疫学杂志;2005年05期
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前3条
1 张新梅,赵文明,李蕴,刘振龙;胶原诱导的关节炎大鼠关节中浸润的T细胞TCR Vβ克隆型分析[J];细胞与分子免疫学杂志;2005年05期
2 李蕴;马丽平;赵文明;刘振龙;;大鼠TCR Vβ8.2基因真核表达质粒的构建及表达[J];细胞与分子免疫学杂志;2006年05期
3 肖婧;赵文明;李蕴;王炜;李慎涛;赖丽仁;;大鼠T细胞受体Vβ5.2-HSP70和Vβ8.2-HSP70基因真核表达质粒的构建及表达[J];中国组织工程研究与临床康复;2007年10期
中国博士学位论文全文数据库 前2条
1 宋新强;含编码鸡Ⅱ型胶原基因的新型DNA Tolerizing疫苗的研制及其在治疗大鼠类风湿关节炎中的疗效观察[D];中国人民解放军军事医学科学院;2007年
2 何国雄;痹肿消汤对胶原诱导性关节炎大鼠滑膜组织annexin 1、aldolase A表达的影响[D];中南大学;2006年
中国硕士学位论文全文数据库 前1条
1 张翠华;siRNA对类风湿关节炎相关的HLA-DRB1*0405基因表达的抑制作用[D];扬州大学;2006年
【同被引文献】
中国期刊全文数据库 前5条
1 杨力建,李扬秋,陈少华,黄梅娟,韩素芳,张学利,张涛;CML细胞诱导自体和脐血T细胞TCR Vβ谱系和杀伤性分析[J];免疫学杂志;2004年05期
2 张新梅,赵文明,李蕴,刘振龙;胶原诱导的关节炎大鼠关节中浸润的T细胞TCR Vβ克隆型分析[J];细胞与分子免疫学杂志;2005年05期
3 李蕴;马丽平;赵文明;刘振龙;;大鼠TCR Vβ8.2基因真核表达质粒的构建及表达[J];细胞与分子免疫学杂志;2006年05期
4 肖婧;赵文明;李蕴;王炜;李慎涛;赖丽仁;;大鼠T细胞受体Vβ5.2-HSP70和Vβ8.2-HSP70基因真核表达质粒的构建及表达[J];中国组织工程研究与临床康复;2007年10期
5 何文晓;李蕴;赵文明;刘振龙;葛平玲;肖婧;姜涛;;结核杆菌热休克蛋白肽段对胶原诱导性关节炎保护作用的研究[J];中国免疫学杂志;2006年12期
【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前1条
1 赵文明,山本一彦;类风湿关节炎小鼠关节聚集的T细胞克隆型变化的分析[J];细胞与分子免疫学杂志;2004年01期
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 李丙蓉;郑丹;邓华聪;刘金波;兰丽珍;郑宏庭;;人脂联素、球状脂联蛋白基因克隆及真核表达载体的构建与表达[J];中国糖尿病杂志;2007年06期
2 赵萌;徐青;于继云;余云舟;;一种拮抗HIV-1并靶向DC的融合基因的设计及表达鉴定[J];生物工程学报;2011年08期
3 高洁;常婷;王键;李柱一;;AChR-IgG Fc段融合蛋白真核表达载体的构建及表达[J];中国神经免疫学和神经病学杂志;2010年03期
4 ;[J];;年期
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中国重要会议论文全文数据库 前10条
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2 邱洁;周晓玉;程锐;张敏;曹兴国;王玢;郭锡熔;;人类肥胖相关新基因LYRM1真核表达载体的构建及稳定转染3T3-L1细胞系的建立[A];第六届江浙沪儿科学术会议暨儿科学基础与临床研究进展学术班论文汇编[C];2009年
3 汤建平;陈晓翔;顾越英;沈南;;干扰素诱导蛋白3基因在系统性红斑狼疮发病中的意义及其真核表达载体的构建[A];第十届全国风湿病学学术会议论文集[C];2005年
4 高洁;李柱一;;AChR-Fc融合蛋白对实验性自身免疫性重症肌无力的作用[A];中华医学会第十三次全国神经病学学术会议论文汇编[C];2010年
5 兰丽珍;弓军胜;杨静;;加强型绿色荧光蛋白和C肽双基因在内皮细胞共转染的表达[A];2006年中华医学会糖尿病分会第十次全国糖尿病学术会议论文集[C];2006年
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中国博士学位论文全文数据库 前10条
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中国硕士学位论文全文数据库 前10条
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3 史文平;基于糖尿病皮肤溃疡局部微环境特征初步构建组织工程皮肤的研究[D];天津医科大学;2011年
4 索剑飞;转人类胰岛素基因鸡的研究[D];河南科技大学;2010年
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7 杨艳;未知功能基因JAZF1过表达对脂肪细胞、肝细胞糖脂代谢的影响[D];重庆医科大学;2010年
8 谭琪;SV40T荧光真核表达载体构建及转染大鼠胰岛细胞的研究[D];暨南大学;2008年
9 郭贺;Leptin基因佐剂及蛋白对小鼠树突状细胞和淋巴细胞的影响[D];暨南大学;2010年
10 孟庆萍;IRAK1基因ShRNA质粒表达载体的构建与鉴定[D];中国医科大学;2010年
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